迷迭香酸与抗菌药联合对含fosA3基因细菌抑菌效果的研究

试验旨在探讨迷迭香酸与抗菌药联合体外抗含fosA3耐药基因大肠杆菌的效果。本试验对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,用牛津杯法测定迷迭香酸的抑菌活性,平板涂布法测定迷迭香酸的杀菌活性,采用96孔反应板二倍微量稀释法分别检测迷迭香酸与抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),再用微量棋盘稀释法测定迷迭香酸与抗菌药联合作用后的分级抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,分离到含fosA3耐药基因大肠杆菌;迷迭香酸的MIC为640μg/mL,迷迭香酸与环丙沙星、左旋氧氟沙星、黏杆菌素、加替沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢噻呋钠联合应用后其FICI≤0.5,有协同作用;与头孢曲松钠、诺氟沙星、痢菌净联合应用后0.5<FICI≤1,有相加作用;与阿莫西林、磷霉素、氟苯尼考联合应用后1<FICI≤2,存在无关作用。结果表明,迷迭香酸对含fosA3基因大肠杆菌有一定的抑菌活性和杀菌活性,其与部分抗菌药联合应用后,抗菌药体外抗菌活性显著增强。

爬山虎水提液与抗菌药联用对含fosA3基因大肠杆菌的抑菌效果

【目的】探讨爬山虎水提液与抗菌药联用对含fos A3基因大肠杆菌的抑菌效果,为爬山虎的综合开发利用提供参考依据。【方法】从病猪的肠道组织分泌物中分离菌株,对其进行鉴定和fos A3基因检测,采用二倍微量稀释法检测爬山虎水提液与不同抗菌药的最小抑菌浓度（MIC）,然后用微量棋盘稀释法测定爬山虎水提液与抗菌药联用的抑菌浓度指数（FICI）。【结果】分离获得的菌株为含fos A3基因大肠杆菌,爬山虎水提液对含fos A3大肠杆菌的MIC为500g/m L。以500 g/m L爬山虎水提液与头孢曲松钠、磷霉素、粘杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢噻呋钠、氟苯尼考、头孢噻肟等9种抗菌药联用的FICI为0.188~1.000,其中,爬山虎水提液与粘杆菌素、氟苯尼考间存在协同作用,与头孢曲松钠、磷霉素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢噻呋钠、头孢噻肟呈相加作用。【结论】爬山虎水提液可增强部分抗菌药对含fos A3大肠杆菌的抗菌活性,且呈协同或相加作用。

含珠草水提取物与抗菌药联用对含fosA3耐药基因大肠杆菌的抑菌效果研究

为探讨含珠草水提取物与抗菌药物联用体外抗含fos A3耐药基因大肠杆菌的效果,对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,采用96孔反应板二倍微量稀释法分别检测含珠草水提取物与抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),以1/2 MIC的含珠草水提取物与抗菌药联合诱导含fos A3耐药基因大肠杆菌,并进行传代试验,采用微量棋盘稀释法测定含珠草水提取物与抗菌药联合作用后的部分抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,分离到的菌株为含fos A3耐药基因大肠杆菌;含珠草水提取物的MIC为0.5 g/m L,以0.25 g/m L的含珠草水提取物与14种抗菌药联合使用3代后,14种抗菌药的MIC显著降低,均降到1.562 5以下;含珠草水提取物与头孢曲松钠、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、头孢他啶、头孢噻呋钠联合应用后其FICI均小于等于0.5,与阿莫西林、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、克林沙星、阿米卡星、氟苯尼考联合应用后FICI均大于0.5且小于1。表明,含珠草水提取物与抗菌药联合应用后,抗菌药体外抗菌活性显著增强,二者之间具有协同或相加作用。

穿心莲水提取物联合抗菌药对含fosA3大肠杆菌的作用

研究穿心莲水提取物与抗菌药联合诱导细菌传代的体外抑菌活性。对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,用牛津杯法测定穿心莲水提取物的抑菌活性和平板涂布法测定穿心莲水提取物的杀菌活性,采用二倍微量稀释法体外检测穿心莲水提取物与抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),穿心莲水提取物与抗菌药联合诱导含fosA3型大肠杆菌细菌传代。研究结果,分离到fosA3型耐药基因大肠杆菌;穿心莲水提取物的MIC为1 g/m L,穿心莲水提取物与抗菌药联用后,可明显地增强头孢菌素类、青霉素类、氟喹诺酮类、喹啉类、磺胺类、氨基糖苷类、酰胺醇类和磷霉素对耐药菌的抑制作用。结果表明,穿心莲水提取物对含fosA3大肠杆菌有一定的抑菌活性和杀菌活性,与部分抗菌药联合应用后,抗菌药体外抗菌活性显著增强。

穿心莲中药血清联合抗菌药对含fosA3大肠杆菌的作用研究

为了探讨穿心莲中药血清与抗菌药联合体外抗含耐磷霉素基因fos A3(Fosfomycin Resistance Gene)大肠杆菌的效果,对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,采用二倍微量稀释法分别体外检测穿心莲水提取物,中药血清与抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),并以1/2 MIC的穿心莲中药血清与抗菌药联合诱导含fos A3大肠杆菌的传代试验。结果显示,分离的菌株为含fos A3大肠杆菌;穿心莲水提物的MIC为1.0 g/m L,中药血清的MIC为1.0 m L/m L,以0.5 m L/m L的穿心莲中药血清与头孢曲松钠、阿莫西林、诺氟沙星、粘杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢他啶、头孢噻呋钠、氟苯尼考和磷霉素等11种抗菌药联合诱导传代后MIC显著降低。表明穿心莲中药血清联合抗菌药体外诱导含fos A3大肠杆菌,抗菌活性明显增强,并对含fos A3型大肠杆菌具有一定的耐药逆转作用。

首次在猪源多重耐药肺炎克雷伯ST11型菌中发现blaKPC-2和fosA3基因

1996年首次在美国加利福尼亚州发现了肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC),从此以后,产KPC的肺炎克雷伯菌株(KPC-Kp)就在全世界广泛传播。由于KPC-Kp的多重耐药特征及其引起感染后的高死亡率,KPC-Kp的出现和快速传播给人类的健康带来了前所未有的挑战。此外,人源高致病力KPC-Kp的发现,使我们进一步加深了对KPC-Kp重要性的认识。Kp虽然广泛分布在健康动物的肠道,偶尔也会引起不同种属动物的非侵袭性感染,例如奶牛的乳房炎等。然而,与人源Kp相比,动物源Kp一直被认为是一种机会病原菌,它引起的感染和耐药性相关研究一直没有引起科研人员的重视。

Clonal spread of Escherichia coli O101:H9-ST10 and O101:H9-ST167 strains carrying fosA3 and blaCTX-M-14 among diarrheal calves in a Chinese farm,with Australian Chroicocephalus as the possible origin of E.coli O101:H9-ST10

During a 2018 antimicrobial resistance surveillance of Escherichia coli isolates from diarrheal calves in Xinjiang Province,China,an unexpectedly high prevalence(48.5%)of fosfomycin resistance was observed.This study aimed to reveal the determinants of fosfomycin resistance and the underlying transmission mechanism.Polymerase chain reaction(PCR)screening showed that all fosfomycin-resistant E.coli carried the fosA3 gene.Pulsed-field gel electrophoresis(PFGE)and southern blot hybridization revealed that the 16 fosA3-positive isolates belonged to four different PFGE patterns(i.e.,A,B,C,D).The fosA3 genes of 11 clonally related strains(pattern D)were located on the chromosome,while others were carried by plasmids.Whole-genome and long-read sequencing indicated that the pattern D strains were E.coli O101:H9-ST10,and the pattern C,B,and A strains were O101:H9-ST167,O8:H30-ST1431,and O101:H9 with unknown ST,respectively.Among the pattern C strains,the blaCTX-M-14 gene was co-localized with the fosA3 gene on the F18:A-:B1 plasmids.Interestingly,phylogenetic analysis based on core genome single nucleotide polymorphisms(cgSNPs)showed that the O101:H9-ST10 strains were closely related to a Australian-isolated Chroicocephalus-origin E.coli O101:H9-ST10 strain producing CTX-M-14 and FosA3,with a difference of only 11 SNPs.These results indicate possible international dissemination of the high-risk E.coli clone O101:H9-ST10 by migratory birds.

秦皮水提取物与部分西药对含fosA3大肠杆菌的联合作用

本试验初步探讨秦皮水提取物与抗菌药联合诱导含fosA3型耐药基因大肠杆菌传代的体外抑菌活性,为耐药大肠杆菌感染疾病提供治疗参考方案。采用二倍微量稀释法体外分别检测秦皮水提取物与抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),并以1/2 MIC的秦皮水提取物与抗菌药联合诱导含(fosfomycin resistance gene,FosA3)型大肠杆菌的传代试验。秦皮水提取物的MIC为1.0g/mL,以0.5g/mL的秦皮水提取物与头孢曲松钠、阿莫西林、诺氟沙星、粘杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢他啶、头孢噻呋钠、氟苯尼考和磷霉素11种抗菌药联合诱导传代后MIC显著降低。结果显示:秦皮水提取物联合抗菌药诱导耐药细菌体外抗菌活性明显增强,对含fosA3型大肠杆菌具有耐药逆转作用。

鸽源奇异变形杆菌中磷霉素耐药基因fosA3的流行与传播特征

为研究鸽源奇异变形杆菌中磷霉素耐药基因fosA3的流行与传播特征,从广东省佛山市某鸽场采集鸽子及环境样品72份,采用选择性培养基及MALDI-TOF-MS分离鉴定奇异变形杆菌。采用PCR检测质粒介导磷霉素耐药基因fosA3、fosC2以及fosA,采用微量肉汤稀释法测定阳性菌株耐药表型。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、全基因组测序以及构建核心基因组进化树分析菌株的亲缘关系。采用接合转移、Southern杂交及PCR-mapping方法探究fosA3的分子传播特征。结果显示,72份样品中共获得22株奇异变形杆菌,16株菌中检出fosA3,没有检出fosC2和fosA。fosA3阳性菌株均对磷霉素表现高水平耐药(MIC>256 mg/L),对受试9种抗菌药物耐药,呈现多重耐药表型。16株fosA3阳性菌株主要分为2种不同PFGE谱型,随机挑选2株代表性菌株进行全基因组测序并进行遗传进化树分析,发现其中1株fosA3阳性菌与数据库中1株人源奇异变形杆菌之间亲缘关系最近。16株阳性菌株中fosA3均位于染色体上,不能发生接合转移。有阳性菌株中均检测到IS26-orf3-Δorf2-orf1-fosA3-IS26的遗传结构。本研究鸽场奇异变形杆菌中染色体编码的fosA3存在较高的流行性,该基因主要通过菌株的克隆传播以及插入元件IS26介导的水平转移进行传播,应引起高度重视。

白头翁水提物与抗菌药联合对耐药大肠埃希菌作用研究

通过白头翁水提取物与抗菌药联合抗含耐磷霉素基因型和超广谱β-内酰胺酶型大肠埃希菌体外研究,为耐药菌感染的疾病防治提供理论依据。采用微量2倍稀释法测定白头翁水提取物与抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),并用1/2 MIC的白头翁水提取物与抗菌药联合诱导耐药大肠埃希菌。结果表明,白头翁水提取物的MIC大于0.5g/mL,以0.5g/mL的白头翁水提取物与13种抗菌药联合使用,可增强抗菌药抗菌活性,显著降低抗菌药MIC。白头翁水提取物联合抗菌药可用于耐药细菌感染疾病的临床治疗。

碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌对磷霉素耐药性及耐药机制

目的 研究碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)对磷霉素的耐药性,并阐明磷霉素的耐药机制。方法 收集大连医科大学附属第一医院2021年3月-2022年1月CRKP菌株135株,通过纸片扩散法检测其对磷霉素的敏感性,并比较分析磷霉素耐药组与非磷霉素耐药组药敏结果的差异。利用聚合酶链式反应(PCR)方法检测磷霉素耐药相关基因fos、murA、glpT、uhpT。利用质粒接合实验检测磷霉素耐药基因在种属间的传递情况。结果 筛选出磷霉素耐药菌株25株,耐药率为18.5%(25/135);磷霉素耐药的CRKP中,氨基糖苷类抗菌药物庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星的耐药率均高于非磷霉素耐药CRKP菌株(P<0.05);25株磷霉素耐药的CRKP中,24株携带fosA3基因,1株fosA3基因阴性CRKP也不存在murA、glpT和uhpT基因突变;11株CRKP可成功进行质粒接合并将fosA3基因传递给大肠埃希菌E.coli J53,同时伴随氨基糖苷类耐药基因rmtB的传递,使接合子同时获得磷霉素耐药性和氨基糖苷类耐药性。结论 CRKP对磷霉素耐药率较低,磷霉素的主要耐药机制为携带fosA3基因,并且该基因可通过质粒在种属间传递,同时伴随氨基糖苷类耐药基因的传递,推测磷霉素耐药基因fosA3与氨基糖苷类耐药基因rmtB可能存在于同一质粒上。

食品动物源沙门菌fosA_3基因的流行及传播特征

为研究质粒介导的磷霉素耐药基因fosA_3在食品动物源沙门菌中的流行状况及传播特征,采用PCR方法对本实验室保存的288株动物源沙门菌进行磷霉素耐药基因fosA_3、fosA和fosC2的检测,用琼脂稀释法测定阳性菌株对17种抗生素的敏感性,PCR检测其他相关耐药基因,玻片凝集法确定其血清型。采用脉冲场凝胶电泳(PFG E)和多位点序列分型(M LST)分析菌株间的亲缘关系。采用接合转移/转化、复制子分型、S1-PFGE和Southern杂交等对fosA_3的水平传播和质粒特征进行分析。结果显示,共筛选得到6株(2.1%)fosA_3阳性沙门菌,没有检测到fosA和fosC2。6株fosA_3阳性菌均表现出多重耐药,且同时携带blaCTX-M-9G(均为blaCTX-M-14)基因和floR基因,血清型检测均为印第安纳型。6株菌均为MLST(ST)17型,PFGE结果显示其图谱相似。质粒分析结果显示,fosA_3能通过IncN或IncA/C型质粒与blaCTX-M基因发生共同转移。本研究首次从国内不同地区采集的鸡粪便拭子样本中分离得到的沙门菌中检测到fosA_3基因,菌株的克隆传播和fosA_3与blaCTX-M随质粒的水平传播都加速了耐药性的散播,对公共卫生构成潜在威胁。

尿路感染产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对磷霉素耐药机制研究

目的探讨尿路感染产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对磷霉素的耐药情况及机制。方法收集2017年1月-12月浙江省人民医院分离的产KPC-2酶肺炎克雷伯菌16株,采用琼脂稀释法测定磷霉素敏感性;对磷霉素耐药基因fosA、fosB、fosC、fosX进行PCR扩增及测序分析;对磷霉素耐药肺炎克雷伯菌株进行多克隆位点序列测定及质粒接合试验。结果收集的16株尿路感染产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对磷霉素的耐药率为43.8%(7/16),7株磷霉素耐药株均携带fosA3耐药基因,未检到fosB、fosC、fosX耐药基因;携带fosA3基因的产KPC-2酶肺炎克雷伯菌均为ST11型别,并通过接合实验将fosA3转移至受体菌E.coli J53中。结论基因fosA3是介导本院尿路感染产KPC-2酶肺炎克雷伯菌磷霉素耐药的主要机制。此外,以ST11克隆型别为主的产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对磷霉素耐药具有较高水平,临床应谨慎选择磷霉素作为治疗尿路感染产KPC酶肺炎克雷伯菌感染的辅助药物。