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题名伪狂犬病病毒gG基因缺失通用转移载体的构建
被引量:8
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作者
方六荣
陈焕春
肖少波
王革非
马相如
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机构
华中农业大学畜牧兽医学院
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出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期306-309,共4页
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基金
国家重点科技项目 (攻关计划 ) ( 96 C0 1 0 4 0 3)
国家自然科学基金 ( 39970 5 5 9)资助项目
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文摘
对克隆有伪狂犬病病毒Ea株基因组DNASphI 15kb片段的质粒pBSA用SphI和KpnI消化 ,将含gG全基因及其上游PK基因、下游gD基因部分编码区约 2 .6kb的片段亚克隆到消除了EcoRI位点的载体pUC19中 ,获得重组质粒pUSK(E)。以pEGFP N1为模板 ,通过PCR扩增约 0 .3kb的SV40Poly(A)片段 ,并将其克隆到杆状病毒转座载体pFastBac1的NotI和PstI位点 ,利用pFastBac1的BamHI和PstI将含有 9个酶切位点以及SV40Poly(A)的片段亚克隆到pUSK(E)的相应位点 ,在插入的同时导致gG基因 5’端编码区约 40 0bp的缺失 ,构建了由gG启动子驱动gG部分编码区缺失的通用转移载体pgG Uni。序列分析进一步证实 :有 7个单一酶切位点可供外源基因直接插入。
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关键词
伪狂犬病病毒
gg基因
gg启动子
通用转移载体
克隆
序列分析
真核表达系统
多价基因工程疫苗
疱疹病毒科
分子生物学
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Keywords
pseudorabies virus(PRV), gg gene, gg promoter,universal transfer vector
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分类号
S852.659.1
[农业科学—基础兽医学]
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