Fura-2荧光指示剂法研究稀土离子跨红细胞膜的作用

文章采用 Fura- 2荧光指示剂法研究了稀土离子跨红细胞膜的作用 ,结果发现 ,即使在很低的浓度下也能检测到稀土离子的跨膜现象 。

利用荧光浓度指示剂fura-2研究稀土离子的跨膜行为

本文提出了利用fura-2测量细胞内游离稀土离子浓度的定量方法.实验结果表明,在模拟细胞内离子组成的条件下,稀土离子La^(3+)和Y^(3+)与fura-2形成1:1的配合物.其配合物的表观离解常数分别为161nmol·dm^(-3)和404nmol·dm^(-3),pH7.05.有未配对f电子的Nd^(3+),Ho^(3+),Sm^(3+),Dy^(3+),Ce^(3+),Yb^(3+)等稀土离子对荧光起萃灭作用.此性质使我们能够定性鉴定它们是否进入了细胞.我们使用如上性质,利用单细胞阳离子测试系统,以小鼠骨髓瘤细胞为模式细胞,研究了游离稀土离子的跨膜行为及部分体内小分子对稀土离子跨膜行为的影响.实验结果支持游离稀土离子不能通过细胞膜的假设,而且所研究的体内小分子在生理浓度下对稀土离子的跨膜也无明显作用.

用荧光钙指示剂Fura-2连续监测偏头痛患者血小板胞浆游离钙浓度变化

应用荧光钙指示剂Ｆｕｒａ－２负载血小板双波长扫描的方法，测定了２０例偏头痛间歇期患者、１０例发作期患者血小板静息态及凝血酶刺激后胞浆游离钙浓度（「Ｃａ＾２＋」），并记录了凝血酶刺激后「Ｃａ＾２＋」上升时间，结果：偏头痛患者血小板静息状态及激活态「Ｃａ＾２＋」均高于对照组；凝血酶刺激血小板后「Ｃａ＾２＋」上升时间较对照组明显缩短。

细胞内游离Ca^(2+)的荧光指示剂研究进展

Ca2+在细胞的生命活动中起着重要作用,游离Ca2+浓度的变化与细胞的功能、信号传递及其损伤和凋亡都有着密切的联系,故胞内游离Ca2+浓度(简写为[Ca2+]i)的含量及其时空分布的精确测定极为重要.对目前用于测定细胞内游离Ca2+浓度的常见荧光指示剂进行了综述,分析了常用的研究方法并对其优、缺点进行了简单的比较和评述.

Fura-2荧光探针研究Ca^(2+)对大肠杆菌细胞的跨膜作用

以Fura 2 /AM作为荧光探针 ,研究了Ca2 + 对大肠杆菌HB10 1细胞的跨膜作用 .考察了不同浓度外源钙离子处理不同生长时期细胞的跨膜行为 ,并采用停流技术测定了荧光动力学 .结果表明大肠杆菌在用CaCl2 溶液处理后 ,胞外Ca2 + 可大量进入胞内 ,且进入细胞的钙离子量与胞外钙离子浓度相关 ;处于对数生长前期的细胞与对数生长后期和稳定期的细胞相比 ,胞内自身Ca2 + 浓度低 ,但其摄取外源Ca2 + 的能力最强 ,这应该与其生理代谢活性是相关的 ,而且这一时期是大肠杆菌细胞最易建立人工诱导感受态的时期 .该研究对于测定革兰氏阴性菌细胞内Ca2 + 浓度及胞外离子的跨膜传导行为 。

利用Fura-2/AM荧光探针法和LCSM法研究受磁场处理S.aureus细胞Ca^(2+)的跨膜行为

研究受脉冲磁场处理金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞Ca2+的跨膜行为,为此研究了表征S.aureus胞内Ca2+浓度变化Fura-2/AM荧光探针检测法,并检测了不同脉冲数下经脉冲磁场处理后S.aureus细胞荧光强度的变化,采用激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)观察了经脉冲磁场处理前后S.aureus胞内Ca2+浓度的变化。研究结果表明,Fura-2/AM可成功的负载于S.aureus中,可以应用于S.aureus胞内游离钙离子浓度变化的测定。经脉冲磁场处理后,S.aureus胞内钙离子浓度显著上升,且与活菌数的减少高度相关,相关度达到-0.989 15;胞内光点显著增多,光点荧光强度明显增大,说明大量胞外钙离子跨膜进入胞内。因此,可以判断微生物细胞膜通透性的改变和胞内Ca2+浓度的上升是高强度脉冲磁场具有杀菌作用的重要原因。

荧光指示剂检测甜菜胞内钙离子的条件优化

胞内钙离子信号做为第二信使参与植物抗病信号转导途径。以甜菜叶片为试验材料,用孵育方法将Ca2+荧光探针Fluo-3/AM载入甜菜细胞中,并结合激光共聚焦扫描显微技术,研究甜菜叶片胞质游离Ca2+的测定方法。结果表明,采用20μmol·L-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM装载顺次进行低温4℃孵育120 min,25℃孵育120 min,可获得较为理想的甜菜叶片胞质游离Ca2+染色结果。该方法可用于检测BNYVV侵染甜菜叶片胞质游离钙离子的变化,为研究甜菜BNYVV入侵甜菜后胞内钙信号作用提供理论研究基础。

Fura-2/AM荧光探针法用于大肠杆菌胞内游离钙的测定

目的探讨经超声处理后大肠杆菌胞内游离钙的变化。方法超声波作用影响大肠杆菌,用Fura-2/AM探针法测定胞内游离钙的变化。结果经超声作用后的大肠杆菌胞内游离钙水平升高,打开了钙依赖性的离子通道,膜两侧离子交流加速,膜通透性增加。结论Fura-2/AM荧光探针法可用于微生物大肠杆菌胞内游离钙的测定。经一定条件下超声作用后的大肠杆菌胞内游离钙水平升高。

Fura-2荧光探针法检测细胞内La^(3+)

使用Fura - 2荧光探针技术 ,检测细胞内的镧离子浓度 [La3+]i 变化 ,研究其跨膜行为。结果显示 ,细胞外镧 [La3+]o(0 .1mmol/L)可使细胞内镧离子浓度增加 ,说明镧离子能够跨越小鼠心肌细胞膜 ,讨论了跨膜机理。

Fura-2荧光测定胞质Ca^(2+)实验中注意Cd^(2+)的荧光干扰作用

目的探讨Cd2+在Fura-2荧光测定胞质Ca2+过程中对荧光的干扰作用。方法培养的PC12细胞,在无钙溶液中利用Fura-2荧光探针测定胞质内Ca2+浓度。结果在thapsigargin诱导Fura-2荧光比值(F340/F380)上升后,CdC l2可以导致F340/F380进一步升高。将细胞膜破坏,Fura-2从胞质内溢出,CdC l2依然可以导致荧光比值明显上升。在无PC12细胞,无Ca2+的溶液中,加入Fura-2/AM,100μmol.L-1CdC l2可以导致F340/F380明显升高。结论Cd2+对Fura-2及Fura-2/AM都存在荧光干扰现象,使荧光比值增加。

用荧光剂Fura-2连续测定大鼠泪腺细胞胞浆内Ca^(2+)浓度的变化

普遍认为，激素及神经递质对细胞作用的机理涉及到胞内CA^(2+)浓度的改变。

用Fura－2和显微荧光术定量检测活性肝细胞胞内游离钙离子

用Ｆｕｒａ－２和显微荧光术定量检测活性肝细胞胞内游离钙离子广州军区武汉总医院一外科（武汉４３００７０）卢绮萍，史陈让，吴笑春，蔡逊武汉大学分析测试中心孙天恩，周平Ｃａ２＋作为偶联胞外刺激与胞内反应的第二信使，在细胞生理调控中起着重要作用，细胞内游离钙...

应用Fura-2测Ca^(2+)时应注意的问题

Ca^(2+)的荧光络合剂Fura—2,是目前最常使用的细胞内Ca^(2+)指示剂,它较Q-uin—2具有用量少,灵敏度高等优点,但其使用也存在一些实际问题。Fura-2不能透过细胞膜,所以常用其乙酰甲基酯Fura-2/AM,Fura—2/AM不溶于水,溶于二甲亚砜(DMSO)。

用Fura-2/Am测定血小板胞浆游离钙浓度

推荐荧光探针Fura 2

一种新型胞内游离钙离子检测探针Fura-2

钙离子是细胞内的一种重要的信号分子,采用各种荧光染料进行胞内钙离子浓度和分布检测对了解细胞生理活动具有重要意义。Fura-2是一种被用来测定胞内钙离子浓度的第二代紫外激发的双波长Ca2+荧光指示剂,结合比例荧光成像系统可以有效地检测胞内钙离子浓度和分布.本文介绍了Fura-2的基本化学性质、导入细胞的方式,以及采用比率荧光成像系统检测胞内钙离子浓度的优缺点及其对策.