光学相干断层成像技术联合血清sLOX-1、Fractalkine在冠状动脉粥样硬化斑块易损性评估中的价值研究

目的探讨光学相干断层成像(OCT)技术联合血清可溶性凝集素样低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、Fractalkine在冠状动脉粥样硬化(CA)斑块易损性评估中的价值。方法选取2023年3月至2024年2月在该院检查且确诊的96例CA患者作为研究对象,根据颅内动脉管壁高分辨率成像结果将其分为易损斑块组(40例)和非易损斑块组(56例)。检测两组血清sLOX-1、Fractalkine水平、斑块纤维帽厚度;采用Pearson相关分析血清sLOX-1、Fractalkine水平与斑块纤维帽厚度的相关性。采用一致性Kappa检验分析OCT及血清sLOX-1、Fractalkine单独及联合诊断斑块易损性与手术检查结果的一致性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sLOX-1、Fractalkine单独诊断斑块易损性的价值。采用诊断四格表分析OCT、血清sLOX-1、Fractalkine单独及三者联合检测诊断斑块易损性的价值。结果易损斑块组较非易损斑块组血清sLOX-1水平高于非易损斑块组,Fractalkine水平及斑块纤维帽厚度均低于非易损斑块组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,易损斑块组斑块纤维帽厚度与血清sLOX-1水平呈负相关(r=-0.411,P<0.05),与Fractalkine水平呈正相关(r=0.526,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清sLOX-1诊断斑块易损性的曲线下面积(AUC)为0.824(95%CI:0.736~0.912),灵敏度为70.00%,特异度为85.71%,最佳截断值为529.07 pg/mL;血清Fractalkine诊断斑块易损性的AUC为0.845(95%CI:0.770~0.921),灵敏度为77.50%,特异度为76.79%,最佳截断值为22.97 ng/mL。OCT检查结果与手术检查结果的一致性一般,Kappa值为0.379(P<0.05)。OCT联合血清sLOX-1、Fractalkine结果与手术检查结果的一致性较高,Kappa值为0.750(P<0.05)。OCT、血清sLOX-1、Fractalkine单独诊断斑块易损性的灵敏度低于三者联合诊断,漏诊率高于三者联合诊断,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论斑块易损CA患者的血清sLOX-1水平升高,Fractalkine水平降低,OCT联合血清sLOX-1、Fractalkine诊断斑块易损性的灵敏度增加、漏诊率降低。

2型糖尿病视网膜病变患者血清Fractalkine与血脂、血糖的相关性研究

目的探讨2型糖尿病视网膜病变患者血清Fractalkine(FKN)水平与血脂、血糖的关系。方法根据眼底荧光造影,将126例2型糖尿病患者分为单纯糖尿病组背景期糖尿病视网膜病变组和增殖期糖尿病视网膜病变组,同时选择健康体检者40例为正常对照组(NC),测定各组血清FKN及空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2h PG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇、三酰甘油,并分析血清FKN与相关指标的关系。结果 1血清FKN在2型糖尿病组高于NC组,且随着视网膜病变的出现及逐渐加重,各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2相关性分析显示,血清FKN与FPG、2 h PG、Hb A1c、LDL-C呈正相关,组间比较,差异有统计学意义。与HDL-C呈负相关,组间比较,差异有统计学意义。(P<0.05)。多元线性逐步回归分析显示,Hb A1c、LDL-C是FKN的独立危险因素。结论糖尿病视网膜病变患者的血清FKN随着病情加重而升高,与血糖、血脂代谢紊乱共同参与视网膜病变的发生、发展。

冠心病患者血清胱抑素C与髓过氧化物酶、Fractalkine水平的变化及相关性

目的观察不同类型冠心病患者血清胱抑素C、髓过氧化物酶(MPO)、Fractalkine水平的变化及相关性。方法选择经冠状动脉造影术的住院患者150例,其中稳定型心绞痛(SAP)组59例,无症状心肌缺血(SMI)组28例,急性冠脉综合征(ACS)组63例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血清胱抑素C、MPO、Fractalkine水平,并统计分析以上血清学指标间的相关性。结果 ACS组患者血清胱抑素C、MPO、Fractalkine水平明显高于SMI组,ACS组患者血清胱抑素C和MPO水平明显高于SAP组,而SAP组血清胱抑素C、MPO、Fractalkine水平均高于SMI组,差异均有统计学意义(P<0.01),同时发现患者血清胱抑素C水平与MPO和Fractalkine呈正相关(r=0.626,P<0.01;r=0.342,P<0.01),而MPO水平与Fractalkine也呈正相关(r=0.359,P<0.01)。结论 ACS患者血清胱抑素C、MPO、Fractalkine水平与冠心病危险分层密切相关,且血清胱抑素C水平与MPO和Fractalkine呈正相关,提示联合检测血清学指标可能有助于冠心病患者的危险分层。

血清Fractalkine、Vaspin含量对冠心病病情的判断价值及其与心功能、心肌损伤程度的相关关系

目的:探讨血清Fractalkine、Vaspin含量对冠心病病情的判断价值及其与心功能、心肌损伤程度的相关关系。方法:80例冠心病患者根据临床发作特点跟体征分为稳定型心绞痛组45例、不稳定型心绞痛组35例。另取同期在本院进行体检的心功能正常者50例作为正常对照组。检测各组研究对象的血清Fractalkine、Vaspin含量,超声心动图下心功能参数水平,血清心肌酶谱指标含量。进一步采用Pearson检验评估冠心病患者血清Fractalkine、Vaspin含量与病情严重程度的内在联系。结果:稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组血清中Fractalkine的含量高于正常对照组,Vaspin的含量低于正常对照组,随心绞痛病情加重,血清Fractalkine含量上升、Vaspin含量下降(P<0.05)。稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组的心功能参数LVEDD、LVEDV、LVESD、LVESV水平高于正常对照组,血清中心肌酶谱指标CK、CK-MB、LDH、AST、ALT的含量高于正常对照组,随心绞痛病情加重上述指标水平增加(P<0.05)。冠心病血清Fractalkine含量与心功能下降、心肌损伤程度呈正相关,Vaspin含量与心功能下降、心肌损伤程度呈负相关。结论:冠心病血清Fractalkine、Vaspin含量异常,且其异常程度与患者心功能、心肌损伤程度直接相关。

大鼠原位肝移植术后急性排斥反应中Fractalkine的表达及意义

目的利用直视下套入式吻合肝动脉加袖套法吻合门静脉建立的大鼠全血供肝移植模型,研究同种异体大鼠肝移植术后早期急性排斥反应中Fractalkine(Fkn)的表达情况。方法制备SD-Wistar大鼠全血供肝移植模型,随机分为两组,每组20只。对照组:于移植术后第1天开始腹腔内注射生理盐水(3ml/kg);实验组:于移植术后第1天开始腹腔内注射环孢素A(3mg/kg)。术后观察大鼠一般情况,并于第3、5及7天分别处死5只大鼠,取肝脏标本,观察移植肝组织排斥反应强度(rejection activity index,RAI)及Fkn表达情况;余大鼠观察生存时间。结果对照组存活18只,实验组存活19只。实验组较对照组术后一般情况好,存活时间为19.50±4.51d,与对照组7.60±1.60d比较,差异有统计学意义(P<0.05)。组织学观察:对照组移植肝小叶结构清楚,汇管区增大,大量淋巴细胞浸润;实验组移植肝组织RAI明显降低。术后第3、5及7天,对照组RAI为3.80±0.35、5.90±0.87及7.50±1.30,实验组为3.10±0.21、3.90±0.41及4.50±0.52。两组术后第7天RAI比较差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学观察:两组移植肝组织中均见细胞浆或细胞膜有棕色颗粒的Fkn表达,但实验组表达较弱。术后第3、5及7天,对照组Fkn细胞数为8.20±0.57、21.30±3.30及25.70±4.91,实验组分别为8.30±0.56、10.30±0.67及11.70±1.23;两组第5、7天比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论Fkn参与了同种异体大鼠肝移植急性排斥反应,可作为诊断大鼠肝移植急性排斥反应发生的指标之一。环孢素A可以通过抑制Fkn表达来抑制排斥反应发生的强度。

慢性充血性心力衰竭患者新型趋化因子循环Fractalkine及其受体CX3CR1水平研究

目的:观察慢性充血性心力衰竭(CHF)患者新型趋化因子循环Fractalkine及其受体C3CXR1水平变化情况。方法:选取CHF患者(CHF组)55例和同期我院门诊健康体检者25例为正常对照组。患者入院即刻抽取静脉血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清可溶性Fractalkine水平,流式细胞仪检测外周血单核细胞受体CX3CR1水平的表达;并对血清可溶性Fractalkine的水平与N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)水平进行相关性分析。结果:CHF组血清可溶性Fractalkine水平明显高于正常对照组(P=0.004),纽约心功能分级(NYHY)Ⅲ、Ⅳ级者明显高于Ⅱ级者;CHF组循环单个核细胞CX3CR1的表达水平较正常对照组(14.7±8.1)明显增高(P<0.05),并且随着NYHY程度加重,表达水平亦明显增高[NYHAⅡ级者为25.1±12.4,与正常对照组比(P=0.03);Ⅲ级者为37.3±11.0,与NYHAⅡ级者比(P=0.04);Ⅳ级者为41.7±11.1,与NYHAⅡ级者比(P=0.009),差异均有统计学意义]。血清可溶性Fractalkine的水平与NT-proB NP水平呈正相关(r=0.364,P<0.01)。结论:循环Fractalkine及其受体CX3CR1可能参与了慢性充血性心力衰竭患者炎症免疫发病过程。

低氧性肺动脉高压大鼠肺内fractalkine的变化

目的探讨趋化因子fractalkine在低氧性肺动脉高压发病机制中的作用。方法将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和低氧组,每组10只,低氧组以常压低氧建立肺动脉高压模型。以右心导管法检测平均肺动脉压(mPAP),图像分析法测量肺小动脉壁厚度,计算出管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%),逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察大鼠肺组织fractalkine mRNA的表达和酶联免疫法观察肺组织匀浆fractalkine的变化。结果对照组大鼠mPAP为(16.3±2.1)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),低氧组为(28.7±3.8)mmHg,两组比较差异具有统计学意义(P<0.01);对照组大鼠WT%为(10.20±1.56)%、WA%为(38.11±2.30)%,低氧组大鼠WA%和WT%分别为(21.28±4.60)%和(67.08±9.44)%,两组比较差异均具有统计学意义(P均<0.01);低氧组大鼠肺组织fractalkine mRNA的含量较对照组增加〔(0.49±0.05)vs(0.29±0.02),P<0.01〕,肺组织匀浆fractalkine浓度亦高于对照组〔(7622.6±938.4)pg/mL vs(4168.5±403.5)pg/mL,P<0.01〕。相关分析表明,fractalkine mRNA和蛋白与WA%和WT%均呈正相关(P<0.05)。结论慢性低氧大鼠肺组织fractalkine的合成和释放增多,fractalkine增加可能与低氧性肺动脉高压的发生有关。

Fractalkine在狼疮性肾炎患者血液和肾组织中的表达及其意义

目的研究Fractalkine(FKN)在狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)患者血液和肾组织中的表达及其意义。方法选取48例LN患者,根据病理分型分为轻型组22例、重型组26例,采用RT-PCR检测患者血液中FKN mRNA的表达、酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血液中FKN蛋白的表达,并与26例正常对照比较;同时通过免疫组织化学染色法测定LN患者肾组织FKN的定位与表达情况。结果与正常对照组相比,LN中轻型组和重型组患者血液中FKN的mRNA和蛋白的表达均明显升高,且重型组升高更为显著(P<0.01),重型组FKN mRNA和蛋白的表达也明显高于轻型组。在LN患者肾组织中,FKN主要表达于肾小球足细胞和肾小管上皮细胞的胞浆中,重型组肾小球FKN阳性细胞数较轻型组明显增多(P<0.01),但皮质间质的FKN阳性细胞数无差异(P>0.05)。结论 FKN在LN患者血液和肾小球中的表达与LN的肾组织病理损伤表现的程度有关。

参芪扶正注射液对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织Fractalkine表达的影响

目的动态观察趋化因子Fractalkine(FKN)在内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织内表达水平的变化,和参芪扶正注射液对其的影响。方法经尾静脉注射LPS(4 mg／kg)建立ALI大鼠模型。将42只大鼠随机分为7组,每组6只:正常对照组、模型1、2、4 h 3个时相组和参芪扶正注射液1、2、4 h 3个时相组。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)等方法,观察ALI大鼠模型肺组织病理学改变、肺湿干重比率(W／D)及血清肿瘤坏死细胞因子α(TNF-α)变化,检测肺组织FKN mR- NA的表达,同时观察参芪扶正注射液对上述指标的影响。结果(1)模型1、2、4 h组肺组织病理改变明显,肺损伤程度重,以2 h组最为显著,参芪扶正注射液能减轻ALI大鼠肺组织病理变化。(2)模型3个时相组肺W／D均明显增加,参芪扶正注射液能降低各时相组肺W／D值。(3)模型3个时相组血清TNF-α均明显增高,于2 h点达到最高值,参芪扶正注射液能显著降低各时点血清TNF-α水平(P<0．05)。(4)正常大鼠肺组织有FKN mRNA的表达,模型3个时相组肺组织FKN mRNA表达较正常组明显增加,在2 h时点达最高值,参芪扶正注射液能降低ALI大鼠肺组织FKN mRNA的表达(P<0．05)。FKN mRNA的表达与血清TNF-α水平呈正相关。结论早期使用参芪扶正注射液能改善ALI肺组织病理改变,减轻肺水肿,降低血清TNF-α水平,下调肺组织FKN mRNA的表达,对内毒素致急性肺损伤实验大鼠具有保护作用。

Fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎患者肾组织中的表达

目的:研究Ⅳ型弥漫增殖型狼疮肾炎、轻微性肾小球病变及正常肾组织中趋化因子fractalkine及其受体CX3CR1的表达,以及与CD68阳性巨噬细胞表达之间的相互关系,探讨fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎发病中的作用。方法:Ⅳ型狼疮肾炎患者的肾活检组织21例,轻微性肾小球病变患者的肾活检组织18例,光镜下正常的肾组织标本8例。采用免疫组织化学技术检测肾组织中fractalkine、CX3CR1及CD68的表达。结果:(1)正常肾组织和轻微性肾小球病变肾组织中fractalkine基本未见阳性表达;其受体CX3CR1阳性细胞和CD68阳性巨噬细胞仅偶见于肾小球及肾皮质间质中。(2)Ⅳ型狼疮肾炎肾小球和肾皮质间质中CX3CR1阳性细胞和巨噬细胞显著增多,且两者的表达显示高度的相关性(分别为r=0.956,P<0.01和r=0.965,P<0.01)。(3)Ⅳ型狼疮肾炎肾组织中fractalkine高表达于皮质肾小管上,fractalkine阳性皮质肾小管的百分比分别与肾皮质间质CX3CR1阳性细胞数和巨噬细胞数之间高度相关(分别为r=0.720,P<0.01和r=0.770,P<0.01)。结论:提示fractalkine/CX3CR1在Ⅳ型狼疮肾炎的发病机制中可能占有重要地位。

原发性高血压患者血清Fractalkine水平与血管内皮功能损伤的相关性研究

目的研究原发性高血压患者Fractalkine(FKN)与血管内皮功能的相关性。方法纳入50例原发性高血压患者作为高血压组,50例健康体检者为对照组。使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清FKN水平,使用高效液相色谱法测定血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平,硝酸还原酶法测定血清一氧化氮NO水平。使用高分辨超声检测肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能(FMD)及非内皮依赖性舒张功能(NMD)。38例原发性高血压患者(剔除12例)接受3个月的规范降压治疗。比较治疗前后收缩压、FKN、ADMA、NO、FMD的变化水平,进一步分析FKN治疗前后变化量绝对值与收缩压、ADMA、NO、FMD变化量绝对值的相关性。结果与对照组比较,高血压组的血清FKN、血浆ADMA水平升高(P<0.05),FMD、血清NO水平降低(P<0.05)。FKN与ADMA、收缩压、舒张压呈正相关(r=0.785、0.730和0.785,均P=0.000),与NO、FMD呈负相关(r=-0.800和-0.783,均P=0.000)。经过3个月的降压治疗,发现收缩压、舒张压、FKN、ADMA比治疗前降低,NO、FMD比治疗前升高。其中FKN治疗变化绝对值(△FKN)与△收缩压、△舒张压、△FMD、△ADMA、△NO呈正相关(r=0.720、0.405、0.707、0.687和0.726,P=0.000、0.012、0.001、0.032和0.001)。结论原发性高血压患者血清FKN水平的升高与血管内皮功能的损伤可能有关。降压治疗可改善原发性高血压患者的内皮功能,降低血清中的FKN水平。

趋化因子Fractalkine与心肌细胞缺血再灌注损伤

目的探讨一种新的化学趋化因子Fractalkine(FKN)与缺血再灌注关系及其信号转导途径。方法分别培养心肌细胞(MC)、心肌成纤维细胞(CFs)、人脐静脉内皮细胞(ECV304),利用缺氧(缺血液)和复氧液(再灌注液)造成3种细胞的缺氧复氧模拟缺血再灌注,观察3种细胞存活率及RT-PCR检测的FKN的mRNA表达;对人脐静脉内皮细胞给NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC),检测的FKN的mRNA表达变化。结果1)CFs在整个缺氧复氧过程中没有FKN的表达。2)ECV304缺氧前与复氧即刻FKN无表达,缺氧复氧后0.5、1、2、3、4hFKN表达增加,分别是(0.21±0.02)、(0.43±0.02)、(0.58±0.02)、(0.40±0.02)、(0.13±0.02),于复氧后2h到达表达最高值(全部P<0.01)。3)MC缺氧复氧后0.5、1、2hFKN表达增加,分别是(0.12±0.01)、(0.34±0.05)、(0.41±0.05),于复氧后2h到达表达最高值(P均<0.01)。4)每个时间段MC的FKN表达均低于ECV304(P<0.01)。5)PDTC(3、10μmol/L)是NF-κB的抑制剂,可明显抑制ECV的FKN mRNA的表达(P<0.01)。结论FKN参与心肌缺血再灌注过程,内皮细胞是表达FKN的主要细胞;NF-κB可能参与FKN表达的信号转导通路。

晚期糖基化终产物对肾小球系膜细胞表达Fractalkine的诱导作用

目的探讨晚期糖基化终产物(AGE)对肾小球系膜细胞表达Fractalkine(Fkn)的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,实验设AGE组:加入AGE-BSA(100mg·L-1);对照组:加入牛血清清蛋白(BSA)(100mg·L-1);PDTC组:先加入PDTC100μmol·L-1孵育1h,再加入AGE-BSA(100mg·L-1);AGE抗体组:先加入抗AGE抗体(100mg·L-1IgG)孵育2h后,再加入AGE-BSA(100mg·L-1)。培养所需时间收集细胞,检测FknmRNA及蛋白表达,激光共聚焦显微镜检测NF-κB活化。结果AGE诱导体外培养的大鼠系膜细胞大量表达Fkn-mRNA及蛋白,PDTC和AGE抗体显著抑制AGE诱导系膜细胞表达FknmRNA及蛋白。经AGE刺激后NF-κB/P65迅速核转位,30min达高峰。结论AGE通过活化NF-κB诱导肾小球系膜细胞表达Fkn。

双氢青蒿素对狼疮模型MRL/lpr小鼠肾皮质Fractalkine表达的调节作用研究

目的通过研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对狼疮模型MRL/lpr小鼠肾脏病变和肾皮质Fractalkine(FKN)、NF-κB表达的作用,并与泼尼松的作用进行比较,以探讨青蒿素治疗狼疮性肾炎的可能作用机制,试图明了双氢青蒿素对狼疮性肾炎FKN表达的调节作用。方法选取32只12周龄的雌性MRL/lpr小鼠,随机分为4组:DHA组,每天给予DHA灌胃;泼尼松组,每天给予泼尼松(prednisone,P)灌胃;DHA+泼尼松组,每天给予DHA和泼尼松灌胃;正常对照组,每天给予生理盐水灌胃;共8周。通过光镜观察肾组织病理改变,通过RT-PCR检测肾皮质FKN和NF-κB p65 mRNA的表达,免疫组织化学染色法检测肾皮质FKN及NF-κB p65蛋白的表达。结果 MRL/lpr小鼠肾皮质中检测到FKN、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达,DHA可减少MRL/lpr小鼠的蛋白尿、改善肾功能、减轻肾脏病变。DHA下调MRL/lpr小鼠肾皮质中FKN、NF-κB p65 mRNA和蛋白的表达。结论双氢青蒿素可通过调节FKN和NF-κB的表达实现其对狼疮性肾炎的治疗作用,与泼尼松联用效果更佳。

单核细胞趋化因子1和Fractalkine对平滑肌细胞增殖、趋化和组织因子表达的影响

目的观察趋化因子单核细胞趋化因子1和Fractalkine对血管平滑肌细胞组织因子表达及血管平滑肌细胞增殖和趋化的影响。方法在细胞水平,采用酶联免疫吸附法检测单核细胞趋化因子1、Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对组织因子抗原表达的影响,噻唑蓝法比较单核细胞趋化因子1、Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对血管平滑肌细胞增殖的作用,细胞趋化实验比较单核细胞趋化因子1、Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对血管平滑肌细胞趋化的影响。结果单核细胞趋化因子1和Fractalkine可增加血管平滑肌细胞组织因子抗原的表达,单核细胞趋化因子1与Fractalkine共同作用后,组织因子抗原表达量较二者单独作用时明显降低。Fractalkine对血管平滑肌细胞有明显的促增殖作用,但单核细胞趋化因子1+Fractalkine和单核细胞趋化因子1均无明显促增殖作用。Fractalkine和单核细胞趋化因子1+Fractalkine对血管平滑肌细胞有明显的趋化作用,而单核细胞趋化因子1的趋化作用不够明显。结论单核细胞趋化因子1和Fractalkine在动脉粥样硬化过程中分别对血管平滑肌细胞组织因子的表达、增殖和趋化发挥了不同程度的作用。

氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达的影响及机制分析

目的观察氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞Fractalkine表达的影响并探讨其可能作用机制。方法采用胰蛋白酶消化法原代培养人脐静脉内皮细胞,取2～5代用于实验,随机分为:①对照组用RPMI1640培养基;②氧化型低密度脂蛋白不同浓度(5、25、50和75mg/L)组;③氧化型低密度脂蛋白作用不同时间(6、12、24、48和72h)组;④氧化型低密度脂蛋白+p38MAPK特异性阻断剂SB203580组;⑤p38MAPK特异性阻断剂SB203580组。用RT-PCR及ELISA法检测Fractalkine mRNA及蛋白表达水平,用Westernblot法检测p38MAPK磷酸化表达水平。结果①氧化型低密度脂蛋白在一定浓度范围及作用时间呈时间-剂量依赖方式诱导Fractalkine mRNA及蛋白表达增加,最佳作用时间为48h,最佳作用浓度为50mg/L;②与对照组比较,氧化型低密度脂蛋白诱导组人脐静脉内皮细胞p38MAPK磷酸化表达水平显著增加(P<0.05);使用SB203580干预后p38MAPK磷酸化水平明显下降,与氧化型低密度脂蛋白诱导组相比差异有统计学意义(P<0.05)。③预先用p38MAPK特异性阻断剂SB203580(20μmol/L)与内皮细胞共同孵育60min后,再加入氧化型低密度脂蛋白作用48h后,Fractalkine表达水平明显降低,与氧化型低密度脂蛋白组比较有统计学差异(P<0.05)。结论氧化型低密度脂蛋白可诱导内皮细胞Fractalkine表达增加,其作用机制可能是通过p38MAPK信号转导通路。

Fractalkine对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞中NF-κB活化及内源性fractalkine mRNA表达的影响

目的:观察Fractalkine(FKN)对类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)核转录因子κB(NF-κB)活化以及内源性FKN mRNA表达的影响。方法:通过组织块法培养RA-FLS。在RA-FLS中加入100μg/L FKN,分别作用0 h、1 h及2 h,用Western blotting检测RA-FLS胞浆及胞核中NF-κB p65蛋白表达量变化以明确NF-κB的活化情况;加入100μg/L重组人FKN分别作用0 h、12 h、18 h后,用RT-PCR检测FKN mRNA表达的变化。结果:重组人FKN刺激1 h后,RA-FLS胞浆中NF-κB p65蛋白水平明显低于无FKN刺激的对照组(P<0.05);FKN刺激后2 h,细胞核中NF-κB p65蛋白水平较对照组明显升高(P<0.05)。100μg/L重组人FKN刺激RA-FLS,呈时间依赖方式诱导内源性FKN mRNA表达。FKN刺激RA-FLS18 h,细胞中FKN mRNA的表达水平明显升高(P<0.05)。结论:外源FKN可刺激RA-FLS内源性的FKN mRNA表达上升,提示RA-FLS中可能存在FKN的正反馈现象。FKN对NF-κB有活化作用,可能对RA患者关节中炎症的启动、血管生成和骨质破坏有重要作用。

糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织Fractalkine表达的影响

目的动态观察内毒素(LPS)所致急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)大鼠肺组织内趋化因子Fractalkine(FKN)的表达变化,及糖皮质激素对其的影响。方法将42只大鼠随机分为空白对照组、模型组(LPS)及地塞米松干预组(DEX),其中LPS组和DEX组再分为1h、2h、4h3个时相组,每组6只,LPS组和DEX组大鼠经尾静脉注射LPS(4mg/kg)建立ALI大鼠模型。采用ELISA、RT-PCR等方法,观察ALI大鼠模型肺组织病理学改变、肺湿干重比值(W/D)及血清TNF-α变化,并检测肺组织FKNmRNA的表达,同时观察地塞米松对上述指标的影响。结果模型组1h、2h与4h3个时相组肺损伤病理改变、肺W/D、血浆TNF-α均明显增高,地塞米松能减轻ALI大鼠肺组织炎症反应、肺W/D值及血清TNF-α水平(P均<0.05)。正常大鼠肺组织FKNmRNA有表达,模型组3个时相亚组肺组织FKNmRNA表达较正常组明显增加(P<0.05),在2h时点达峰值,地塞米松能下调ALI大鼠肺组织FKNmRNA表达(P<0.05)。FKNmRNA的表达量与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.674,P<0.05)。结论早期应用地塞米松可降低TNF-α水平,下调肺组织FKNmRNA的表达,这可能是糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤实验大鼠保护作用机制之一。

Fractalkine和其受体Cx3CR1在寻常性银屑病中的表达及意义

目的探讨Fractalkine/Cx3CR1在寻常性银屑病发病中的作用。方法应用免疫组化SABC法分别检测寻常性银屑病(进展期)皮损26例、皮损周边0.5 cm皮肤8例和正常皮肤15例中Fractalkine/Cx3CR1的表达情况。分析其与PASI(疾病严重度评分)之间的关系。结果寻常性银屑病患者角质形成细胞和真皮浅层血管内皮细胞中Fractalkine/Cx3CR1阳性率较皮损周围0.5 cm范围皮肤明显增强(P<0.05),正常皮肤中未见Fractalkine/Cx3CR1表达。寻常性银屑病皮损中Fractalkine的表达与PASI呈正相关(γ=0.6097,P<0.01),Cx3CR1的表达与PASI无相关性(γ=0.2965,P>0.05)。结论Fractalkine/Cx3CR1的异常表达可能在寻常性银屑病发病中发挥重要作用。

冠心病患者Fractalkine、单核细胞趋化蛋白-1和白细胞介素-8的检测及意义

目的:探讨趋化因子Fractalkine、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞介素-8(IL-8)在不同类型冠心病(CHD)患者血清表达水平的变化及意义。方法:采集经冠状动脉造影确诊的稳定型心绞痛(SA)组患者48例、不稳定型心绞痛(UA)组患者56例、急性心肌梗死(AMI)组患者37例外周血标本,同期住院而冠状动脉造影正常的50例患者外周血标本作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测4组血清Fractalkine、MCP-1和IL-8的表达水平,并以国际通用的Judkins法评估冠状动脉病变程度。结果:CHD患者血清Fractalkine、MCP-1和IL-8水平均明显高于对照组(P<0.01),UA和AMI组Fractalkine、MCP-1和IL-8水平均显著高于SA组(P<0.01);多支病变组和双支病变组Fractalkine、MCP-1和IL-8均明显高于单支病变组(P<0.01);重度狭窄组和中度狭窄组Fractalkine、MCP-1和IL-8水平亦显著高于轻度狭窄组(P<0.01)。结论:随着CHD患者病情的加重,血清趋化因子Fractalkine、MCP-1和IL-8水平明显升高,可用以评估CHD患者疾病的严重程度并监测疾病的进展情况。