黄金蝉若虫体蛋白水解液的荧光标记及电喷雾质谱鉴定

采用2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基]氯甲酸酯(DBCEC-Cl)作为柱前衍生试剂,于室温下,在硼酸钠缓冲液(pH9.0)中,金蝉若虫体蛋白水解液中氨基酸的完全衍生化在5min即可完成。在HypersilBDSC18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm)上,采用梯度洗脱实现了各衍生物的完全基线分离。最佳荧光检测为λex/λem=300/395nm。在线串联的ESI/MS正离子质谱数据显示:所有衍生物均给出m/z338.5,294.5的特征碎片离子峰。荧光条件下的线性回归系数大于0.9992;检出限为2.6～24fmol。本方法灵敏、可靠、重现性好。对实际黄金蝉若虫体蛋白水解液中氨基酸的测定,结果满意。

高效液相色谱-电喷雾/质谱法测定青稞幼苗提取物氨基酸

以2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基)-乙基]氯甲酸酯(DBCEC-Cl)作为柱前衍生试剂,采用高效液相色谱-电喷雾/质谱法(HPLC-ESI/MS)对青稞幼苗提取物中的氨基酸进行了测定。结果表明,青稞幼苗提取物中含有13种氨基酸,总含量为81.6mg/g,其中有人体自身不能合成的6种重要氨基酸[赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、苏氨酸(Thr)和缬氨酸(Val)],含量达41.8mg/g,占总氨基酸的51.2%。该方法灵敏、可靠、重现性好,是一种理想的全谱氨基酸分析方法。

氨基酸衍生物的非水毛细管电泳分离研究

采用新型荧光衍生试剂2-[2-(7H-二苯并[a,g]咔唑)-乙氧基]-乙基氯甲酸酯(DBCEC-Cl)作为柱前衍生试剂,在非水毛细管电泳模式下实现了15种氨基酸衍生物的基线分离。实验采用毛细管(总长58.5 cm,有效长度50 cm,内径50μm),甲酰胺为溶剂,乙酸铵-乙酸为缓冲体系,290 nm二极管阵列进行检测。探讨了乙酸铵、乙酸的浓度,电压,柱温对氨基酸衍生物分离的影响。结果表明:在乙酸铵浓度70 mmol/L,乙酸浓度0.65 mol/L,分离电压30 kV,柱温18℃,进样8 s的最优条件下,氨基酸衍生物得到了基线分离。