Rap1 gAP蛋白表达与卵巢癌之间的关系

目的探讨Rap1 gAP蛋白在卵巢组织中的表达与卵巢良恶性肿瘤之间的关系。方法使用免疫组化方法检测20例卵巢癌与10例卵巢良性组织以及10例正常卵巢组织中Rap1 gAP蛋白表达情况.结果正常卵巢组的Rap1 gAP蛋白表达阳性率为50%、弱阳性率为40%;良性肿瘤组分别为30%和20%;Ⅰ-Ⅱ期卵巢癌组阳性率和弱阳性率均为20%;Ⅲ-Ⅳ期卵巢组分别为10%和20%。结论卵巢癌患者Rap1 gAP蛋白表达下调或缺失率高于正常卵巢组织;Rap1 gAP蛋白表达下调或缺失可能与卵巢癌发病呈正相关。

RaplGAP蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及其甲基化水平

应用免疫组织化学方法，检测RaplGAP蛋白在甲状腺乳头状癌肿瘤组织及其癌旁组织中的表达情况，并运用甲基化特异性PCR方法进行RaplGAP基因启动子区甲基化水平检测。结果显示，在69例检测样本中，有54例（78％）甲状腺乳头状癌患者的肿瘤组织RaplGAP蛋白表达较癌旁组织下调；RaplGAP蛋白的下调与患者的美国癌症联合委员会（AJCC）分期T值密切相关（P=0．043）。甲基化分析发现，54例RaplGAP表达下调的甲状腺乳头状癌中46例出现甲基化（66．7％），15例表达水平无明显变化的甲状腺乳头状癌中1例出现甲基化（6．67％），二者对比差异有统计学意义（P〈0．01）；同时69例癌旁正常组织未检测到甲基化。提示基因启动子区的甲基化改变可能是RaplGAP蛋白表达下调的重要机制之一。

宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变关系的研究

目的研究宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变的关系。方法以我院收治的70例宫颈癌患者为观察组,另选正常宫颈组织70例为对照组。分别对两组对象的宫颈组织进行DNA提取、总RNA提取、cDNA合成、PCR反应扩增。并检测HPV感染、Rap1GAP基因外显子E11和E19缺失率、Rap1GAP mRNA表达及Rap1GAP蛋白表达情况。结果观察组患者HPV感染明显高于对照组(P<0.05)。观察组HPV阳性和阴性组E11和E19的缺失率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Rap1GAP mRNA、Rap1GAP蛋白在观察组HPV阳性组组织中的表达率、阳性表达率明显低于HPV阴性组(P<0.05)。宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关(r=0.578),与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关(r=0.554)。结论宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关,与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关。

针刺对鼠部分背根切断模型的背根神经节和脊髓背角内生长相关蛋白GAP43表达的影响

制备大鼠备用根模型 （切断单侧腰骶背根Ｌ２， ３， ４， ６， 及Ｓ１， ２， 保留Ｌ５ 背根）， 用免疫组织化学和原位杂交方法研究生长相关蛋白ＧＡＰ４３ 在相应节段背根神经节和脊髓背角表达的变化及针刺对其表达的影响。结果发现， 切断一侧Ｌ２， ３， ４， ６， 及Ｓ１， ２ 背根后， 它们对应的背根神经节内ＧＡＰ４３ 表达与正常对照组和假手术组相比无显著性差别， 而备用根神经节Ｌ５ 的ＧＡＰ４３ 表达较正常对照组和假手术组明显增强； 手术侧Ｌ５ 水平脊髓背角与正常对照组相比ＧＡＰ４３ 阳性信号加强。针刺后可促进手术侧Ｌ５ 神经节内ＧＡＰ４３ 表达增加； Ｌ５ 水平脊髓背角ＧＡＰ４３ 阳性信号也进一步加强这表明在一定条件下， 神经系统损伤可诱发中枢神经系统ＧＡＰ４３ 介导的可塑性变化， 针刺可通过ＧＡＰ４３ 对神经的可塑性起调节作用。

血清NSE、Hcy及GAP-43水平与老年缺血性脑卒中的相关性

目的探讨血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、同型半胱氨酸(Hcy)及神经生长相关蛋白(GAP)-43水平与老年缺血性脑卒中发生发展的相关性。方法选取老年缺血性脑卒中患者282例为观察组,同期体检中心健康老年人100例为对照组。通过美国国立卫生院脑卒中量表(NIHSS),将观察组分为轻度脑卒中、中度脑卒中和重度脑卒中组;通过磁共振成像(MRI)显示的脑梗死面积,将观察组分为大梗死灶、中梗死灶和小梗死灶组;评估对照组与观察组、不同NIHSS评分分组、不同梗死面积分组及不同随访时间分组血清中NSE、Hcy及GAP-43的水平。通过改良Rankin量表(mRS)和Barthel指数(BI)量表,评估血清中NSE、Hcy及GAP-43的水平与随访1、3、6个月预后功能相关性。结果与对照组比较,观察组NSE、Hcy及GAP-43的水平明显升高,且随病情严重程度增加、梗死面积增大逐渐升高,随时间的延长逐渐降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在3个月时,改良mRS评分与NSE水平呈显著正相关,BI评分与Hcy、GAP-43水平呈显著负相关(P<0.05);在6个月时,改良mRS评分与血清中NSE、Hcy及GAP-43的水平均呈显著正相关,BI评分与血清中NSE、Hcy及GAP-43的水平均呈显著负相关(P<0.05)。结论老年缺血性脑卒中患者血清中NSE、Hcy及GAP-43的水平与病情的发生发展有重要的相关性,可指导早期干预治疗和作为评估预后的重要依据。

抗伯氏疟原虫GAP40蛋白免疫血清对动合子发育抑制作用的研究

为探讨伯氏疟原虫滑动体相关蛋白40(P.berghei glideosome-associated protein 40,PbGAP40)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性,PCR扩增GAP40^(329-458 aa)编码基因并克隆入pET32a(+)载体,IPTG诱导PbGAP40重组蛋白(rPbGAP40)表达,纯化后免疫BALB/c小鼠。采集抗-PbGAP40免疫血清,通过ELISA和Western blot方法检测抗-PbGAP40免疫血清抗体滴度和特异性,IFA检测PbGAP40蛋白在伯氏疟原虫动合子期定位情况,体外实验检测抗-PbGAP40免疫血清对动合子期原虫发育的抑制效果。结果显示,成功表达rPbGAP40,抗-PbGAP40免疫血清抗体滴度为1∶51200;PbGAP40在合子、retort和成熟动合子表面表达。与对照组相比,抗-PbGAP40免疫血清处理组动合子生成数目下降36.5%(P<0.05),动合子转化率下降8.5%(P<0.05)。体外培养24 h后,抗-PbGAP40免疫血清处理组中61.2%的疟原虫停留在"retort"发育阶段。结果表明,PbGAP40可作为传播阻断疫苗的候选抗原。

电针刺激对脊髓损伤大鼠植入脐血干细胞后生长相关蛋白、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子表达的影响

目的探讨不同电针刺激方案对大鼠脊髓损伤植入脐血干细胞后生长相关蛋白(GAP-43)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子(IGF)表达的影响。方法将192只清洁级SD大鼠用NYU打击器制成T10-11段脊髓损伤模型,造模成功后随机分为:A组为运动区头皮表面投影区电刺激组(A1组电刺激+脐血干细胞移植,A2组只进行电刺激);B组为损伤局部电刺激组(B1组电刺激+脐血干细胞移植,B2组只进行电刺激);C组为运动区头皮表面投影区电刺激+局部电刺激组(C1组电刺激+脐血干细胞移植,C2组只进行电刺激);D组为损伤模型组(D1组移植脐血干细胞不进行电刺激,D2组不移植不进行电刺激)。各组分别于1周、2周、3周、4周、8周、12周取材,采用免疫组织化学荧光染色检测生长相关蛋白(GAP-43)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、胰岛素样生长因子(IGF)的阳性表达。结果在各时间点上,电刺激均能提高生长活性物质GAP-43、bFGF、IGF水平;头针加体针的影响大于单纯头针或体针;干细胞移植后水平更高。结论电刺激与干细胞移植对脊髓损伤后微环境均有有利影响,并有协同作用;头针加体针优于单纯头针或体针。

大脑皮层发育不良鼠脑皮层和海马中的突触生长相关蛋白表达

目的：探寻皮层发育不良（diffuse cortical dysplasias，DCD）大鼠大脑半球、海马的突触生长相关蛋白（growth-associated protein 43, GAP-43）免疫组化病理学特点，探讨DCD所致难治性癫癎（Intractable epilepsy，IE）的皮层发生机制。方法：建立X-射线照射诱导的皮质下异位结节大鼠DCD模型，采用SP免疫组织化学方法检测GAP-43，在大鼠脑皮质下异位结节和海马中的表达，光镜观察并在Gundersen测试系统下计数，图文分析，SPSS18．0软件统计。结果：与正常对照组或母鼠组白质比较，皮质下异位结节内GAP-43免疫阳性产物数密度增加10倍（P〈0．05）。同龄DCD鼠脑皮质Ⅰ-Ⅲ层异位结节、皮质下异位结节和CAI异位结节中GAP-43数密度比较无变化。GAP-43数密度仅在CA3区多形层增加，提示苔藓纤维发芽（mossy fibers sprouting，MFS）。结论：DCD鼠脑GAP-43的分布变化也可佐证海马MFS，提示海马兴奋性神经网络的形成及导致癫癎发生的蛋白质表达异常。

重复经颅磁刺激对脊髓运动功能恢复的影响及其机制的实验研究

目的观察重复经颅磁刺激(rTMS)对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的影响,并对其作用机制进行初步探索。方法利用重物撞击法制作成年大鼠T10脊髓损伤模型,实验组给予经皮0.5Hz大脑皮质区磁刺激,每天500个脉冲,共4周。通过运动行为学BBB评分,组织学及免疫组化荧光法观察生长相关蛋白43(GAP43)和5-羟色胺(5-HT)在脊髓损伤区的变化情况。结果实验组BBB评分明显高于模型组(P<0.01);组织学表现符合慢性不完全性脊髓损伤病理变化;实验组GAP43及5-HT水平明显高于模型组(P<0.01);且损伤头端增加明显著高于尾端(P<0.01)。结论rTMS有促进脊髓损伤大鼠运动功能恢复的作用,机制可能与促进轴突生长锥可塑性及残存下行5-HT能纤维神经递质分泌增加有关。

临床喉鳞癌组织标本中G3BP和CD44v6的检测及意义

目的研究RNA结合的Ras-GAP酶激活蛋白SH3结合蛋白(G3BP)、肿瘤干细胞标志物CD44v6蛋白与喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)发生发展的关系,探讨G3BP、CD44v6蛋白与血管新生的相关性。方法收集56例喉鳞癌患者癌组织及对应癌旁组织,采用Western blot法检测喉鳞癌患者癌组织及对应癌旁组织中G3BP、CD44v6蛋白水平,使用免疫组织化学染色法分别检测G3BP、CD44v6、血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达,并分析G3BP、CD44v6表达与喉鳞癌患者临床病理特征的关系及与VEGF-A表达的相关性;采用Ⅷ因子相关抗原(FⅧAg)免疫组织化学染色确定微血管密度(MVD),观察G3BP、CD44v6表达与MVD之间的关系。结果喉鳞癌患者癌组织中G3BP蛋白、CD44v6蛋白水平均明显高于对应癌旁的正常组织。喉鳞癌患者癌组织中的G3BP、CD44v6、VEGF-A表达阳性率分别为58.9%、53.6%、46.4%,均明显高于对应的癌旁正常组织。喉鳞癌患者癌组织中G3BP、CD44v6蛋白表达阳性率与临床分期、复发或转移及淋巴结转移相关,但与年龄和肿瘤大小无关。经Pearson相关性分析,喉鳞癌患者癌组织中G3BP、CD44v6蛋白的表达与VEGF-A表达呈正相关(r=0.741,r=0.756);喉鳞癌患者癌组织中G3BP与CD44v6蛋白阳性表达病例的MVD值均明显高于癌旁正常组织中MVD值;癌组织中G3BP与CD44v6蛋白阴性表达病例MVD值与癌旁正常组织中MVD值比较无明显差异。结论喉鳞癌组织G3BP、CD44v6蛋白高表达,可能通过促进VEGF-A的表达来诱发肿瘤微血管的新生,促进喉鳞癌侵袭、转移。

生长相关蛋白-43在膀胱过度活动症患者膀胱表达的研究

目的研究生长相关蛋白-43(GAP-43)在膀胱过度活动症(OAB)患者膀胱表达及意义。方法应用免疫组织化学法和W estern b lot方法检测32例膀胱过度活动症患者膀胱组织及10例正常膀胱组织和10例其它原因所致尿频患者膀胱组织中GAP-43的表达,32例OAB患者中,13例为特发性逼尿肌不稳定(ID I),19例为特发性感觉急迫(SU)。结果膀胱过度活动症患者膀胱组织GAP-43阳性神经纤维的密度,较对照组膀胱组织高,二者间差异有统计学意义(P<0.05)。W estern b lotting结果显示,在NC膜上43 kDa处均有阳性的反应条带,正常膀胱和其他原因尿频膀胱反应带微弱;而OAB组中,ID I、SU组反应条带明显加深,蛋白平均积分光密度为0.6182±0.0891,0.5413±0.0823,二者间差异无统计学意义(P>0.05),而正常膀胱组为0.1828±0.0249,其它原因所致尿频为0.1957±0.0334,二者间差异无统计学意义(P>0.05)。OAB组与对照组间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论GAP-43阳性神经纤维的密度增加,表明神经的再生和重新分布与OAB有关;GAP-43在OAB膀胱中的表达量增多,提示神经的发芽生长和再建重塑与膀胱过度活动症有关,可能参与OAB的发病机制。

藏红花提取液对兔慢性高眼压模型中视网膜相关生长蛋白表达的影响

青光眼患者由于慢性高眼压引起眼部血液循环异常、视神经轴浆流受阻，加之谷氨酸浓度的升高，反应性胶质细胞的活化及一氧化氮的毒性作用，导致视网膜神经节细胞（RGC）凋亡和视神经的损伤，最终导致失明。生长相关蛋白（GAP43）是神经系统的一种特殊蛋白，被认为是神经元发育和再生的一个内在决定因子，在正常动物视网膜中也有少量表达。藏红花为鸢尾科植物番红花的干燥柱头，具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神等功效，研究发现其有改善循环、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等作用，但藏红花对慢性高眼压时视网膜内GAP一43的表达有无调制作用尚未见报道。本研究通过建立慢性高眼压模型，观察高眼压模型组及藏红花治疗组中不同时间段视网膜内GAP一43的表达变化，探讨藏红花提取液对青光眼视神经保护性治疗作用的可能机制。

人参总皂苷对PC12细胞突起生长及GAP-43表达的影响

目的探讨人参总皂苷(Total saponin of panax ginseng,TSPG)对神经细胞PC12突起生长以及生长相关蛋白-43(Growth-associated protein-43,GAP-43)表达的影响。方法以0、10、20、40、80 mg/L TSPG作用于体外培养的PC12细胞,相差显微镜观察细胞的形态学改变,透射电镜观察细胞突触连接情况,显微镜测微尺测量突起长度,免疫组织化学和Western blot法检测GAP-43的表达。结果与对照组相比,TSPG处理组分化的PC12细胞直径明显增大,突起长度明显增长,并形成突触连接,GAP-43表达水平增加,以40 mg/L组最为明显。结论 TSPG可诱导PC12细胞发生分化、突起生长延伸,并可上调GAP-43的表达水平。

喉鳞癌组织中G3BP及CD44v6蛋白表达与血管新生相关性研究

目的探讨喉鳞癌组织中GAP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白(G3BP)、CD44v6蛋白表达与血管新生的相关性。方法选取自2013年3月至2017年12月收治的喉鳞癌患者79例为研究对象。分别采集所有患者的喉鳞癌组织与癌旁正常组织,以免疫组织化学染色法对不同组织中的G3BP、CD44v6蛋白表达情况进行检测。采用免疫组织化学染色法明确微血管密度(MVD),分析喉鳞癌组织中G3BP、CD44v6蛋白表达情况与MVD的关系。结果喉鳞癌组织中G3BP、CD44v6蛋白阳性率均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P <0. 05)。喉鳞癌G3BP蛋白阳性患者组织中MVD为(59. 32±3. 11),高于G3BP蛋白阴性患者的(36. 06±1. 56),组间比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。喉鳞癌CD44v6蛋白阳性患者组织中MVD为(57. 79±2. 70),高于CD44v6蛋白阴性患者的(33. 98±2. 01),组间比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。Spearman相关性分析显示,喉鳞癌组织中G3BP、CD44v6蛋白表达水平与MVD呈正相关(r值分为0. 626、0. 618,P <0. 05)。结论喉鳞癌组织中G3BP、CD44v6蛋白均存在明显高表达,且与血管新生存在密切相关关系,可能具有促进肿瘤血管新生的作用。

干扰HIV形成的小分子

HIV-1是艾滋病病毒（HIV）感染细胞所释放的一种不成熟，无感染性的病毒颗粒，包裹在由Gap蛋白所组成的蛋白质壳体中。Gap蛋白要分裂成更小的蛋白质才能形成感染性病毒粒子。并且，其中一种壳体蛋白必须与其他壳体蛋白相互作用才能形成感染性病毒。