柱层析法提取刺玫果肉活性成分及其体外活性

探究柱层析循环联合法提取刺玫果肉中目标成分(多糖、总黄酮、总皂苷)的工艺条件及其体外活性。以提取液中目标成分的含量为指标,通过对乙醇体积分数、吸涨体积、浸泡平衡时间、超声时间的考察确定最佳提取工艺。测定刺玫果肉目标成分的提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率及对亚硝酸盐的清除率。结果表明,在最佳提取条件下,刺玫果肉目标成分的提取率均在90%以上;分离后,干浸膏中多糖、总黄酮、总皂苷的含量分别为428.5、484.5、122.5 mg/g。纯化后,干浸膏中多糖、总黄酮、总皂苷的含量分别为804.1、772.7、396.4 mg/g。刺玫果肉目标成分的提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力均强于阳性对照阿卡波糖,表明其具有显著的体外降糖作用;刺玫果肉目标成分的提取物清除亚硝酸盐的IC_(50)值均高于阳性对照维生素C,表明其具有较弱的亚硝酸盐清除活性。柱层析循环联合法可以同时提取多糖、总黄酮、总皂苷,且提取效率较高,为刺玫果产品的开发提供依据。

山刺玫果降血脂、抗氧化及保护血管内皮功能的实验研究

目的研究野生山刺玫果对高脂大鼠血脂代谢的影响、抗氧化及保护血管内皮功能的作用.方法观察不同剂量山刺玫果对高脂大鼠血清TC,TG,HDLC,SOD,GSH-Px,NO和内皮素(ET)的影响,以及对血清、肝脏、大脑组织MDA的影响.结果山刺玫果(4.0 g/kg)可显著降低高脂大鼠血清TC,TG,ET含量(P<0.01),并明显提高HDLC,NO含量(P<0.01);1.0 g/kg山刺玫果可明显降低血清及肝脏MDA含量(P<0.05),2.0 g/kg剂量可明显提高SOD,GSH-Px活性(P<0.05),以上给药时间56 d.结论山刺玫果具有显著降血脂、抗氧化、保护血管内皮细胞的作用,具有防治动脉硬化作用.

刺玫果总黄酮的双水相萃取工艺及其抗氧化能力

为探索刺玫果总黄酮的乙醇-硫酸铵双水相(添加氯化钠)萃取工艺及其体外抗氧化性。采用单因素和正交试验法对刺玫果总黄酮的双水相萃取工艺进行了优化;并通过测试刺玫果总黄酮提取液对二苯基苦基肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O-2·)、亚硝酸盐、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵自由基阳离子(·ABTS+)的清除率和还原力,评价其抗氧化活性。结果表明:在乙醇体积分数27%、硫酸铵质量浓度0.21 g/m L、刺玫果提取液体积分数22%、氯化钠加入量为2.0 g的最佳工艺条件下刺玫果总黄酮平均萃取率为91.81%。刺玫果总黄酮提取液对·ABTS+、·OH和O-2·具有显著的清除能力,当总黄酮质量浓度分别为0.12、0.30和0.60 g/L时,对·ABTS+、·OH和O-2·的清除率分别为90.27、89.60%和96.73%,其清除能力均强于Vc;对DPPH·、亚硝酸盐具有一定的清除能力,但弱于Vc;刺玫果总黄酮提取液具有一定的还原能力。

刺玫果化学成分的研究

采用硅胶柱色谱和薄层色谱等方法对吉林产刺玫果化学成分进行了分离、纯化,运用现代波谱分析技术和理化性质对照等方法对其进行结构鉴定。共分离得到7个化合物,分别为α-D-(6-O-白芥子酰基)-吡喃葡萄糖基-β-D-(3-O-白芥子酰基)-呋喃果糖(1)、木犀草素-7-O-芸香糖苷(2)、金丝桃苷(3)、槲皮素(4)、异甘草素(5)、β-胡萝卜苷(6)、β-谷甾醇(7)。其中化合物1、2、5为首次从刺玫果中分离得到。

刺玫果挥发性成分的顶空固相微萃取-气质联用分析

采用顶空固相微萃取方法对刺玫果的干、鲜果挥发性成分进行萃取,运用气相色谱-质谱法分析其挥发性成分,用面积归一法确定各组分的相对含量。从刺玫果干果中分离得到61种挥发性成分,其中乙醇含量最高(28.00%),其次为4-萜烯醇(8.17%);从刺玫果鲜果中分离得到23种挥发性成分,1-己醇含量最高(37.08%),其次为乙苯(15.20%)。

刺玫果水煎液对动物胃肠运动的影响

目的研究刺玫果水煎液对家兔离体十二指肠运动的影响及对小鼠胃肠推进功能的影响。方法采用离体器官法、小鼠小肠推进运动实验法。结果刺玫果水煎液明显增高家兔十二指肠肠管的张力,减小收缩波平均振幅,不影响收缩频率;刺玫果水煎液对小鼠胃肠推进运动有显著加强作用。结论刺玫果水煎液具有增强胃肠运动功能,改善胃动力的作用。

刺玫果总皂苷的提取工艺研究

[目的]探索刺玫果中总皂苷的最优提取工艺条件。[方法]以刺玫果提取干浸膏中总皂苷的含量为指标,采用单因素和正交试验确定刺玫果中总皂苷的最优提取工艺条件。[结果]优化的刺玫果总皂苷的提取工艺条件为料液比1∶12,醇沉浓度60%,提取时间2.0h,提取次数3次。在此条件下提取的刺玫果干浸膏中总皂苷的含量平均达到58.16 mg/g。[结论]探索得到的工艺条件可用于刺玫果总皂苷的提取。

酶法提取刺玫果总黄酮工艺研究

以刺玫果为试材,采用酶法辅助提取刺玫果总黄酮,研究各因素对刺玫果总黄酮提取率的影响。结果表明:纤维素酶辅助提取刺玫果总黄酮的最佳工艺条件为提取溶剂为50%乙醇、温度控制在50℃、料液比1∶15g/mL、纤维素酶加入量为40mg/g、控制提取液于pH 5.5条件下,酶解提取2次,每次140min,在最佳条件下进行3次验证试验,其总黄酮提取率平均为95.94mg/g。

刺玫果多糖的提取工艺研究

研究刺玫果多糖的提取工艺条件。以刺玫果提取干浸膏中多糖的含量为指标,采用单因素和正交试验确定刺玫果多糖的最优提取工艺条件;采用苯酚-硫酸比色法测定刺玫果干浸膏中多糖的含量。结果表明,优化的工艺条件为:料液比1:12(m:V),醇沉浓度60%,提取时间2.0 h/次,提取次数2次,在此条件下提取的刺玫果干浸膏中多糖的含量平均达到48.50%。研究得到的工艺条件可用于刺玫果多糖的提取。

微波辅助提取刺玫果果胶工艺研究

采用微波辅助提取刺玫果果胶。以刺玫果果胶得率为考察指标对微波辅助提取工艺条件进行了优化,确定了盐酸为萃取剂的果胶最佳提取工艺:料液比1∶40(m/v)、提取液p H1.5、提取温度80℃、微波功率500W,微波提取时间40min、微波提取3次,在此工艺条件下,刺玫果果胶得率为0.787%。结果表明,微波法可用于刺玫果果胶的辅助提取。

山刺玫果抗脂质过氧化作用的实验研究

目的:探讨山刺枚果抗脂质过氧化的作用.方法:测试山刺玫果提取液在体外抗小鼠肝、心、肾、脑组织匀浆的脂质过氧化作用及其抗H2O2引发的红细胞的脂质过氧化作用,并观察山刺玫果提取液在体内对小鼠缺血心肌丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性的影响.结果:山刺玫果0.4 g/L提取液组体外抑制心、肝、肾、脑组织MDA生成的抑制率为77.1%～87.5%,0.2 g/L提取液组为17.3%～33.4%.山刺玫果提取液在浓度分别为6.7、3.3、1.7 g/L时,对H2O2引起红细胞MDA生成的阻断率分别为89.2%、53.4%、26.6%.小鼠灌胃山刺枚果2.0 g·kg-1·d1,连续6 d,可显著降低缺血心肌MDA的含量(P 《0.01),提高GSH-Px和SOD活性(P 《0.05);而4.0 g·kg-1·d-1剂量作用更显著(P《0.01).结论:山刺玫果具有显著的抗脂质过氧化作用,其抑制强度与剂量呈正比.

刺玫果提取物中总三萜酸的定性定量分析研究

建立刺玫果提取物中总三萜酸的定性定量分析方法。采用TLC法对刺玫果提取物总三萜酸中的熊果酸进行定性分析;采用UV法对刺玫果提取物中的总三萜酸进行了定量分析;采用HPLC法对刺玫果提取物总三萜酸中的齐墩果酸、熊果酸进行了定量分析。结果表明,UV法中齐墩果酸在1.75~15.75 mg/L范围内与吸光度有良好的线性关系（r=0.999 1）,平均加样回收率为101.60%（RSD1.23%）;HPLC法中齐墩果酸、熊果酸在0.1~1.1μg（r=0.999 7）、0.024~0.768μg（r=0.999 9）线性关系良好,平均加样回收率分别为100.24%（RSD 1.44%）、100.54%（RSD 0.45%）。3批刺玫果提取物中总三萜酸平均为8.62%,齐墩果酸平均为0.273%,熊果酸平均为0.534%。结果表明,所建立的刺玫果提取物中总三萜酸的定性分析和定量分析方法可用于该提取物的质量控制。

刺玫蔷薇茎中二氢槲皮素的提取工艺研究

探索了从刺玫蔷薇茎中提取二氢槲皮素的工艺条件,考察了乙醇提取及盐酸水解过程中各条件对二氢槲皮素提取率的影响。通过单因素实验确定其最佳条件:原料粒度为100～120目、提取温度为80℃、乙醇溶液浓度为60%、料液比为1∶15、提取时间为3h及盐酸溶液与原料用量比值为3∶1、盐酸浓度为3mol/L、水解时间为2h、水解温度为90℃,在此条件下二氢槲皮素的提取率为90.79%。

离子液体辅助提取刺玫果中木犀草素与金丝桃苷的工艺研究

为给刺玫果的开发利用提供参考依据。采用单因素试验与正交试验相结合的研究方法,以木犀草素、金丝桃苷的峰面积为指标,采用高效液相色谱法,建立了同时测定刺玫果中木犀草素、金丝桃苷含量的方法,探寻并优化了离子液体辅助提取刺玫果中木犀草素、金丝桃苷的工艺条件。检测与分析结果表明:色谱柱为伊利特ODS2 C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相以乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱,进样量20μL,检测波长360 nm,柱温35℃;木犀草素、金丝桃苷进样质量浓度在0.19~15.20μg·m L-1范围内其线性关系(r=0.997 7)均良好;木犀草素的平均回收率为97.49%,RSD为1.76%;金丝桃苷的平均回收率为101.07%,RSD为1.83%。优化试验结果表明,离子液体辅助提取的最佳工艺条件为:离子液体浓度为0.45 mol·L-1,料液比为1∶25,乙醇的体积分数为70%,提取温度为80℃,提取时间为90 min,超声波功率为180 W;在此优化的提取条件下,木犀草素、金丝桃苷的提取率分别为11.99、25.36μg·g-1,其提取率分别提高了36.87%、49.09%。验证试验结果表明:建立的含量测定方法具有良好的精密度,结果准确可靠;优化的提取方法快速、简单、提取率高。

大孔吸附树脂纯化山刺玫果总黄酮的工艺研究

对山刺玫（Rosa davurica Pall.）果总黄酮的大孔树脂纯化工艺进行了优化研究,以比吸附量和比解吸量为考察指标,进行了D-101大孔树脂纯化工艺的优化。结果表明,其最佳工艺条件为生药浓度0.025 g/m L;最佳上样量为0.23 g/g（生药量/树脂量）;最佳吸附时间为30 min;上柱液p H为2.0-4.0;吸附速率为1 BV/h;洗脱液为3 BV 70%乙醇,洗脱流速为1 BV/h。在此最佳条件下得到的山刺玫果提取物总黄酮含量由20%提高到85%左右。采用D-101型大孔树脂纯化山刺玫果总黄酮的效果较好,且操作简单,为山刺玫果的综合利用提供了依据。

刺玫果提取物胶囊定性定量研究

建立刺玫果提取物胶囊的定性鉴别和含量测定方法.采用薄层色谱法对刺玫果提取物胶囊进行了定性分析;采用紫外-可见分光光度法,建立了刺玫果提取物胶囊总黄酮的含量测定方法;采用高效液相色谱法,建立了刺玫果提取物胶囊中金丝桃苷的含量测定方法.结果表明建立的薄层色谱鉴别方法,荧光斑点清晰,阴性无干扰;芦丁在4.0~48.0μg/mL(r=0.9996),金丝桃苷在0.192~1.152μg(r=0.9999)线性关系良好;芦丁平均回收率100.05%,RSD为1.40%(n=6);金丝桃苷平均回收率99.39%,RSD为0.66%(n=6).建立的薄层鉴别方法专属性高,含量测定方法具有良好的精密度,结果准确可靠,可用于刺玫果提取物胶囊的质量控制.

遗传算法优化酶辅助提取刺玫果多糖工艺及其抗氧化活性研究

以刺玫果为原料,采用酶辅助水提法提取刺玫果多糖,以加酶量、酶解时间、料液比为考察因素,多糖提取率为评价指标,采用单因素试验和Box-Behnken响应面设计建立数学模型,应用遗传算法对模型进行优化,得到提取工艺最佳条件,并对刺玫果多糖进行抗氧化活性初步研究。结果表明:酶辅助法提取刺玫果多糖的最佳工艺条件为加酶量1.37%,酶解时间71min,料液比1∶30g/mL。Box-Behnken响应面法和遗传算法联用时,刺玫果多糖提取率高,为16.38%。刺玫果多糖具有显著的自由基清除作用,但与抗坏血酸对比,其对DPPH自由基、ABTS~+自由基和羟自由基的清除率均略低。

刺玫果总黄酮Zn2+络合物的制备及其体外抗氧化活性研究

探究刺玫果总黄酮Zn^2+络合物的制备工艺及其体外抗氧化活性。以黄酮转化率为指标,通过单因素实验与正交试验优化刺玫果总黄酮Zn^2+络合物的最佳制备工艺,并测定刺玫果总黄酮及其Zn2+络合物对·OH、O2-·、抗脂质体过氧化、ABTS+·的清除能力,评价其体外抗氧化活性。结果表明:刺玫果总黄酮Zn^2+络合物的最佳制备工艺为,氯化锌溶液14 mg/mL、总黄酮溶液8 mg/mL、体系pH=9,50℃恒温振荡3.0 h,离心收集沉淀物,即为刺玫果总黄酮Zn2+络合物,转化率为96.94%,收率为35.76%。Zn2+络合物对·OH、O2-·的清除能力及抗脂质体过氧化能力强于刺玫果总黄酮和VC溶液,对ABTS+·也具有良好的清除能力。因此,刺玫果总黄酮Zn2+络合物具有一定的抗氧化还原能力。

负压超声法提取刺玫果黄酮及其抗氧化性研究

采用负压超声技术辅助乙醇提取刺玫果黄酮,在单因素试验基础上,以超声时间,超声温度,超声功率,料液比为影响因子,应用Box-Behnken中心组合进行四因素三水平试验设计,以刺玫果黄酮得率为响应值,响应面优化提取工艺,并测定了醇提物的铁还原力及DPPH·、OH·和O_2^-·的清除能力。确定最佳提取工艺为:料液比为1:30,超声功率为400 W,超声时间为33 min,超声温度56℃,在此条件下,黄酮得率为(3.342±0.027) mg/g,同时建立了乙醇溶液提取刺玫果黄酮的二次项数学模型,对目标产物的提取具有良好的预测作用。抗氧化试验表明:刺玫果黄酮有较好的还原性,对OH·、DPPH·和O_2^-·均有较好的清除能力,其IC50值分别为0.021 mg/mL、0.182μg/mL、0.013 mg/mL,还原力和对三种自由基的清除能力高于同浓度的Vc。说明负压超声法能够制备的刺玫果黄酮有较良好的抗氧化活性。

PB实验及响应面法优化山刺玫果总黄酮的提取工艺

通过Plackett-Burman(PB)实验和响应面法对山刺玫果总黄酮的超声辅助提取工艺进行优化,确定最佳提取工艺为:超声功率150 W、超声温度55℃、提取液pH值3.5、乙醇浓度60%。在此条件下,山刺玫果总黄酮得率为10.63 mg·g-1。表明PB实验结合Box-Behnken设计响应面法可避免因响应面法中影响因素选取不当而造成交互作用不明显等现象。