酸性氧化电位水和低温等离子体处理对鲜参微生物群落的影响

目的探究酸性氧化电位水和低温等离子体两种杀菌技术对鲜参微生物菌落总数、群落多样性和结构的影响,揭示鲜参的微生物群落组成。方法采用传统的培养方法测定鲜参的微生物菌落总数;采用16S rRNA和ITS测序技术分析酸性氧化电位水处理和低温等离子体处理鲜参群落的多样性和结构的变化。结果低温等离子体杀灭鲜参微生物的数量显著大于酸性氧化电位水;经两种杀菌方式处理前后鲜参微生物的种类无显著性变化,但是在鲜参微生物群落的门水平和属水平上均引起了菌群结构的显著变化,且细菌菌群结构的变化大于真菌。结论低温等离子体杀灭鲜参微生物的效果优于酸性氧化电位水,经这两种杀菌方式处理后鲜参群落结构的变化,能够为后续靶向抑制鲜参的腐败和延长其货架期提供一定的指导。

新型复合保鲜贮藏方法对鲜参切片品质的影响及货架期预测

目的:探究一种新型复合保鲜贮藏方法,预测鲜参切片的货架期。方法:应用酸性氧化电位水杀菌、真空包装、低温等离子体杀菌等技术复合处理鲜参切片,然后分别在-2、4、25和36℃进行贮藏,每隔15 d测定鲜参切片的色泽、水分含量、人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量和菌落总数等指标,建立贮藏期间鲜参切片的菌落总数变化动力学模型。结果:确定鲜参切片的复合保鲜工艺为:酸性氧化电位水处理→真空包装→低温等离子体处理→低温贮藏。在-2和4℃贮藏有效地抑制鲜参切片菌落总数的增长、水分含量的下降,延缓鲜参切片颜色的变化。贮保藏60 d后,鲜参切片中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量上升。通过基于菌落总数变化的一级反应动力学模型和Arrhenius方程,建立鲜参切片的货架期预测模型。结论:建立了鲜参切片的最佳复合保鲜贮藏方式,这种复合保鲜贮藏方法可有效抑制鲜参切片的品质劣化,延长其货架期。

超快速液相色谱-质谱法测定鲜人参晶及林下山参中的39个人参皂苷成分

目的:通过超快速液相色谱-质谱法(UFLC-MS/MS)同时测定鲜人参晶和林下山参中主要活性成分人参皂苷的含量,探讨鲜人参晶及林下山参中人参皂苷的差异变化,为阐明鲜人参晶物质基础提供参考。方法:室温下,用70%甲醇水溶液对鲜人参晶及林下山参药材进行超声提取,采用Waters ACQUITY UPLC■BEH Shield RP C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.5 mmol·L^(–1)甲酸铵水溶液为流动相梯度洗脱。在电喷雾离子源负离子、多反应监测模式下,通过UFLC-MS/MS外标对照品法测定鲜人参晶及林下山参中39个人参皂苷的含量。结果:经方法学验证,建立的分析方法符合定量分析要求。4批林下山参和1批鲜人参晶中的总人参皂苷质量分数分别为27.59~52.63、52.26 mg·g^(–1),稀有人参皂苷质量分数分别为3.79~6.65、7.42 mg·g^(–1)。林下山参中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re总质量分数为0.72%~0.94%,人参皂苷Rb1质量分数为0.24%~0.53%;鲜人参晶中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re总质量分数为1.21%,人参皂苷Rb1质量分数为0.43%。结论:所检测的鲜人参晶和林下山参中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re总量及人参皂苷Rb1含量均符合《中华人民共和国药典》2020年版质量标准规定;采用现代工艺制成的鲜人参晶中含有丰富的人参皂苷,尤其是稀有人参皂苷,其与林下山参中的人参皂苷种类几乎无变化,但含量有一定差异。研究结果为综合评价林下山参和鲜人参晶的质量与功效提供了参考。

基于UPLC-Q-Exactive MS和网络药理学评价鲜参及生脉冻干口崩片中皂苷类成分

目的优选提取工艺制备鲜参组方的生脉冻干口崩片,评价鲜参中优势皂苷类成分的药理作用,为鲜参入药制剂的合理应用提供参考。方法制备鲜参乙醇提取物、匀浆及煎煮提取物以及不同人参炮制品组方的生脉冻干口崩片,采用UPLC-Q-Exactive MS技术对皂苷类成分进行分析鉴定。利用PharmMapper预测目标皂苷类成分潜在靶点,利用String及DAVID对潜在靶点进行蛋白相互作用、GO过程及KEGG功能富集分析,运用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络,应用AutoDock软件进行分子对接验证。结果优选匀浆工艺制备生脉冻干口崩片,比较不同炮制品组方中皂苷含量的差异,筛选出malonylginsenoside Rb2、malonylginsenoside Rc、malonylginsenoside Rb1、malonylginsenoside Rd、ginsenoside Re、ginsenoside Rf作为优势成分。通路富集结果表明,鲜参中的丙二酸单酰基类皂苷成分主要调控糖基化终末产物-糖基化终末产物受体(advanced glycation end products-receptor advanced glycation end products,AGE-RAGE)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等信号通路。malonylginsenoside Rc是关键的丙二酸单酰基类皂苷成分,丝裂原活化蛋白激酶14(mitogen-activated protein kinase 14,MAPK14)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3,CASP3)、人转化生长因子β受体1(TGF-beta receptor type-1,TGFBR1)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)为其潜在的关键靶点,相关结果得到分子对接的验证。结论匀浆工艺能够有效保留鲜参中的丙二酸单酰基类皂苷成分,该类成分可通过调控AGE-RAGE、IL-17、TNF等信号通路以调节机体的炎症、细胞凋亡等反应过程,主要涉及糖尿病型并发症、动脉粥样硬化、肿瘤等疾病过程。鲜参中皂苷类优势成分的筛选为鲜参的质量控制提供参考依据,结合匀浆工艺制备的生脉冻干口崩片为后续鲜参在制剂开发应用中奠定经验基础,同时为临床中药鲜用提供理论依据。

人参鲜品中农药残留评价研究

目的建立测定鲜人参中63种农药残留的分析方法,检测34批鲜人参药材样品的农药残留量,并对鲜人参的质量安全进行评价。方法采用QuEChERS法进行前处理,结合气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS/MS)、液相色谱-三重四极杆质谱(LC-MS/MS),于多反应检测模式下同时测定34批次鲜人参药材中63种农药的残留量。结果63种农药在相应含量范围内呈现良好的线性关系,相关系数r均>0.995,仪器精密度RSD在0.34%~2.9%,加标回收率在81.2%~118.8%,符合检测要求。34批鲜人参药材中共检出4种禁用农药:有22批样品检出五氯硝基苯(0.01~43.3 mg·kg^(-1)),14批样品检出六氯苯(0.01~1.9 mg·kg^(-1)),2批样品检出α-六六六(0.012~0.016 mg·kg^(-1)),2批样品检出β-六六六(0.010 mg·kg^(-1)),检出率64.7%,不合格率41.2%。不合格批次均来自A公司,五氯硝基苯最高检出批次超出定量限的432倍。六氯苯最高检出批次超出定量限18倍。结论该方法简单、准确、灵敏度高,适合鲜人参中多种农药残留的筛查测定,可为鲜人参的农药残留监控提供参考。

红参炮制加工中的皂苷水解反应及其产物的研究

选取鲜人参根制成匀浆 ,加入被研究的目标皂苷 (M Rb1、Rb1、Re、Ro) ,研究鲜人参中天然皂苷在生产加工实践中的水解变化。采用HPLC对 10种人参皂苷标品建立标准图谱和分离条件 ,然后对上述加工前后的目标皂苷 (M Rb1等 )、鲜人参浆、不同目标皂苷 +鲜人参浆等一系列样品进行定性、定量测定。结果表明 :在加工红参全过程中 ,人参二醇型 (panaxadiol type)丙二酸单酰基人参皂苷Rb1(简称M Rb1)主要被水解转化为 2 0S 人参皂苷Rg3 和Rb1,其次为人参皂苷Rd和Rh2 。其水解转化率依次为 2 6 15 %、2 5 2 3%、0 2 0 %、0 0 0 1%。人参三醇型 (panaxatriol type)中的人参皂苷Re水解生成人参皂苷Rg2 、Rh1和Rg1,其总转化率依次为 48 73%、11 2 8%、0 0 0 2 %。

人参根中丙二酰基三七人参皂苷-R4的分离及其结构表征

A new malonylated dammarane-type triterpene oligoglycoside,named malonyl-notoginsenoside-R4(1),was isolated from the fresh root of Panax ginseng C.A.Mey.The structure of malonyl-notoginsenoside-R4 was determined as 3-O-[6-O-malonyl-β-D-glucopyranosyl(1→2)-β-D-glucopyranosyl]-20-O-[β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl]-20(S) protopanaxadiol on the basis of physicochemical properties and spectral analysis.

鲜人参药材水提取物的高效凝胶过滤色谱指纹图谱研究

目的:针对不同产地、不同生长年限的人参,建立人参药材水提取物的高效凝胶过滤色谱指纹图谱,为人参的质量评价提供依据。方法:以中性缓冲液抽提获得人参水提物,以相对分子质量标准蛋白为标准品,以人参主要蛋白(GMP)为对照,OHpak SB-803 HQ(8 mm×300 mm)凝胶排阻液相色谱柱(排阻极限10万),流动相:10 mmol·L^(-1)Tris·HCl(含10 mmol·L^(-1)NaCl,pH 7.4),流速:1.0 mL·min^(-1),柱温:25℃,应用紫外检测器检测,检测波长为280 nm。谱图通过相似度评价系统软件进行分析。结果:人参药材水提物的高效凝胶过滤色谱有6个特征峰,人参药材的相似度在0.9～1.0之间,稳定性、重复性和精密度良好。结论:该色谱图可作为人参药材水提取物的高效凝胶过滤色谱指纹图谱,用于鲜参药材水提取物的质量评价。

鲜人参及其加工品中腺苷和L-焦谷氨酸含量比较研究

以六年生鲜人参、生晒参、红参为试验材料,建立腺苷和L-焦谷氨酸的含量测定方法：RP-HPLC法分析样品中腺苷含量,依利特Hypersil ODS2（4.6mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇—水（10∶90）,流速0.8 mL/min,检测波长260 nm,柱温40℃;RP-HPLC法分析样品中L-焦谷氨酸含量,COSMOSIL 5C18-PAQ（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇—5 mmol/L醋酸钠水溶液（8∶92）,流速0.5 mL/min,检测波长210 nm,柱温40℃。测得鲜人参及其加工品中腺苷含量为0.332~0.457 mg/g,L-焦谷氨酸含量为0.315~1.056 mg/g。结果表明：腺苷和L-焦谷氨酸含量在鲜人参及其加工品中呈规律性变化,鲜人参中腺苷和L-焦谷氨酸含量最高,加工品次之。因此在抗糖尿病活性方面,鲜人参较其加工品应更具研究价值。

人参辐照贮藏保鲜技术研究

人参辐照贮藏保鲜技术 ,为人参加工业开辟了新途径 ,鲜人参经清洗、抗坏血酸预处理、造型装入 0 .0 7-0 .1mm的聚乙烯—尼龙复合膜袋 ,抽真空充氮气封口 ,采用 0 .3- 0 .6KGY剂量处理 ,辐照保鲜人参的药效成份损失少 ,易提取 ,不霉变虫蛀 ,人参主要成份皂甙含量辐照组与对照组无显著差异 ,毒性试验辐照组与对照组无明显差异。在常温条件下贮藏 12个月 ,保鲜率达

干鲜人参对PC12细胞损伤保护作用的比较研究

分别建立皮质酮、谷氨酸、过氧化氢诱导PC12细胞损伤模型,通过MTT和LDH测定,比较不同浓度的干、鲜人参水提液对于皮质酮、谷氨酸、过氧化氢诱导PC12细胞损伤的保护作用。结果表明皮质酮浓度为200μmol/L、谷氨酸浓度为30 mmol/L和过氧化氢浓度为150μmol/L时,PC12细胞的存活率分别为:53.42%、49.64%、54.27%,当PC12细胞与不同浓度人参提取液共同孵育24 h,再分别加入200μmol/L的皮质酮和150μmol/L的过氧化氢时,与模型组相比,细胞存活率明显提高,乳酸脱氢酶的释放明显减少(P<0.01);并且在中、高剂量组,鲜人参组的细胞存活率明显高于干人参组(P<0.01),乳酸脱氢酶释放明显低于干人参组(P<0.01);但对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤则无上述效果。干、鲜人参水提液对于皮质酮、过氧化氢诱导损伤的PC12细胞均有明显的保护作用;在中、高剂量时,鲜人参水提液对细胞保护活性明显好于干人参组,且组间表现出显著性差异(P<0.01),表明鲜人参较干人参具有更好的细胞保护活性。干、鲜人参水提液对谷氨酸诱导损伤的PC12细胞却无保护活性。

气相色谱-三重四极杆质谱分析人参炮制品中的挥发性成分

人参炮制的化学成分变化研究主要集中在皂苷和糖类,本文首次从挥发性成分角度阐释了人参不同炮制品的物质基础。利用气相色谱-质谱联用(GC-MS/MS)方法,对鲜参、生晒参和红参中挥发性成分及其衍生规律进行研究。采用TG-5SILMS非极性气相色谱柱,以He为载气,通过NIST MS Spectral Database对挥发性成分进行检测并鉴定。鲜参、生晒参、红参中分别检出30、33和34种挥发性成分,其中生晒参中(-)-斯巴醇含量为鲜参含量的31.98倍,辛醛等8种挥发性成分为鲜参中含量的3倍以上,红参中有环癸等10种挥发性成分为鲜参中含量的3倍以上。生晒参和红参中各有4种挥发性成分在鲜参中未检出。

鲜人参·红参·蒸参水醚溶性成分的GC-MS分析

[目的]对鲜人参、红参和蒸参水中醚溶性成分进行分析,以期为人参及其副产物产品的开发利用提供参考。[方法]采用GC-MS分离测定样品成分。[结果]从鲜人参中分离了94个化合物,鉴定了31个化合物;从红参中分离出95个化合物,鉴定了33个化合物;从蒸参水中分离了24个化合物,鉴定了10个化合物;从鲜人参和红参中鉴定了15种相同的化合物;首次从鲜人参和红参中分离鉴定了具有抗癌活性的镰叶芹醇和具有免疫活性的角鲨烯。[结论]该试验对鲜人参、红参和蒸参水中醚溶性成分进行了比较分析,为人参及其副产物产品的开发利用提供了参考。

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定鲜人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸

建立了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱（SPE-HPLC-MS/MS）测定鲜人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸含量的分析方法。样品经甲醇超声提取,HLB固相萃取小柱净化后,HPLC-MS/MS多反应监测模式测定,外标法定量。吲哚乙酸和吲哚丁酸在2-500μg/L范围内线性良好,相关系数均〉0.99,加标回收率为81.2%-95.6%,相对标准偏差为5.3%-10.6%,方法的定量限为10μg/kg。该方法灵敏、准确、可靠,能满足鲜人参中吲哚乙酸和吲哚丁酸定量分析的要求。

苯酚-硫酸法测定鲜人参中多糖含量

目的建立了测定鲜人参中多糖含量的分析方法。方法用苯酚-硫酸法，在波长490nm处测定吸光度，人参多糖在10～160μg范围内具有良好的线性关系，相关系数为0．9987。平均回收率为98．40％，RSD=2．53％。结果人参多糖的最佳提取条件为：料液比为1：10，提取温度为100℃，提取时间为4h，人参多糖换算因子为1．58，鲜人参中多糖的含量为18．14g／100g。结论该方法简便、准确率高、重现性好。

红参加工中皂苷的脱羧降解反应及其产物的研究(英文)

从鲜人参中提取分离出天然皂苷 ,模拟红参加工工艺过程 ,探讨红参加工中天然皂苷成分转化过程 ,以揭示出皂苷成分转化机理。方法 :将红参粉以甲醇提取 ,乙醚脱脂 ,正丁醇萃取 ;水层通过大孔树脂 (D10 1型 )吸附 ,水洗除去水溶性杂质和糖分。再经过硅胶柱层析和阳离子交换树脂柱层析 ,获得丙二酸单酰基人参皂苷。模拟红参加工工艺过程得转化物 ,对该转化物进行分离鉴定 ,诸如化学试验、IR、FD MS等仪器分析。结果表明 :从鲜人参中分离出丙二酸单酰基人参皂苷 Rb1和 Rb2 等皂苷 ,通过模拟红参加工试验发现在 75℃烘干过程 ,丙二酸单酰基人参皂苷 Rb2 转化为乙酰基人参皂苷 Rb2 ,即人参皂苷Rs1。结论 :人参皂苷Rs1是红参加工烘干阶段产生的 ,对其分解产物的分析有二氧化碳放出 。

四年生鲜人参遗传毒性及大鼠长期喂养实验

目的对四年生鲜人参食用安全性进行毒理学评价。方法采用大鼠经口急性毒性试验、遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)、大鼠30 d喂养试验。结果雌、雄大鼠经口最大耐受剂量(MTD)均大于18.6 g/kg。3项遗传毒性试验结果均为阴性。在大鼠30 d喂养试验中,8.0 g/kg,4.0 g/kg及2.0 g/kg 3个剂量组的实验动物均生长发育良好,体重、摄食量、饮水量、血象、血液生化学、主要脏器系数及病理组织学相关指标均未见异常变化。结论四年生鲜人参属于实际无毒物,未见遗传毒性,长期服用是安全的。

鲜人参辐照保鲜工艺研究

利用６０Ｃｏγ射线辐照鲜人参，对鲜人参辐照保鲜效果及辐照工艺进行研究。鲜人参辐照保鲜的适宜吸收剂量为０４～０６ｋＧｙ，在这个剂量范围内，鲜人参贮藏１２个月，保鲜率可达９７％以上，参根硬度、色泽及药效成分与鲜人参无显著性差异。吸收剂量率是人参保鲜的重要因素，即使在适宜的吸收剂量范围内，若剂量率过高，也将使鲜参细胞结构受损而影响保鲜效果。

鲜人参中2种丙二酰基人参皂苷的分离鉴定

采用硅胶柱层析方法,流动相分别为氯仿-甲醇-水(65∶35∶10,V/V)、氯仿-甲醇-水(6∶4∶1)和正丁醇-乙酸乙脂-甲醇-水(4∶2∶1∶1)和高效液相(Nuc leosil C18(250 mm×10 mm,5μm)色谱柱;流动相为己腈-水(75∶25);流速为3.0 mL/m in;柱温30℃;检测波长203 nm。从中国鲜人参中分离得到丙二酰基人参皂苷R c和丙二酰基人参皂苷Rb2,并通过其理化性质、红外光谱、质谱和核磁共振谱对化合物的结构进行了鉴定,证明其结构分别为3-O-[6-O-丙二单酰-β-D-葡萄吡喃糖(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖]-20-O-[α-L-阿拉伯呋喃糖(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖]-20(S)-原人参二醇和3-O-[6-O-丙二单酰-β-D-葡萄吡喃糖(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖]-20-O-[α-L-阿拉伯吡喃糖(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖]-20(S)-原人参二醇;丙二酰基人参皂苷R c为首次从中国鲜人参中分得。

RP-HPLC法测定鲜人参中丙二酰基人参皂苷的含量

目的:建立人参中丙二酰基人参皂苷含量的测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,以μ-Bondapak C-18(300mm×3.9 mm,5 μm)柱为分析柱,乙腈-0.05 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(25:75)为流动相,柱温:35℃,检测波长:203 nm,流速:1 mL·min^(-1),以外标法检测。结果:丙二酰基人参皂苷 Rb_1、Rb_2、Rc 分别在0.02～1.19 mg·mL^(-1)(r=0.9998)、0.02～0.99 mg·mL^(-1)(r=0.9997)、0.01～0.83 mg·mL^(-1)(r=0.9996)浓度范围内呈良好的线性关系。平均回收率(n=3)分别为103.0%(RSD=1.3%)和98.5%(RSD=1.0%)、102.4%(RSD=1.2%)和98.1%(RSD=0.6%)、102.1%(RSD=2.8%)和100.1%(RSD=1.0%)。结论:本法简便、准确、灵敏。