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Sequence analysis of a 7.3 kb Bam H Ⅰ genomic fragment of fowlpox virus strain 282E_4
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作者 JIN Ningyi, GUO Zhiru, LUO Kun, SHI Yi and YIN ZhenVeterinary Institute , Changchun University of Agriculture and Animal Sciences , Changchun 130062, China 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1999年第22期2068-2072,共5页
A 7.3 kb BamH I genomic fragment from fowlpox virus (FPV) strain 282E4 has been sequenced. After comparison with the FPV sequences collected in Genbank, and the entire genomic sequence of vaccinia virus (VV) strain Co... A 7.3 kb BamH I genomic fragment from fowlpox virus (FPV) strain 282E4 has been sequenced. After comparison with the FPV sequences collected in Genbank, and the entire genomic sequence of vaccinia virus (VV) strain Compenhagen, a 11.2 kb BamH I fragment from FPV strain Munich HP-438 has been found homologous to the fragment. Every predicted 展开更多
关键词 fowlpox virus sequence analysis open reading frame.
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Confirmed Diagnosis by RT-PCR and Phylogenetic Analysis of Peste des Petits Ruminants Viruses in Tibet, China 被引量:3
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作者 Wen-hua ZHAO Shi-biao YANG +4 位作者 Jian-qiang HAN Mei JIANG Hua-chun LI Nian-zu ZHANG Qi-han LI 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2009年第6期573-578,共6页
This paper reports the confirmed diagnosis by nested RT-PCR of PPR cases in Tibet, China in 2007, and results of phylogenetic analysis. Results showed that the 11 tested samples were PPRV positive by nested RT-PCR, of... This paper reports the confirmed diagnosis by nested RT-PCR of PPR cases in Tibet, China in 2007, and results of phylogenetic analysis. Results showed that the 11 tested samples were PPRV positive by nested RT-PCR, of which 2 samples were genetically close to the X7443 strain (Nigeria 75/1) of lineage I, and 3 samples close to the strain AY560591 (Sungri96) of linage IV with 96.6%、97.3%、97.6% and 98% nucleotide sequence homogeneity respectively, based on partial sequencing of the F gene from 5 samples and complete sequencing of the N/M/F/H genes from one sample. This study suggested that there are at least 2 origins of PPRV in China. 展开更多
关键词 系统发育分析 PCR检测 小反刍兽疫 RT 病毒分析 中国 西藏 核苷酸序列
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大白菜细胞质雄性不育系RAPD特异扩增片段的克隆及其序列分析 被引量:8
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作者 王永飞 马三梅 +2 位作者 张鲁刚 王鸣 郑学勤 《西北植物学报》 CAS CSCD 2003年第1期49-53,共5页
利用RAPD技术从大白菜细胞质雄性不育系CMS3411-7的DNA中得到1个特异扩增片段CMSO-PL01670,进一步以该片段为探针进行Dot和Southern杂交证实了该片段为不育系所特有。回收该特异扩增片段并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行序列测定。测... 利用RAPD技术从大白菜细胞质雄性不育系CMS3411-7的DNA中得到1个特异扩增片段CMSO-PL01670,进一步以该片段为探针进行Dot和Southern杂交证实了该片段为不育系所特有。回收该特异扩增片段并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行序列测定。测序结果表明该片段全长673bp,其碱基组成为A+T=67.16%。通过与GenBank+EMBL+DDBJ+PDB中的455972个序列进行比较,同源性均小于30%,表明该片段为一新发现序列。并且该序列的+4~+216的区域内含有1个可编码70个氨基酸的开放阅读框架。上述结果为今后从分子水平进一步研究大白菜细胞质雄性不育打下了坚实的基础。 展开更多
关键词 大白菜 细胞质雄性不育系 RAPD特异扩增 克隆 序列分析 开放阅读框架
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半滑舌鳎GAPDH基因开放读码框的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 陈蓉 饶颖竹 +1 位作者 梁静真 邓富琳 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期126-130,共5页
甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)广泛存在于真核生物中,对许多生理活动具有重要作用。参考金头鲷和斑马鱼的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因序列设计一对简并引物,提取半滑舌鳎肌肉组织总RNA,采用RT-PCR技术对GAPDH基因进行克隆测序及序列... 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)广泛存在于真核生物中,对许多生理活动具有重要作用。参考金头鲷和斑马鱼的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因序列设计一对简并引物,提取半滑舌鳎肌肉组织总RNA,采用RT-PCR技术对GAPDH基因进行克隆测序及序列分析。结果表明,从半滑舌鳎肌肉组织中成功克隆了GAPDH基因的开放读码框(ORF),序列全长1 002 bp,编码333个氨基酸,分子量为36.0235 ku,等电点PI为7.75。序列同源性分析显示,该序列与其他鱼类的GAPDH氨基酸序列具有较高的同源性。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) 开放读码框(ORF) 克隆 序列分析
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广东麻鸭DHBV全基因克隆及新读码框的发现 被引量:1
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作者 何金洋 葛文华 +5 位作者 朱宇同 郭兴伯 杨瑞仪 冯丽玲 张奉学 陈鸿珊 《中国病毒学》 CSCD 2005年第4期399-403,共5页
选取3份DHBV阳性广东麻鸭血清提取DHBVDNA,设计一对扩增DHBV全基因序列引物Q1和Q2,扩增并克隆DHBV全基因序列,测序并运用相关计算机软件及方法分析获得的全基因序列。结果表明,广东麻鸭DH-BV全长为3027bp。提交GenBank后获得的收录号分... 选取3份DHBV阳性广东麻鸭血清提取DHBVDNA,设计一对扩增DHBV全基因序列引物Q1和Q2,扩增并克隆DHBV全基因序列,测序并运用相关计算机软件及方法分析获得的全基因序列。结果表明,广东麻鸭DH-BV全长为3027bp。提交GenBank后获得的收录号分别为:AY433937、AY521226、AY521227(来自1号血清);AY392760、AY536371(分别来自2、3号血清)。AY521227的PreS/SORF出现了单碱基突变,在PreC/CORF之前发现一个新的ORF,暂命名为HORF,HORF也同时存在于GenBank中储存的另外8个DHBV全基因序列中。系统发育分析表明,广东麻鸭DHBV在分化程度上是目前储存于GenBank中的DHBV全序列中最高的。成功克隆了广东麻鸭DHBV全基因序列,序列分析为进一步研究广东麻鸭DHBV提供了有益的信息。 展开更多
关键词 鸭乙肝病毒(DHBV) 全基因序列 克隆 读码框
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上海及新疆地区猪戊型肝炎病毒开放阅读码框架2序列的克隆与分析
6
作者 张维谊 鞠厚斌 +2 位作者 刘健 刘佩红 周锦萍 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第4期26-31,共6页
通过已建立的动物戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)RT-nPCR方法,检测上海地区和新疆地区猪群样品。扩增HEV开放读码框架2(open reading frame 2,ORF2)保守区,产物为507 bp。经克隆、测序,获得20株上海株、3株新疆株序列,采用分... 通过已建立的动物戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)RT-nPCR方法,检测上海地区和新疆地区猪群样品。扩增HEV开放读码框架2(open reading frame 2,ORF2)保守区,产物为507 bp。经克隆、测序,获得20株上海株、3株新疆株序列,采用分子生物学软件与47株已知HEV进行同源性、进化关系分析。结果23株序列从同源性比对和进化关系分析均属HEVⅣ型,上海株间507 bp的核苷酸同源性为94.1%~100.0%,与上海猪源(DQ450072)、日本人源Japan1(AB369690)亲缘关系近;3株新疆株507 bp间的核苷酸同源性为86.1%~98.2%,与新疆猪源China SW1(AY594199)、中国人源T1株(AJ272108)亲缘关系近;上海株与新疆株间的核苷酸同源性为82.6%~100.0%,提示上海株与新疆株间存在差异。23株HEV在时间和地域关系分析,提示不同年份的新疆株存在差异,同年份不同猪场的新疆株进化关系存在差异,不同年份、不同区县的上海株进化关系也存在差异。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 开放读码框架2 序列分析
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MATLAB 7.X生物信息工具箱的应用——基因序列分析(一)
7
作者 刘新星 李红燕 杨英杰 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第1期118-121,共4页
MATLAB 7.X生物信息工具箱为广大用户提供了一个用于基因组和蛋白质组分析的综合环境,它利用数据库资源,使科学研究事半功倍,在工具箱提供的开放环境里,用户甚至可以按照自己的目的来设计和利用分析工具。本文主要介绍了MATLAB7.X生物... MATLAB 7.X生物信息工具箱为广大用户提供了一个用于基因组和蛋白质组分析的综合环境,它利用数据库资源,使科学研究事半功倍,在工具箱提供的开放环境里,用户甚至可以按照自己的目的来设计和利用分析工具。本文主要介绍了MATLAB7.X生物信息工具箱在基因序列分析中的应用,包括确定核苷酸组成,密码子组成,氨基酸转化和组成等,所有操作简便高效,结果可视化程度高。 展开更多
关键词 生物信息工具箱 序列分析 开放阅读框 密码子
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哺乳动物基因非翻译区开放阅读框架的分析
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作者 赵朝霞 李宏 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期583-588,共6页
在所分析的5’UTR序列中约19%的序列在阅读框1下含有AUG,约22%和24%的序列分别在阅读框2和阅读框3下含有AUG,而在3’UTR序列当中,无论是在哪个阅读框下,约71%含有AUG.这些AUG绝大多数都是以小ORF的形式出现的;分析小ORF序列以及与它们... 在所分析的5’UTR序列中约19%的序列在阅读框1下含有AUG,约22%和24%的序列分别在阅读框2和阅读框3下含有AUG,而在3’UTR序列当中,无论是在哪个阅读框下,约71%含有AUG.这些AUG绝大多数都是以小ORF的形式出现的;分析小ORF序列以及与它们相应的IC序列(阅读框间序列)长度,发现虽然3’UTR序列远远长于5’UTR序列,但是它们所包含的小ORF长度几乎没有差距,只是平均来说每一条3’UTR序列所包含的小ORF数量明显多于每一条5’UTR序列所包含的小ORF数量,而且dIC(下游阅读框间序列)比uIC(上游阅读框间序列)长很多,平均长50个碱基;第二类IC序列(UTR区相邻的两个阅读框之间的序列)的平均长度比其它两类IC序列(UTR区最后一个阅读框之后的序列)的平均长度小,而且又含有相对较多的终止密码;比较uORF序列与dORF序列密码子使用偏好的CAI值发现,尽管相差不大,但是无论在哪个阅读框下,uORF序列的CAI值都显著高于dORF序列的CAI值. 展开更多
关键词 哺乳动物基因 5’UTR 3’UTR 上游阅读框 下游阅读框 阅读框间序列 统计分析
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禽流感病毒WUDI-H9N2株的分离鉴定及HA基因的分子特征研究 被引量:1
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作者 谢银禄 张玉 刁富花 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第10期87-90,共4页
本研究于2011年8月从山东省某鸡场鸡群中分离一株病毒,通过对分离株进行病毒血凝试验及血凝抑制试验、RT-PCR、动物回归试验等方法证实已分离到禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9N2,命名为WUDI-H9N2株。根据GenBank上发表的AIV H... 本研究于2011年8月从山东省某鸡场鸡群中分离一株病毒,通过对分离株进行病毒血凝试验及血凝抑制试验、RT-PCR、动物回归试验等方法证实已分离到禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9N2,命名为WUDI-H9N2株。根据GenBank上发表的AIV H9病毒的HA基因序列,用Oligo 6.0生物学软件设计引物,对分离株WUDI-H9N2株HA基因进行扩增、测序及序列分析。将分离的AIV H9毒株与其他血清型代表参考毒株分别进行核苷酸和氨基酸系统发生进化关系分析。WUDI-H9N2株HA基因全序列长为1708bp,无核苷酸的插入和缺失,cDNA包含了1个完整的开放阅读框(ORF),编码区由1683bp组成,共编码560个氨基酸。HA序列与国内参考毒株的核苷酸序列的同源性在92.9%~98.1%之间,其中与安徽分离株A/chicken/China/AH-10-012010(H9N2)同源性为98.1%。 展开更多
关键词 禽流感病毒 HA基因序列 开放阅读框 遗传进化分析
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ORF1编码的四种非结构蛋白可用于戊型肝炎病毒的基因分型
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作者 胡玲玲 王跃荣 郑海音 《智慧健康》 2018年第19期16-18,共3页
目的探讨人类戊型肝炎病毒(HEV)开放阅读框(ORF)1编码的四种非结构蛋白的基因序列能否用于其基因组的分型。方法从Gen Bank中查找并下载能感染人类测序完整的全基因组的HEV基因组及蛋白序列共35株,用Clustal W程序对35株HEV的ORF1编码... 目的探讨人类戊型肝炎病毒(HEV)开放阅读框(ORF)1编码的四种非结构蛋白的基因序列能否用于其基因组的分型。方法从Gen Bank中查找并下载能感染人类测序完整的全基因组的HEV基因组及蛋白序列共35株,用Clustal W程序对35株HEV的ORF1编码区序列进行多序列比对,并用treev32绘制基因进化树,研究其进化关系。结果 HEV的基因组全长为7.5kb;而RNA依赖的RNA聚合酶只有1460bp,其他的基因序列则更短,木瓜样半胱氨酸蛋白酶为479bp、解旋酶为734bp,多聚脯氨酸铰链只有200bp。这四种蛋白的多序列比对和进化分析结果与Gen Bank中的分型结果相符。结论 HEV ORF1编码表达的木瓜样半胱氨酸蛋白酶、多聚脯氨酸铰链、解旋酶和RNA依赖的RNA聚合酶的基因序列更短,且可作为HEV的分型依据,从而为HEV的分型找到了一种更简便、快捷的方法。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 基因型 开放阅读框1 进化分析
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Partial nucleotide sequencing of hepatitis E viruses detected in sera of patients with hepatitis E from 14 cities in China 被引量:19
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作者 李奎 庄辉 朱万孚 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第7期1058-1063,152-153,共6页
OBJECTIVE: To investigate the genotypes of hepatitis E viruses (HEV) detected in sera of patients from different regions of China. METHODS: The partial genome (nt6461-6860, nt5994-6294) of open reading frame 2 (ORF2) ... OBJECTIVE: To investigate the genotypes of hepatitis E viruses (HEV) detected in sera of patients from different regions of China. METHODS: The partial genome (nt6461-6860, nt5994-6294) of open reading frame 2 (ORF2) of 45 HEV strains detected from 14 cities of China was amplified and sequenced using polymerase chain reaction (PCR) and direct sequencing. RESULTS: Forty-one of 45 strains (91%) share the same genotype with HEV Burma strain (B), with nucleotide identities higher than 98% with the representative HEV Chinese strain. Only 4 HEV strains are significantly divergent from the 3 prototype strains of HEV, with nucleotide identities of 77%-80% with HEV Burmese/Chinese strain, 74%-76% with Mexican strain and 74%-77% with the newly discovered HEV US/swine strain, respectively. Phylogenetic analysis suggests that these 4 strains may represent 2 different subtypes that belong to a novel genotype of HEV, which is significantly divergent from the prototype Mexico, Burmese and US/swine strains. CONCLUSION: Among patients with hepatitis E in China, most are infected by the Chinese prototype HEV, and only a small part by the new genotype HEV. 展开更多
关键词 Base sequence GENOTYPE Hepatitis E Hepatitis E virus Humans open reading frames PHYLOGENY RNA Viral Research Support Non-U.S. Gov't
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基于新一代测序技术精准确定复制缺陷型痘苗病毒天坛株全基因组序列及其开放阅读框组成
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作者 张钟贤 吴长城 +9 位作者 李涵 霍恕婷 赵莉 邓瑶 孟昕 陆柔剑 田厚文 王文玲 黄保英 谭文杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期502-509,共8页
目的应用新一代长读长测序技术精准确定复制缺陷型痘苗病毒天坛株(non-replicating Tiantan strain of vaccinia virus,NTV)全基因组序列及其开放阅读框(ORFs)组成。方法基于本实验室储备的NTV,在鸡胚成纤维细胞上进行扩增并纯化,提取NT... 目的应用新一代长读长测序技术精准确定复制缺陷型痘苗病毒天坛株(non-replicating Tiantan strain of vaccinia virus,NTV)全基因组序列及其开放阅读框(ORFs)组成。方法基于本实验室储备的NTV,在鸡胚成纤维细胞上进行扩增并纯化,提取NTV全长基因组核酸。PacBio HiFi测序从头组装获取NTV全长基因组序列。以同源注释的策略确定其ORF组成,并分析其与已知复制缺陷型痘苗病毒毒株ORF异同。结果NTV全长共171729 bp,GC含量为33%,其独特的倒置末端重复(ITR)区域包含发夹结构、两个串联重复区域及3个非重复区域。NTV共有166个ORFs,与第三代天花病毒疫苗改良安卡拉株(MVA-BN)和复制缺陷型哥本哈根株(NYVAC)株相比,主要差异位于ITR及其周围区域,3个毒株共同享有138个ORFs,NTV特有6个编码与病毒逃避宿主抗病毒反应相关的ORFs。结论通过三代测序技术精准确定NTV全基因组序列及ORFs组成,并揭示其与其他复制缺陷型痘苗病毒毒株的异同,为新一代猴痘疫苗和痘苗病毒载体研发应用提供重要参考。 展开更多
关键词 复制缺陷型痘苗病毒天坛株 三代测序 全基因组测序 开放阅读框
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滇重楼环阿屯醇合酶基因的克隆及序列分析 被引量:6
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作者 袁梦求 丁春邦 +3 位作者 陶亮 陈泓翰 陈惠 吴琦 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2250-2256,共7页
目的获取滇重楼甾体皂苷合成途径关键酶环阿屯醇合酶基因(PpCAS)的全长cDNA序列,并进行序列分析。方法利用同源克隆和RT-PCR技术获得PpCAS基因保守片段,采用RACE技术获得PpCAS基因的3’及5’末端序列,并采用生物信息学方法进行序列分析... 目的获取滇重楼甾体皂苷合成途径关键酶环阿屯醇合酶基因(PpCAS)的全长cDNA序列,并进行序列分析。方法利用同源克隆和RT-PCR技术获得PpCAS基因保守片段,采用RACE技术获得PpCAS基因的3’及5’末端序列,并采用生物信息学方法进行序列分析。结果 PpCAS基因全长cDNA为2 309 bp,其开放阅读框(ORF)为2 283 bp,可编码760个氨基酸的蛋白质;PpCAS推导的蛋白质相对分子质量为8.69×104,等电点(pI)为6.54;其氨基酸序列与GenBank中其他植物CAS的同源性在60%~83%PpCAS蛋白。结论从滇重楼中首次获得PpCAS基因cDNA全长序列,该基因具有CAS同源基因的典型特征。 展开更多
关键词 滇重楼 环阿屯醇合酶 基因克隆 序列分析 开放阅读框(ORF)
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吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA克隆及序列分析 被引量:2
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作者 吴波 罗光明 +1 位作者 潘超美 张寿文 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1814-1817,共4页
目的克隆吴茱萸Mn/Fe-SOD基因的全长cDNA序列。方法根据已获得的吴茱萸Mn/Fe-SOD基因核心片段序列设计4条特异性引物,采用RACE和巢式PCR方法克隆获得吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA。结果吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA序列共1 048 bp,包含... 目的克隆吴茱萸Mn/Fe-SOD基因的全长cDNA序列。方法根据已获得的吴茱萸Mn/Fe-SOD基因核心片段序列设计4条特异性引物,采用RACE和巢式PCR方法克隆获得吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA。结果吴茱萸Mn/Fe-SOD基因全长cDNA序列共1 048 bp,包含一个687 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),共编码228个氨基酸。结论首次从吴茱萸中克隆得到了Mn/Fe-SOD基因的全长cDNA序列,为研究该基因在吴茱萸体内超量表达以提高植物抗逆性研究奠定基础。 展开更多
关键词 吴茱萸 MN Fe—SOD基因克隆 RACE 开放阅读框 序列分析
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感染人类的Borna病毒第二开放读码框架的核苷酸序列及其变异
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作者 谢鹏 岩田泰秀 +1 位作者 高桥和郎 森则夫 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期355-357,共3页
对经套式逆转录-聚合酶链反应(nestedRT-PCR)证实周围血单核细胞(PBMC)中存在Borna病毒(BDV)第二开放读码框架(ORFⅡ)基因片段的5例精神病人和3例健康献血者共40个样品进行测序,并与BDV/... 对经套式逆转录-聚合酶链反应(nestedRT-PCR)证实周围血单核细胞(PBMC)中存在Borna病毒(BDV)第二开放读码框架(ORFⅡ)基因片段的5例精神病人和3例健康献血者共40个样品进行测序,并与BDV/MDCK(Madin-Darbycanninekidney)标准病毒株比较。结果发现,所有样品在11个核苷酸位点与文献报道的HE80-1病毒株比较有点变异,但来源于人类的样品与BDV/MDCK株之间无差异。2例情感障碍病人的10个样品在1701位点处出现T→C的转换,3例健康献血者的15个样品在1696位点处出现A→T的转换。 展开更多
关键词 Borna病毒 核苷酸类分析 病毒基因 开放读码框架
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马链球菌重组IdeE蛋白功能分析
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作者 刘燕霏 杨建德 于泓洋 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期94-96,共3页
为了研究链球菌的分子发病机制,试验筛选了马链球菌随机基因组文库,得到1个阳性克隆,对拯救质粒进行测序,确定插入片段编码成熟蛋白阅读框架的分子质量为39.6 ku,经序列分析确定为IgG内切酶蛋白(IdeE),与白细胞C3b受体Mac(CD11b)具有同... 为了研究链球菌的分子发病机制,试验筛选了马链球菌随机基因组文库,得到1个阳性克隆,对拯救质粒进行测序,确定插入片段编码成熟蛋白阅读框架的分子质量为39.6 ku,经序列分析确定为IgG内切酶蛋白(IdeE),与白细胞C3b受体Mac(CD11b)具有同源性,设计特异性引物PCR扩增该基因,并对该蛋白进行克隆表达和功能分析。结果表明:该蛋白不能分解IgG,但可以结合嗜中性粒细胞,呈现剂量依赖性抗吞噬活性。 展开更多
关键词 马链球菌 IgG内切酶蛋白 功能分析
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