平菇种内原生质体分离与融合杂交育种技术及应用

将PDY液体培养的16个平菇资源品种的菌丝体,在25℃、pH5.8～6.0环境下,分别用1.5%溶菌酶+0.6mol/LKCl稳渗剂溶解其细胞壁2h,原生质体数得量最高;将获得的原生质体两两配对成39个组合,在30℃、pH9.0、0.6mol/LKCl稳渗剂、不加融合促进剂CaCl2和PEG6000的融合条件下,得到种内杂交融合子5株。其中有4株融合子再生出菌丝体和子实体;同皿接种实验显示,新菌株与其双亲具明显的拮抗性。经栽培试验与生产示范,新育的"优生1号"品系表现适应性强,优质、丰产、抗杂、耐热。

平菇种内原生质体分离与融合杂交育种技术的研究

将16个平菇资源品种的菌丝体,在25℃、pH5.8～6.0环境下,分别用1.5%溶菌酶加0.6mol/LKCl稳渗剂溶解其细胞壁2h,原生质体数得量最高。将获得的原生质体两两配对成39个组合,在30℃、pH9、0.6mol/LKCl稳渗剂、不加融合促进剂CaCl2和PEG6000的融合条件下,得到种内杂交融合子5株。其中4株融合子再生出菌丝体和子实体;同皿接种实验显示,新菌株与其双亲具明显的拮抗线。经栽培试验与生产示范,新育的“优生1号”品系表现适应性强,优质、丰产、抗杂、耐热。

多环芳烃降解菌的细胞融合及降解性能研究

以菲降解菌——鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas sp.)GY2B和芘降解菌——假单胞菌(Sphingomonas sp.)GP3A为研究对象,对两株菌进行融合前的抗药性标记筛选,融合后的菌株通过形态学及分子生物学进行分析鉴定,并测定其对菲和芘的降解效果。结果表明,筛选出GY2B的遗传标记为哌拉西林抗性(80μg·m L-1),GP3A的遗传标记为头孢他啶抗性(80μg·m L-1)或红霉素抗性(100~150μg·m L-1)。通过菲和芘的初步降解实验筛选出一株融合菌株F14,通过平板菌落形态、扫描电镜(SEM)及PCR-RFLP分析鉴定F14是不同于亲本的菌株,是GY2B和GP3A的融合子。融合菌株F14既可以降解菲又可以降解芘,对初始浓度为100 mg·L-1的菲和芘的降解率分别为99%(24 h)和18%(10 d),降解能力和降解效果明显高于其亲本。

Purified terephthalic acid wastewater biodegradation and toxicity

The biodegradation and toxicity of the purified terephthalic acid（PTA） processing wastewater was researched at NJYZ pilot with the fusant strain Fhhh in the carrier activated sludge process（ CASP）. Sludge loading rate（SLR） for Fhhh to COD of the wastewater was 1.09 d^-1 and to PTA in the wastewater was 0.29 d^-1. The results of bioassay at the pilot and calculation with software Ebis3 showed that the 48h-LC50 （median lethal concentration） to Daphnia magna for the PTA concentration in the wastewater was only 1/10 of that for the chemical PTA. There were .5 kinds of benzoate pollutants and their toxicities existing in the wastewater at least. The toxicity parameter value of the pure chemical PTA cannot be used to predicate the PTA wastewater toxicity. The toxicity of the NJYZ PTA wastewater will be discussed in detail in this paper.

利用同源菌株融合改良农抗5102产生菌Ⅱ.融合子的检出、筛选和鉴别

以农抗５１０２产生菌同源菌株９０－１１（ＳｔｒＲ、ＴｅｔＲ）和ＦＲ－００８（ＲｉｆＲ、ＡｍｐＲ）为亲本的原生质体融合，采用“后涂直接法”在各含５０ｍｇ／Ｌ链霉素和利福平的双抗平板上检出融合子，经抗药性和抗菌活性筛选，获得１株产生２株亲本均不具备的抗细菌活性的融合子ＳＲ－７和１株各种抗菌活性均高于亲本的融合子ＳＲ－Ｔ１９。经抗药稳定性、培养和形态特征、抗菌谱、代谢产物、紫外光谱和ＲＡＰＤ分析等鉴别，证实２株融合子均系双亲融合重组的后代。

生物质炭固定化融合菌株F14方法的研究及其对芘的去除

F14是一株用原生质体融合技术构建的能够降解多环芳烃(PAHs)的融合菌株,利用生物质炭固定化F14制备固定化微生物小球来提高该菌株对芘的去除能力。实验在确定聚乙烯醇(PVA)和海藻酸钠(SA)最佳组合比例的基础上,研究了不同温度下(300、500℃和700℃)制备的生物质炭形成的固定化小球的性能以及对芘的去除效果。结果表明:制备的固定化小球的直径约为3mm,对固定化小球成球效果、传质性能和机械性能的分析表明,载体PVA和SA的最佳组合比例为8%和1%;对不同温度下制备的生物质炭的固定化小球的传质性能和扫描电镜图进行分析,表明700℃制备的生物质炭的固定化小球性能较好。与游离菌相比,固定化小球对芘的去除能力更高且速率更快,对初始浓度为50 mg·L^(-1)的芘10 d内去除率高达94.91%,比游离菌对芘的去除率高了近58%,同时固定化小球可以重复使用高达9次。