龙脑樟有性繁殖后代叶油分析

目的分析龙脑樟有性繁殖后代变异情况。方法以龙脑樟有性繁殖后代的3个月和12个月实生苗为材料,对其叶片的挥发油进行GC和GC-MS分析,以主要的9个成分的相对百分含量为指标对样本进行聚类,并对主要成分进行相关性分析。结果栽培3个月的幼苗产生2种化学型,即黄樟油素型和丁香酚甲醚型;栽培12个月的幼苗成分较栽培3个月的幼苗成分复杂,形成了龙脑型,同时形成了樟脑型、桉油素型、异橙花叔醇型。结论龙脑樟有性繁殖后代会发生化学变异,其中只有60%保持了母本特性。

龙脑樟扦插繁育试验技术研究

为了解基质、扦插时间、激素对龙脑樟扦插的影响,对龙脑樟进行不同基质、不同扦插时间、不同激素种类、激素浓度及浸泡时间的扦插试验。结果表明:夏初枝条刚木质化或半木质化时,以黄心土为基质,用100 mg/kg的ABT1号浸泡插穗1.5 h扦插效果最好,成活率可达87%以上。

乙草胺在龙脑樟大田扦插育苗中的应用

龙脑樟大田扦插育苗是龙脑樟良种快繁的主要途径,但因圃地杂草繁生,影响龙脑樟扦插成活率并提高生产成本。本研究以龙脑樟当年生穗条为材料,研究除草剂乙草胺对龙脑樟扦插圃地的除草效果以及对插穗生根及生长的影响,结果表明:对圃地土壤表面喷雾2 000倍乙草胺50%乳油剂并覆盖2 cm厚黄心土的除草效果要显著优于仅用2 000倍乙草胺50%乳油剂不覆土以及直接在圃地扦插这两个处理,90 d后其除草率仍达到91.6%;另外,喷洒乙草胺并覆土的处理还显著的提高了插穗的生根率及生长速度,90 d后生根率由不做任何处理的46.3%提高到93%,100 d后苗高由不做任何处理的8.67 cm提高到17 cm。说明该方法不仅可以有效解决圃地杂草,而且还使龙脑樟插穗的生根率及生长速度得到提高,为龙脑樟的快速育苗开辟了新途径。

龙脑樟叶片光合特性对氮磷钾肥的响应

通过"3414"不完全正交回归设计,研究氮磷钾肥对龙脑樟矮林光合特性的影响,以确定其生长发育最佳的施肥处理。结果表明随着氮磷钾肥单一施肥量的增加,龙脑樟叶片的叶绿素含量(Chl)、净光合速率(Pn)和胞间CO2浓度(Ci)均呈现"先增大后减小"的变化趋势;适宜的氮(N100 g/株)、磷(P2O5140 g/株)、钾(K2O 60g/株)用量及其配施能够明显增加龙脑樟的Chl和Pn,其中Pn受氮肥施用量的影响更大;氮、磷、钾肥之间交互效应不明显。通过龙脑樟光响应曲线拟合分析可知,在一定范围内,随着施肥量增加,龙脑樟的最大净光合速率(Amax)、光饱和点(LSP)和表观量子效率(AQY)均升高,而光补偿点(LCP)和暗呼吸速率(Rd)均降低,有利于龙脑樟叶片光合产物的积累,加快龙脑樟的生长发育。

气相色谱法同时测定龙脑樟鲜叶中右旋龙脑、樟脑及乙酸龙脑酯的含量

建立了气相色谱法同时测定龙脑樟鲜叶中右旋龙脑、樟脑及乙酸龙脑酯含量的方法。采用水蒸气蒸馏法提取龙脑樟鲜叶中的天然冰片,硅胶柱层析法精制天然冰片粗品,GC法测定其中右旋龙脑、樟脑及乙酸龙脑酯的含量。色谱条件:色谱柱为DB-5MS(30.00 m×250.00μm×0.25μm),进样量1μL,柱温从90℃开始程序升温,流速1 mL/min,进样口温度280℃。右旋龙脑、樟脑及乙酸龙脑酯的回归方程分别为y=3.4462x-7.4057(r=0.9998);y=3.4881x-0.0026(r=0.9999);y=2.8657x-0.0914(r=1.0000),表明三者分别在99.14~991.37μg/mL、1.92~19.18μg/mL及2.01~20.01μg/mL范围内线性关系良好。三者的平均回收率分别为100.86%、98.36%和101.66%,相对标准偏差(RSD)分别为1.94%、2.88%和2.18%。从龙脑樟鲜叶中提取纯化后的天然冰片中右旋龙脑质量分数均在98.45%以上,樟脑及乙酸龙脑酯质量分数较低,不含异龙脑,说明龙脑樟鲜叶质量较佳。该法操作简便、准确、精密度高、分离度好,分析时间短,可为龙脑樟药材的质量控制提供参考。

龙脑樟叶部精油在不同蒸馏时段的出油率和化学成分

考察龙脑樟叶在不同蒸馏时段的出油率和化学成分。采用水蒸汽蒸馏的方法、水中蒸馏的方式,将2 h的蒸馏过程分成4个阶段,收集相应的馏分,分别进行计量和GC-MS分析,结果表明,总出油率达到2.81%,蒸馏一开始就产生大量的馏分,96.53%的馏分集中在前60 min内蒸出。通过GC-MS分析鉴定,发现龙脑樟叶挥发油中主成分为右旋龙脑(天然冰片),其含量高达81.78%,其余还有樟脑、1,8-桉叶油素、黄樟油素、α-蒎烯、芳樟醇、乙酸龙脑酯等31个化学成分。

不同产地龙脑樟叶挥发油成分的GC-MS分析

目的:分析比较江西吉安、湖南新晃、浙江淳安、福建厦门4个产地龙脑樟叶挥发油的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取龙脑樟叶挥发油,运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其化学成分进行分析。结果:江西吉安产龙脑樟叶挥发油共鉴定出44种成分,占总含量的99.16%,其中右旋龙脑占53.17%;湖南新晃产龙脑樟叶挥发油共鉴定出33种成分,占总含量的97.84%,其中右旋龙脑占32.71%;浙江淳安产龙脑樟叶挥发油共鉴定出34种成分,占总含量的98.1%,其中右旋龙脑占41.89%;福建厦门产龙脑樟叶挥发油共鉴定出25种成分,占总含量的99.58%,其中右旋龙脑占60.74%。结论:不同产地龙脑樟叶挥发油成分在组成和含量上有一定的差异。

龙脑樟中内生真菌bn12分子鉴定及挥发性代谢产物分析

目的:对龙脑樟中内生真菌bn12菌种进行鉴定,并对其的挥发性代谢产物进行分析。方法:采用形态学结合ITS序列分析法对菌种进行鉴定,采用GC-MS对挥发油成分进行分析。结果:内生真菌bn12的ITS序列与格孢菌目Pleospora-les中格孢菌科Pleosporaceae的真菌相似度最大,并且与Cochliobolus nisikadoi ITS序列同源性比较高;龙脑樟内生真菌bn12的挥发性代谢产物中含有龙脑以及大量的吲哚类物质。结论:内生真菌bn12属于座囊菌纲的格孢菌科真菌,具有产生龙脑的能力。

气相色谱-质谱联用同时测定龙脑樟鲜叶中右旋龙脑、樟脑及异龙脑的含量

目的建立气相色谱-质谱(GC-MS)联用同时测定龙脑樟鲜叶中右旋龙脑、樟脑及异龙脑含量的方法。方法采用超声辅助水蒸气蒸馏法提取龙脑樟鲜叶,60%乙醇重结晶,GC-MS法测定右旋龙脑、樟脑及异龙脑的含量。色谱条件:色谱柱为石英毛细管柱(30.00 m×250.00μm×0.25μm),载气为高纯氦气,纯度≥99.999%,进样量1μL,柱温从60℃开始程序升温,流速1 mL/min,进样口温度280℃。质谱条件:电子能量70 eV,离子源温度230℃,溶剂切除时间5.0 min,扫描范围50～650 m/z,扫描模式为全扫描。结果右旋龙脑、樟脑及异龙脑的回归方程分别为Y=2.0×10~8X+1.0×10~8(r=0.999 9),Y=7.0×107X-3.0×107(r=0.999 9),Y=8.0×107X-8. 0×107(r=0.999 9),表明三者分别在0.03～0.27μg,0.06～0.48μg,0.05～0.36μg范围内线性关系良好。三者的平均回收率分别为96. 32%,95. 49%和97. 51%,RSD分别为1. 92%,0.85%和1.87%。从龙脑樟鲜叶中提取纯化后的右旋龙脑含量百分比均在98.09%以上,樟脑含量百分比较低,不含异龙脑。结论该法操作简便、准确,灵敏度、精密度高,分析速度快,可作为龙脑樟药材的质量控制,并为龙脑樟药材的综合利用提供了科学依据。