Clinical study of applying fructose-1,6-diphosphate and captopril to enhance the protective effects of cardioplegia solution on ischemic myocardium

In the present experiment,fructose-1,6-diphosphate（FDP）and captopril（Cap）wereadded to the cold potassium cardioplegia solution and the levels of malondialdehyde（MDA）,cre-atine phosphokinase MB（CPK-MB）,thromboxane B（TXB2）and 6-keto-PGF1α in plasma weremeasured during open-heart surgery.Quantitative study of myocardial ultrastructure and obser-vation of cardiac resuscitation were also undertaken.The findings suggested that FDP,especiallywhen combined with Cap could significantly strengthen the protective effects of cold potassiumcardioplegia solution on ischemic myocardium.

1,6-二磷酸果糖对大鼠缺血性心脑损伤的保护作用

目的 探讨口服 1,6 二磷酸果糖 (FDP)对大鼠缺血性心脑组织损伤的保护作用及其作用机制。方法 采用异丙肾上腺素 (Iso)致大鼠实验性心肌缺血模型。随机分为 3组 :对照组、Iso组 [5mg/(kg·d) ,7d]和Iso +FDP组 [Iso ,5mg/(kg·d) ,7d ;FDP ,6 g/(kg·d) ,2 1d],每组 8只。用光镜、电镜观察心、脑组织病理形态学改变。测定心肌肌浆网钙泵 (SERCA)活性、超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 Iso组大鼠心肌组织病理可见大量纤维化病灶 ,病灶多呈片状、多灶性 ,还可见少许凝固坏死灶 ;亦可见脑组织病理损害、海马神经元密度较对照组降低。心肌SERCA活性 [0 .2 5 0± 0 .0 6 3μmol/(min·g·wetweight) ]较对照组 [0 .334± 0 .0 6 1μmol/(min·g·wetweight) ]降低。脑组织匀浆SOD活性 [2 3.2 2± 3.0 7U/(mg·pro) ]低于对照组 [4 4 .89± 2 .771U/(mg·pro) ]。FDP使心肌组织纤维化病灶减少 ,脑组织损害也明显减轻 ;FDP使心肌SERCA活性 [0 .312± 0 .0 6 7μmol/(min·g·wetweight) ]和SOD活性 [39.70± 3.4 4 1U/(mg·pro) ]增高。结论 口服FDP可减轻大鼠心肌和脑组织病理改变 。

紫花苜蓿果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因全长克隆及分析

根据已知的与盐胁迫相关的EST序列,采用SMART RACE方法克隆了紫花苜蓿果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALD)全长cDNA,命名为MsALD(GenBank accession No.FJ896113)。序列分析结果表明,该cDNA全长1 487bp,包含一个1 194 bp的最大开放阅读框,编码398个氨基酸。经同源比对和进化树分析,MsALD基因编码的氨基酸与红三叶草、马铃薯、烟草等的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(ALD)氨基酸序列一致性高达90%以上,确定其属于第Ⅰ类果糖-1,6-二磷酸醛缩酶。半定量RT-PCR分析表明,MsALD基因可能与紫花苜蓿抗盐机理相关。

果糖-1,6-二磷酸醛缩酶和丙糖磷酸异构酶共表达对蓝藻光合作用效率的影响

以转高等植物ALD和TPI基因的鱼腥藻 712 0为对象 ,研究了ALD和TPI两个酶表达量对细胞光合固碳效率的影响。考察了初始pH、NaHCO3浓度和CO2 浓度对转基因藻和野生藻生长、光合活性及无机碳亲和力的影响。结果表明 ,转基因藻在较高碳源浓度下 ,其生长速率和光合放氧活性比野生藻有显著的提高 ,并且可以比野生藻耐受更高的pH。在含有 2 %CO2 的空气中 ,转基因藻对外源无机碳的亲和力比野生藻提高了 4 0

胡杨果糖-1,6-二磷酸醛羧酶基因PeALD的克隆及耐盐性分析

胡杨(Populus euphratica Oliv)是优良的抗逆树种,有很强的耐盐碱性。前期胡杨转录组研究结果显示盐胁迫可诱导果糖-1,6-二磷酸醛羧酶基因(PeALD)转录上调,提示该基因可能对胡杨耐盐性方面有某种贡献。为分析PeALD基因在胡杨耐盐性中的作用,本研究以胡杨为材料,利用RT-PCR方法克隆了胡杨果糖-1,6-二磷酸醛羧酶基因的全长cDNA,通过基因转化法尝试在烟草中过量表达该基因,并对转基因株系的耐盐性进行初步分析。研究结果显示,克隆的cDNA编码果糖-1,6-二磷酸醛羧酶,ORF为1177bp,是由247个氨基酸编码的疏水性蛋白,理论等电点为6.84,分子量为26.79kD。PCR与RT-PCR检测结果表明,外源的PeALD基因通过转化已经整合到烟草的染色体中,并在4个株系中得到较强的表达。转化株系表型筛选实验表明,在200mmol/L NaCl的MS培养基中培养15d后,野生型烟草植株无明显高生长,叶片全部黄化并萎缩;而转基因烟草高生长基本没有受到抑制,植株生长良好。说明在烟草中过表达PeALD使转化植株的耐盐性显著提高。光合数据结果显示,ALD基因能够降低盐胁迫对烟草叶片净光合速率的影响,可能是PeALD过表达加速了卡尔文循环的运转,提高了CO2的固定速率,进而促进了光合活性,通过光合作用促进碳的积累,利于呼吸作用和氧化磷酸化产生ATP,为维持跨膜质子浓度梯度提供能量,从而有可能促进质膜上的Na+/H+逆向转运,利于细胞质膜保持拒盐性。这些结果初步验证了PeALD基因的耐盐性功能,为进一步深入研究该基因在耐盐机制中的作用奠定了良好基础。

枸杞多糖和1,6-二磷酸果糖协同抗运动疲劳作用及其机制

目的:研究枸杞多糖与1,6-二磷酸果糖的协同抗疲劳作用,为改善和促进运动员体力恢复、提高训练和比赛成绩提供科学依据。方法:将140只小鼠随机分为空白对照组(生理盐水)、枸杞多糖组(20mg.kg-1)及1,6-二磷酸果糖组(300mg.kg-1),并将两者按2×2表分组,以负重游泳小鼠作为研究抗运动疲劳实验的小鼠模型。检测各组小鼠力竭游泳时间、肝糖原、肌糖原、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、血乳酸(LAC)和血尿素氮(BUN),分析两者协同抗疲劳的效果和机制。结果:与空白对照组比较,枸杞多糖和1,6-二磷酸果糖组小鼠负重游泳时间延长,两者剂量分别为20mg.kg-1和300mg.kg-1时最佳(P<0.01),两者之间存在交互作用。与空白对照组比较,枸杞多糖组小鼠LDH、SOD活力提高(P<0.01),LAC和血BUN水平降低,1,6-二磷酸果糖使小鼠肝糖原和肌糖原的储备量显著提高(P<0.01)。结论:枸杞多糖与1,6-二磷酸果糖配伍能起到协同抗疲劳作用,其原因可能是1,6-二磷酸果糖增加了小鼠的肝糖原和肌糖原的贮备,能够提供更多能量;枸杞多糖提高LDH、SOD活力,加快代谢产物的分解,使小鼠在耐力运动中坚持时间更长。

鱼腥藻Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

随着更多蓝藻全基因组序列测定完成,蓝藻基因工程研究现已进入后基因组时代。2001年Kaneko等完成了鱼腥藻7120全基因组序列测定,随后人们利用生物信息学的方法对其中一些基因的功能进行了预测,包括II型果糖1,6二磷酸醛缩酶(FBA)基因,但该基因是否编码II型果糖1,6二磷酸醛缩酶及该产物的相关酶学特性至今尚未见报道。通过PCR克隆到鱼腥藻7120中预测的II型FBA基因,插入到质粒pET32a的相应位点,构建成原核表达载体pETFBAII。蛋白电泳结果显示,重组蛋白的表达量占总蛋白含量的23.4%,与蛋白分子标记相比,其分子量约为40kDa。酶学活性测定结果表明,其蛋白粗提物的比活力为11.8U(mgprotein)-1,具有标准II型FBA活性。证实了Cyanobase中关于该基因功能的预测,也为进一步研究该基因表达产物的生理生化特性及功能提供了重要资料。

固定化酵母细胞生产1,6-二磷酸果糖研究

本文研究了固定化酵母细胞制备果糖1,6二磷酸(FDP)的方法及其生产。用卡拉胶包埋方法固定化酿酒酵母(Sacchromyces cerevisae),对含葡萄糖1.0M,磷酸盐0.8M的糖磷液,pH6.5,在37℃下进行磷酸化反应。反复分批转化20天以上,可达到平均产FDPH_427.58mg/ml,最高为59.94mg/ml。用100ml固定化细胞生物反应器连续运转309h,稀释速率D=0.097h^(-1),平均产FDPH_4 21.51mg/ml。20L反应器连续运转,生产能力达到1.7g/h.L。用层析方法制备FDPNa_3结晶粉,提取收率为72.08％,制备质量达到或超过了国内外同类产品的质量要求。

依达拉奉和1,6-二磷酸果糖联合应用对心脏瓣膜置换手术患者的心肌保护作用

目的探讨氧自由基清除剂依达拉奉和能量代谢调节剂1,6-二磷酸果糖(FDP)联合应用在CPB下行心脏瓣膜置换手术患者的心肌保护作用。方法选取ASAⅡ或Ⅲ级、拟在CPB下行二尖瓣置换、主动脉瓣置换和联合瓣膜置换术患者40例。随机均分为对照组(A组)、依达拉奉组(B组)、FDP组(C组)和联合用药组(D组)。A组给予等容量生理盐水;B组将依达拉奉0.5mg/kg一次性加入CPB预充液中;C组于主动脉阻断前15min静脉滴注FDP 200mg/kg;D组为将依达拉奉0.5mg/kg一次性加入CPB预充液中,并于主动脉阻断前15min静脉滴注FDP 200mg/kg。分别于麻醉后切皮前(T1)、主动脉阻断前(T2)、CPB停止后2h(T3)、CPB停止后6h(T4)和术后24h(T5)采集桡动脉血,测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)浓度;血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、肌钙蛋白I(cTnI)的浓度并记录两组临床效果。结果与T1时比较,T2～T4时A组血浆SOD活性明显降低(P<0.05或P<0.01);T3～T5时四组血浆MDA浓度明显升高、CK-MB活性明显升高(P<0.05或P<0.01);T2～T5时四组血浆cTnI浓度明显升高(P<0.05或P<0.01)。与A组比较,T2～T4时B、C、D组血浆SOD活性明显升高(P<0.05);T3、T4时B、C、D组血浆MDA浓度、T3～T5时B、C、D组血浆CK-MB活性明显降低,T3时B、C、D组和T4时B、D组cTnI浓度明显降低(P<0.05或P<0.01)。与D组比较,T3、T4时B、C组血浆cTnI浓度明显升高(P<0.05)。术中多巴胺最大用量、术后24h引流量A组明显多于D组(P<0.05)。结论依达拉奉或FDP单独用药可以减轻心肌缺血-再灌注损伤,两者联合用药作用更加明显。

1,6-二磷酸果糖对阿霉素导致大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 研究 1,6 二磷酸果糖 (FDP)对阿霉素 (ADM )导致大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 给大鼠腹腔注射ADM ( 2 5 0mg·kg-1,隔日 1次 ,共 6次 )处理大鼠 ;给ADM处理的大鼠腹腔注射不同剂量的FDP(隔日 1次 ,共 2 1次 )进行干预。分别用TBA法、硝酸还原酶法、DTNB法、邻苯三酚自氧化法测定心肌的脂质过氧化物 (LPO)含量、一氧化氮 (NO)含量、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)活性、超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ;用透射电镜技术和TUNEL法检测心肌细胞凋亡 ;用原位杂交法检测心肌的诱导型一氧化氮合酶 (iN OS)mRNA表达。结果 FDP( 3 0 0 ,60 0 ,12 0 0mg·kg-1)干预ADM处理的大鼠后 ,均可降低心肌的LPO及NO含量、减少心肌细胞的凋亡数量、降低心肌iNOSmRNA的表达水平、增加心肌的SOD及GPx活性。结论 FDP抑制ADM导致心肌细胞凋亡 ,减轻ADM对心肌的毒性损伤 ,其机制2 0 0 1 0 4 12收稿 ,2 0 0 1 0 5 30修回 广西自然科学基金 (No 982 40 0 1)和广西教育厅科学基金 (No 1999 34 9)资助1 广西肿瘤研究所生化室 ,南宁 5 30 0 2 1作者简介 :阳冠明 ,男 ,39岁 ,医学硕士 ,副研究员 ,硕士生导师。Tel:0 771 5 35 8130 (O) ,5 35 130 5 (H) ;林善修 ,男 ,67岁 ,教授 ,博士生导师可能与其保护心肌的SOD及GPx活性、抗脂质?

1,6-二磷酸果糖在肺手术围术期的心肌保护作用

目的:观察1,6-二磷酸果糖(FDP)在肺手术围术期对患者的心肌保护作用。方法:选择行择期单侧肺叶或肺段切除术患者106例,分为FDP组和对照组,每组53例。FDP组于麻醉前给予FDP 200 mg/kg,对照组给予等量5%的葡萄糖注射液。监测麻醉前至术毕72 h的心电图,记录心律失常发生的时间及类型,并于麻醉诱导后手术前(T0)、术毕即刻(T1)、术后24 h(T2)、48 h(T3)及72 h(T4)抽血测肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)及心肌肌钙蛋白I(cTnI)浓度变化。结果:FDP组共发生心律失常35例次,明显少于对照组67例次。组间比较各类型心律失常发生例次FDP组均显著低于对照组,麻醉后至术毕、术后24 h内、术后24 h至48 h及术后48 h至72 h 4个时间段FDP组心律失常发生例次均少于对照组。FDP组CK-MB及cTnI浓度在T1,T2,T3和T4均显著低于对照组(P<0.05)。结论:FDP在肺手术围术期能产生有效的心肌保护作用。

添加1,6二-磷酸果糖的肠外营养在老年腹部手术病人中的应用

目的：探讨添加1，6-二磷酸果糖（FDP）的肠外营养在老年腹部手术病人中的应用价值。方法：将32例病人随机分成研究组和对照组，每组各16例。所有病人术后第1-6d接受等热量83．6kJ／（kg·d）和等氮0．2g／（kg·d）的肠外营养。研究组不用甘油磷酸钠，手术当天开始每天用FDP10g。于术前和术后第1、7d检测血浆清蛋白、前清蛋白、血磷，并做心电图。术后第1、3、5、7d测尿3-甲基组氨酸（3-MH），并计算氮平衡。结果：两组病人手术前、后血磷平均值正常，术后血清清蛋白和前清蛋白值较术前均降低，对照组前清蛋白水平下降明显（P〈0．05）。研究组术后尿3-MH排出较对照组明显减少（P〈0．05），术后累积氮平衡优于对照组（P〈0．05）。结论：FDP具有补磷、肠外营养增效及维护心功能的作用，适合老年腹部手术病人。

小麦苗期对非生物胁迫的响应及叶绿体果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因的表达分析

叶绿体果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(Chloroplast Fructose-1,6-bisphosphate aldolase,CpFBA)参与叶绿体(质体)的碳、氮代谢,在光合作用中具有重要功能,并能对植物的非生物胁迫产生积极响应。为了深入研究小麦CpFBA的生物学功能和对外界逆境的响应模式,以矮变1号、返白系、中国春、西农928、西农2000和晋麦47等六个不同生理特性的小麦品种(系)为材料,分析其在低温、NaCl、PEG模拟干旱和ABA处理下最大叶长和主根根长受到的影响,并采用半定量RT-PCR的方法研究小麦幼苗中CpFBA基因表达模式的变化。结果表明,各种外界非生物胁迫均不同程度的抑制了小麦幼苗叶片和根的生长,其中低温和ABA处理的抑制最为显著。在各种处理条件下,小麦幼苗CpFBA均有明显的上调表达,但不同品种间存在差异,表达模式的改变与品种的生理特性之间表现出一定的相关性。

1,6-二磷酸果糖对颅脑损伤炎症介质浓度的影响和预后观察

目的观察1,6-二磷酸果糖(FDP)对重度颅脑创伤患者炎症介质浓度变化及预后的影响。方法选择2008年4月～2010年6月入住笔者所在医院ICU的急性重症颅脑创伤患者100例,随机分为两组,两组均按常规重型颅脑创伤治疗原则处理,治疗组(50例)入院当日给予1,6-二磷酸果糖(FDP)10 g/d,静脉点滴,对照组(50例)按常规重型颅脑创伤治疗原则处理。两组入院1、3、5、7 d分别检测脑引流液和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10的浓度。统计两组患者GCS评分、APACHEⅡ评分、入住ICU时间、呼吸机使用时间及死亡率。结果两组入院时GCS评分、APACHEⅡ评分和TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组3 d后炎症介质浓度即较对照组明显降低,比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组GCS评分明显改善,呼吸机使用时间和ICU住院时间明显缩短,与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.05),28 d死亡率有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论早期使用FDP可以通过对神经细胞能量代谢的改善,稳定细胞内环境和膜功能,降低炎症介质浓度,以缩短呼吸机使用时间和ICU住院时间。

1,6-二磷酸果糖与辅酶Q10治疗新生儿窒息后心肌损害临床效果比较

目的:比较1,6-二磷酸果糖(FDP)与辅酶Q10治疗窒息后新生儿心肌损害的临床疗效。方法:将72例窒息后心肌损害新生儿按随机数表法分为两组,A组38例,采用FPD治疗,B组34例,采用辅酶Q10治疗,比较两组临床症状消失、心率变化、ECG及CK-MB恢复情况,同时比较两组患儿低钙血症发生率。结果:A组治疗有效率为86.4%,B组为85.3%,两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05),但低钙血症发生率A组为68.4%,B组为29.4%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:FDP及辅酶Q10对窒息后新生儿心肌损害都有确切的治疗作用,但FDP易发生且加重低钙血症,故有低钙血症患儿建议改用辅酶Q10治疗,同样可收到良好疗效。

人参皂甙Rg1与1,6-二磷酸果糖配伍抗疲劳作用的研究

观察人参皂甙Rg1与1,6-二磷酸果糖配伍的抗疲劳效果,寻找最佳配伍剂量。根据雄性清洁级昆明种小鼠按体重随机分为安静对照组、运动对照组、人参皂甙Rg1对照组及4个配伍组。通过析因实验设计分析人参皂甙Rg1与1,6-二磷酸果糖提高运动耐力的效果及两者的交互作用。结果不同剂量人参皂甙Rg1对小鼠力竭游泳时间影响有显著差异(P<0.05)。各配伍组力竭游泳时间均有显著延长,C组延长最显著;与人参皂甙Rg1对照组相比,各配伍组力竭游泳时间均显著降低(P<0.01)。MDA含量A组显著低于运动对照组和D组,与安静对照组相比,各组均升高。SOD/MDA比值A、C组显著高于运动对照组,C组显著高于人参皂甙Rg1对照组,与安静对照组相比,各组均有下降趋势,D组下降最显著(P<0.01)。乳酸脱氢酶C、D组显著低于运动对照组和人参皂甙Rg1对照组(P<0.05)。与运动对照组及人参皂甙Rg1对照组相比,配伍在一定程度上减少心肌、骨骼肌细胞线粒体和其他细胞超微结构损伤。结论:与FDP配伍未能延长小鼠力竭游泳时间,配伍可减轻耐力运动对小鼠心肌和骨骼肌的细胞损害,一定程度上保护线粒体的呼吸功能,缓解细胞缺氧损伤。

1,6-二磷酸果糖对热性惊厥大鼠学习记忆和情感行为损害保护作用的研究

【目的】探讨1,6-二磷酸果糖(fructose-1,6-diphosphate,FDP)对大鼠热性惊厥性学习记忆和情感行为损害的保护作用。【方法】30只21日龄雄性SD大鼠随机均分为果糖干预(FDP intervention group,FD)、盐水对照(so-dium chloride solutin control group,NS)和热性惊厥组(febrile seizure group,FS)。水浴法建立热性惊厥模型;FD组于惊厥前30min腹腔注射FDP25mg/100g大鼠体重;而NS组腹腔注射相同体积的0.9%氯化钠溶液;FS组不予干预。观察各组在避暗试验(passive avoidance test,PAT)、Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)及旷场试验(open field test,OFT)中学习记忆和情感行为的变化。【结果】FDP可使惊厥大鼠在PAT中的记忆潜伏期延长[FD组为(341.16±97.44)s,NS组为(227.62±92.19)s,FS组为(213.66±90.70)s,P<0.01],错误次数减少(FD组为1.84±1.27,NS组为4.97±1.18,FS组为5.06±1.38,P<0.01);在OFT中,FDP可增强反复惊厥大鼠的兴奋性(FD组得分为65.41±8.02,NS组为46.22±7.97,FS组为48.81±7.69,P<0.0 1),提高大鼠对陌生环境的适应能力(FD组后肢性站立的次数为36.29±5.06,NS组为18.72±4.71,FS组为20.06±4.96,P<0.01),改善大鼠的紧张情绪(FD组粪便粒数为5.62±2.76,NS组为10.79±2.91,FS组为11.43±3.01,P<0.01);在MWM中,FD组大鼠逃逸潜伏期缩短,搜寻策略改善。【结论】1,6-二磷酸果糖可以改善反复惊厥大鼠的学习记忆和情感行为,对惊厥性脑功能损伤具有保护作用。

果糖-1,6-二磷酸钠盐的结晶及结构分析

采用酒精-媒晶剂体系制备果糖-1，6-二磷酸钠盐（FDP），并对其最佳结晶工艺条件进行了研究。在此条件下，FDP的结晶收率和产品纯度分别为95％和99．3％。通过元素分析、红外光谱和核磁共振碳谱等对产品结构进行了研究分析。

1，6-二磷酸果糖治疗蒽环类药物心肌损害的疗效

目的：研究1,6-二磷酸果糖(FDP)对使用蒽环类化疗药致心肌损害的白血病患儿的疗效。方法：62例患儿随机分为治疗组(32例)及对照组(30例),分别予FDP及大剂量维生素C、维生素E、辅酶Q10治疗,治疗前后行心电图、心肌酶检查。结果：治疗前两组心肌酶水平相似且高于正常值,治疗后两组心肌酶均显著下降(P＜0.001),其差值在治疗组显著大于对照组(P＜0.05)。心电图改善率治疗组亦高于对照组。治疗组总有效率84.4％,明显高于对照组(70.0％)(P＜0.05)。结论：对于蒽环类化疗药物引起的心肌损害,FDP与维生素C、维生素E及辅酶Q10治疗均有效,但FDP疗效优于后者。

发酵法制备1,6-二磷酸果糖Ⅰ发酵菌株的确定及反应条件的研究

通过比较6株酵母细胞转化1，6－二磷酸果糖的结果，确定酿造酵母Y162作为转化菌株，对其菌株的培养方法，底物反应额的组成及反应条件进行了详细的考察，在最适条件下：pH6.5，蔗糖8％，NaH2PO45％，MgCl2·6H2O0.1％，甲苯4.0％，氯丙嗪0.2％，反应时间为8-10h，湿菌体与反应液的比例为1：4，反应液中FDP的产量可达12．1mg／ml。