IGFBP-7在子宫内膜腺癌中的表达及其意义

目的:研究胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)在子宫内膜腺癌组织的表达,并分析其与子宫内膜样腺癌临床病理参数之间的关系。方法:选取2011年1月~2012年12月郑州大学第一附属医院病理科存档的手术切除石蜡包埋子宫内膜组织标本共123例,其中子宫内膜样腺癌61例,子宫内膜非典型增生22例,子宫内膜简单性增生10例,正常子宫内膜组织30例。免疫组化SP法检测IGFBP-7的表达,实时荧光定量RT-PCR法检测IGFBP-7 mRNA的表达。分析IGFBP-7的阳性表达率与子宫内膜样腺癌临床病理参数之间的关系。结果:(1)免疫组化法检测显示,子宫内膜样腺癌组织中的IGFBP-7阳性表达率显著高于子宫内膜非典型增生和子宫内膜简单性增生(P<0.05);IGFBP-7的表达与子宫内膜癌的病理分级、超重、合并高血压、合并糖尿病有关(P<0.05);(2)RT-PCR检测结果显示,子宫内膜样腺癌中IGFBP7 mRNA表达量显著高于子宫内膜非典型增生、简单性增生和正常子宫内膜组织(P<0.01)。结论:IGFBP-7基因可能参与了子宫内膜腺癌的发生发展过程。

特发性矮小症儿童rhGH治疗第八天血清中IGF-1和IGFBP-3变化与疗效关系的研究

目的探讨重组人生长激素(rhGH)治疗特发性矮小症(ISS)第八天,血清中类胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和类胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-3)浓度变化与疗效的关系。方法 60例特发性矮小症儿童,用rhGH治疗,剂量为0.15IU/(kg·d),疗程6个月;检测治疗前、治疗第八天、治疗第六个月末血清中IGF-1、IGFBP-3的浓度及身高变化;治疗第八天血清中IGF-1、IGFBP-3浓度升高30%以上者分为敏感组,低于10%以下为非敏感组,对比两组血清浓度变化并比较相应的身高速率(GV)。结论 ISS儿童用rhGH治疗第八天血清中IGF-1、IGFBP-3浓度升高30%以上,预示未来用rhGH改善其成人终身高的疗效较好。

猪链球菌2型四川人源分离株ZYH18纤连蛋白结合蛋白基因的克隆和序列分析

目的对2005年猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,S.suis2)四川资阳人源分离株ZYH18纤连蛋白结合蛋白(FBPS)基因进行克隆和序列分析。方法以ZYH18的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白基因片段,克隆于pMD-T18载体,构建成载体pMD-T-fbps,转化到宿主菌TG1中,进行序列测定(GenBank登录号为DQ345444)。测序结果与实验室保存的其它7株猪链球菌2型临床分离菌株测序结果及GenBank提交序列AF438158进行编码区基因的同源性比对。结果成功克隆了实验室保存的分离于不同时间和地点的,包括ZYH18在内的8株S.suis2临床分离菌株的fbps基因,并对其编码区基因进行了同源性比对。结论实验室保存的8株菌的FBPS编码区基因同源性高达100%,并不因分离时间和地点的不同而不同;与GenBank提交序列AF438158同源性为99%,存在两个氨基酸的差异。

卡介苗D2株分泌蛋白基因植物表达载体的构建

目的 克隆卡介苗 (BCG)D2株 32 -kDa分泌蛋白基因 (fbpA基因 ) ,构建重组植物表达载体 pBI12 1-fbpA ,为研制转基因植物口服疫苗奠定基础。 方法 采用PCR法从BCGD2株基因组DNA中分离fbpA基因 ,构建重组克隆载体 pUCm -T -fbpA ,经过单菌落PCR法、BamHⅠ、SacⅠ和HindⅢ单 /双酶切、DNA序列分析鉴定后 ,将fb pA基因亚克隆入植物表达载体 pBI 12 1,得到重组载体pBI 12 1-fbpA ,并转化根癌农杆菌株EHA10 5 ,用PCR法对其进行鉴定。结果 重组载体 pUCm -T -fbpA测序后证实fbpA基因由 10 4 1bp组成 ,包括 1个 10 14bp的开放阅读框。DNA序列上游由编码一段信号肽的 12 9bp组成 ,并对 32 -kDa蛋白的分泌起决定作用。相应的编码成熟蛋白的序列由 885个碱基组成。fbpA基因与来源于BCG1173P2株的同一基因序列完全一致。此外 ,构建的重组植物表达载体 pBI12 1-fbpA成功转入根癌农杆菌株EHA10 5。结论 编码BCGD2株 32 -kDa分泌蛋白的fbpA基因分离成功 ,DNA序列分析证实fbpA基因在分枝杆菌中高度保守 ,为进一步深入分析fbpA基因以及研制抗结核病转基因植物疫苗奠定了基础。

形成素结合蛋白调节粗糙脉孢菌菌丝极性生长发育

微丝骨架在真菌菌丝极性生长中具有重要的功能,而其动态解聚-聚合特性是其实现功能的前提.形成素作为肌动蛋白结合蛋白,是微丝骨架动态调控因子之一,而形成素结合蛋白对于形成素发挥功能非常关键,但是对其在真菌极性生长发育中的功能还未见报道.本文以丝状真菌粗糙脉孢菌为材料,利用同源重组基因敲除技术,通过电击转化、分生孢子过膜以及PCR鉴定的方法,获得了形成素结合蛋白基因缺失突变菌株(FBPKO).进一步利用平板生长方法并结合细胞壁染色对突变菌株的表型进行分析.结果显示,与野生型相比,在分生孢子接种后24 h内突变菌株FBPKO的菌丝生长明显减慢且分支异常.这些结果表明,形成素结合蛋白调节着粗糙脉孢菌菌丝早期的极性生长发育.