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题名鸡β-防御-素8 cDNA在大肠杆菌中的融合表达
被引量:2
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作者
杨涛
钟瑾
涂健
彭开松
祁克宗
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机构
安徽农业大学动物科技学院
中国科学院微生物研究所
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出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第11期1018-1022,共5页
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基金
国家"十一五"高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10Z320)
国家自然科学基金项目(30800811
+1 种基金
30871851)
高等学校省级优秀青年人才基金项目(2009SQRZ036)
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文摘
为了评价鸡β-防御素的功能与基因工程化生产的可能性,从已构建的重组载体pGEM-T Easy-gal-8中克隆gal-8成熟肽cDNA,将该cDNA插入原核表达载体pGEX-6P-1中,构建表达质粒pGEX-6P-1-gal-8,然后将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。挑取阳性克隆菌用IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果检测显示,融合表达的GST-gal-8蛋白大小约30 ku,经灰度扫描显示该融合蛋白的表达量占细菌总蛋白的119 mg/L。用固定化的谷胱甘肽亲和层析柱进行蛋白纯化,融合蛋白经Prescission蛋白酶酶切并纯化获得了完整的gal-8成熟多肽。抑菌活性试验显示,表达的gal-8成熟肽对黄色微球菌有一定的抑菌活性。
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关键词
β-防御素-8
融合表达
Prescission蛋白酶
gal-8成熟肽
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Keywords
gal-8 fusion expression Prescission protease gal-8 mature peptide
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分类号
S963.732
[农业科学—水产养殖]
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