牛病毒性腹泻病毒gP48基因pET32a原核表达载体的构建

为了研究牛病毒性腹泻病毒gP48基因在大肠杆菌中的原核表达,试验以pMD18-T-gP48质粒为模板,经PCR扩增gP48基因的编码序列,克隆入原核表达载体pET32a,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行双酶切鉴定,诱导表达重组蛋白并进行SDS-PAGE电泳以及Western-blot鉴定。结果表明:重组质粒gP48-pET32a经PCR及酶切测序鉴定,质粒构建正确;重组质粒经诱导表达后,可表达出分子质量约为46 ku的蛋白。