水稻条斑病菌gacA基因的克隆及功能初析

根据黄单胞菌gacA基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)中克隆了gacA同源基因,命名为gacAXooc。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。通过同源重组的方法,构建了gacAXooc的插入突变株。对0.1% Tryptone的趋化应答能力检测发现,gacA突变株的趋化能力明显降低,证明gacA与Xooc的趋化性相关。

水稻白叶枯病菌gacA基因的克隆、测序及敲除研究

根据黄单胞菌gacA基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻白叶枯病菌(Xanthom onas oryzaepv.oryzae,Xoo)中克隆了gacA同源基因,命名为gacAXoo。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。蛋白质保守结构域搜索表明,GacAXoo属于LuxR家庭的一员,具有与其他GacA蛋白相似的结构。通过同源重组的方法,构建了gacAXoo的插入突变体,为下一步研究gacAXoo的功能奠定了良好的基础。

调控基因gacA在荧光假单胞菌2P24防治土传病害中的作用

Pseudomonasfluorescens 2 P2 4分离自山东小麦全蚀病自然衰退土壤 ,该菌株能产生抗生素 2 ,4-二乙酰基藤黄酚 ( 2 ,4-diacetylphloroglucinol,2 ,4-DAPG)、氢氰酸 ,嗜铁素和蛋白酶 ,且抑菌谱广 ,可防治多种作物土传病害。本研究应用 Tn5转座突变技术 ,获得 1株产嗜铁素过量 ,同时不产生 2 ,4-DAPG、HCN、蛋白酶、不能形成生物膜 ( biofilm)的突变菌株PM3 3 90 ,其表现型与调控基因 gac A的突变体表型相似。通过 PCR介导的文库筛选方法 ,从 2 P2 4基因组文库中获得 2个含有 gac A基因的阳性克隆 ,进一步亚克隆 ,得到只含有完整 gac A开放阅读框的 1 .2 kb片段 ,互补实验表明其能恢复突变菌株的多种缺失表型。生测结果表明 ,gac A- 突变菌株与野生型 2 P2 4相比 ,对不同土传病害的生防效果均显著降低。以上结果证实 gac A在 2 P2 4中具有整体水平的调控功能 ,并在 2 P2 4防治土传病害中起到重要的作用。