HIV-1 gagpol重组腺病毒疫苗的构建及其免疫原性的研究

目的:构建HIV-1重组腺病毒疫苗并初步鉴定其免疫原性。方法:用Adeno-X Expression System试剂盒将HIV-1 gagpol基因片段插入到腺病毒载体上,通过脂质体介导将获得的重组腺病毒质粒Adeno-X-gagpol转染至293细胞,使之自主包装成有感染活性的重组腺病毒rAd-gagpol,用western-blotting法鉴定其表达情况;用CsCl密度梯度离心法纯化该重组腺病毒,以5×108pfu/mL的滴度1 mL单次免疫小鼠,15天后测小鼠体液免疫效果。结果:克隆序列与设计相符,重组腺病毒疫苗能稳定表达gagpol蛋白,体液免疫中检测出抗p55和p24的特异性抗体。结论:HIV-1 gagpol重组腺病毒构建成功,具有一定的体液免疫原性。