丁香酚通过PI3K/AKT信号通路减轻镰刀菌诱导的角膜炎症

目的:探讨丁香酚对镰刀菌(F.solani)诱导的小鼠真菌性角膜炎(FK)的保护作用,并初步探讨可能的潜在机制。方法:采用改良的表层镜法制备FK小鼠模型。二甲基亚砜(DMSO)组大鼠右眼结膜囊涂抹等量DMSO(0.05%)。丁香酚组将丁香酚(160μg/mL)涂抹至小鼠右眼结膜囊。类胰岛素生长因子-1(IGF-1)组除施用丁香酚外,还于右眼结膜囊涂抹PI3K/AKT通路激活剂IGF-1(10 nmol/mL)。分别在接种镰刀菌悬浮液的第1、3、5 d,于裂隙灯显微镜下观察角膜形态。采用苏木精伊红(HE)染色评估角膜组织病理损伤。测定角膜组织载菌量。酶联免疫吸附试验和蛋白免疫印迹用于分析炎症介质白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)的水平和PI3K/AKT通路蛋白的表达。结果:丁香酚治疗可改善FK小鼠的角膜炎形态症状和炎症反应,减轻角膜病理组织损伤和真菌负荷。在镰刀菌感染3 d,与DMSO组相比,丁香酚组角膜组织IL-6水平明显升高,而IL-1β水平明显降低(均P<0.05);且丁香酚组角膜组织IL-6水平明显高于IGF-1组、IL-1β水平明显低于IGF-1组(均P<0.05)。在感染5 d,丁香酚组角膜组织中IL-6和IL-1β水平均明显低于DMSO组和IGF-1组(P<0.05)。与DMSO组相比,丁香酚组角膜组织中p-PI3K和p-Akt表达均明显降低(P<0.05);且丁香酚组角膜组织p-PI3K和p-Akt表达明显低于IGF-1组(均P<0.05)。结论:丁香酚可能通过抑制PI3K/AKT通路来减轻镰刀菌引起的角膜炎症,对小鼠镰刀菌角膜炎具有保护作用。

光活化消毒技术清除小鼠舌部白色念珠菌的实验研究

目的 建立小鼠急性假膜型念珠菌性口炎模型,观察光活化消毒技术(photoactivated disinfection,PAD)在体内清除白色念珠菌的效果,初步探索该技术应用于急性假膜型念珠菌性口炎的可行性。方法 选取6周龄雄性ICR小鼠,向已产生免疫抑制的小鼠舌背接种浓度为1×10^(7)CFU/mL的白色念珠菌菌液,成功建立急性假膜型念珠菌性口炎模型30只,随机分为对照组、光活化组,每组15只。光活化组小鼠舌背部涂抹1 mg/mL甲苯胺蓝溶液,孵育1 min,750 mW LED红光照射1 min后即刻与对照组小鼠行舌背真菌载量测定,48 h后再次对两组小鼠行舌背真菌载量测定,并行舌部组织病理学检查。结果 PAD处理后48 h,光活化组舌背白色假膜明显少于对照组。PAD处理后即刻和48 h,光活化组舌背真菌载量均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。PAD处理后48 h,光活化组经HE染色显示较对照组上皮结构更加规则,未见微小脓肿;经PAS染色显示菌丝数量明显少于对照组,偶见菌丝侵入角化层,但未深入上皮层。结论 PAD能显著清除急性假膜型念珠菌性口炎小鼠舌部的白色念珠菌。

黄连解毒汤有效成分的提取及其对体内白色念珠菌的清除作用

试验旨在研究黄连解毒汤有效成分的提取及对其体内白色念珠菌的清除作用。分别采用水煎煮和乙醇回流提取法,随后乙醇提取物用3种不同极性的有机溶剂萃取(正丁醇、乙酸乙酯、石油醚),以最小抑菌浓度为指标优化出最佳抑菌效果的提取工艺;观察给药前后系统性感染白色念珠菌小鼠肾脏、肝脏的真菌负荷量及活性氧(ROS)含量水平的变化,并检测血清中细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、白细胞介素-1β前体(pro-IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果显示,黄连解毒汤抑菌效果最优的提取工艺为:料液比1∶30,乙醇浓度60%,温度80℃,提取时间1 h,提取次数2次,测得乙酸乙酯萃取物MIC 90为0.3125 mg/mL。与模型组相比,黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(EAHD)高剂量组能显著降低小鼠肾脏真菌负荷量(P<0.05),完全治愈率达40%,并明显高于氟康唑组;EAHD低、中和高剂量组(50、100及200 mg/(kg·d))均能显著降低肝脏真菌负荷量(P<0.05),其中中剂量组和氟康唑组降低肝脏真菌负荷量效果接近。同时EAHD高剂量组能显著或极显著降低感染后小鼠肾脏和肝脏ROS含量(P<0.05;P<0.01);显著或极显著提高血清中IL-6、IL-1β和TNF-α的含量(P<0.05;P<0.01),同时降低pro-IL-1β含量。综上所述,通过优化后的提取工艺得到的EAHD具有降低模型小鼠肾脏和肝脏ROS含量和调控炎症因子的作用,进而降低炎症反应,起到保护组织和抵抗白色念珠菌的作用。

负载抗真菌药的骨水泥治疗骨与关节真菌感染文献分析

目的了解负载抗真菌药的骨水泥治疗骨与关节真菌感染的应用现状。方法检索PubMed、Web of Science、Elsevier Science Direct、Embase、Springer-link、Wiley Online Library、中国知网及万方数据知识服务平台等数据库中关于使用负载抗真菌药的骨水泥治疗骨与关节真菌感染的临床案例,检索时间自数据库建库至2023年1月,提取相关数据进行描述性统计分析。结果共收集病例16例,男7例,女9例,平均年龄为(64.56±10.33)岁;局部植入负载氟康唑的骨水泥3例,两性霉素B 9例,伏立康唑5例(其中1例同时植入伏立康唑和两性霉素B);只有8例病例报告记录了使用骨水泥的种类,7例使用Palacos,1例使用Simplex和Synicem 1 g。15例使用二期翻修术,1例使用一期翻修术;总体治愈率为81.25%。结论使用负载抗真菌药的骨水泥联合全身抗真菌药配合二期翻修术是一种有效治疗骨与关节真菌感染的策略,但最适品种和剂量有待进一步研究。

高负荷剂量卡泊芬净治疗ICU重症患者侵袭性真菌感染的疗效分析

目的探讨高负荷剂量卡泊芬净治疗ICU重症患者侵袭性真菌感染的疗效。方法选取医院2014年4月-2015年9月ICU收治78例ICU重症侵袭性真菌感染患者为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各39例,观察组施行高负荷(首次100mg)剂量卡泊芬净进行治疗,对照组施行常规剂量(首次70mg)卡泊芬净进行治疗,观察两组患者治疗效果及不良反应发生率。结果两组患者共检测出115株真菌,观察组真菌清除率为74.6%明显高于对照组53.8%(P<0.05);观察组治疗的总有效率87.3%明显高于对照组58.9%(P<0.05);治疗前后两组患者的肝肾功能比较差异均无统计学意义;两组患者的耐受性均良好,均无呕吐、疼痛及腹泻现象发生,在皮疹、贫血等不良反应发生率方面两组比较差异无统计学意义。结论高负荷剂量卡泊芬净治疗ICU重症患者侵袭性真菌感染的效果明显,安全可靠,值得临床推广应用。