重组大肠杆菌全细胞转化马来酸高效合成富马酸

重组Escherichia coli细胞催化马来酸合成富马酸时,细胞中富马酸酶将产物富马酸转化成苹果酸,转化率达15.5%,降低了富马酸的转化率和纯度。将E.coli BL21(DE3)基因组中fum A-fum C基因敲除,并高效表达马来酸顺反异构酶,重组菌BL21(DE3)△fum A-fum C/p ET24a-mai A经发酵罐培养,可产生64 g/L菌体,马来酸顺反异构酶表达量达306 U/m L。按照60 g/L的发酵液:2 mol/L富马酸为1∶4的体积比配置反应液,37℃反应1 h,富马酸转化率高达98.4%,仅产生0.7%的苹果酸副产物。该结果为全细胞催化法合成富马酸的工业化奠定了基础。