液质联用快速测定河鲀鱼肝脏中河鲀毒素含量的方法研究

采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法进行了河鲀鱼肝脏中河鲀毒素（Tetrodotoxin,TTX）含量的快速检测研究。河鲀鱼肝脏样品用1%乙酸甲醇溶液超声提取2次,正己烷脱脂后用C18和石墨化碳黑（GCB）混合吸附剂净化,冷冻高速离心,上清液经聚四氟乙烯-尼龙复合膜过滤;TSK-gel Amide-80 3μm色谱柱分离,乙腈和0.15%乙酸（含10mmol/L乙酸铵）溶液为流动相梯度洗脱进行HPLC-MS/MS分析。外标法定量测定。方法检出限为40μg/kg,在50～1 000μg/kg范围内线性关系良好。在河鲀鱼肝脏中添加50,75,100μg/kg TTX进行重复性试验,回收率在79.2%～105.3%之间,相对标准偏差（RSD）不大于9.0%（n=6）。本方法准确、灵敏、实用,节约时间和试剂,操作简单,易重现,满足目前对河鲀鱼肝脏中TTX含量快速定量检测的技术要求。

暗纹东方鲀脂肪肝并发诺卡氏菌病

对濒死暗纹东方鲀进行了常规临床检查、细菌分离鉴定、药敏试验和组织病理学观察,综合临床研究和治疗结果,认为暗纹东方鲀死亡原因是严重脂肪肝并发诺卡氏菌感染。分离菌株属于诺卡氏菌属,但对小鼠和暗纹东方鲀致病力不强。分离菌株对诺氟沙星、氧氟沙星、新霉素、阿米卡星等敏感,但对磺胺类和四环素类有耐药性,且容易形成对氨苄青霉素的耐药性。肝胰脏表现为严重脂肪肝和小的肉芽肿。肾脏表现为肾小管上皮细胞变性坏死并同基底膜分离,肾小管内有细胞管型和蛋白管型。消化道黏膜脱落,淋巴细胞浸润。

亲水液相色谱-三重四极杆质谱检测河豚鱼肝中的河豚毒素

目的:建立河豚鱼肝中河豚毒素(TTX)的亲水液相色谱-三重四极杆质谱联用(LC-MS-MS)定量检测方法。方法:样品经匀浆,超声,乙腈沉淀离心后,取上清液进样测定。极性聚酰胺键合硅胶柱InnovationTMHP Amide(100 mm×3.0mm,5μm),流动相乙腈-0.3%甲酸(体积比为70∶30),流速为0.5 mL·min-1;柱温30℃,进样量5μL。选择正离子多反应监测(MRM)模式,[M+H]+,m/z 320.1162.1进行定量分析。结果:TTX的线性范围为0.031 3～2.00 mg·L-1(r=0.999 9);检测限(S/N=3)为3.0 pg,加样回收率在96.3%～103.0%。结论:该法灵敏度高,重复性好,简便快速,适用于河豚毒素的测定。