高效液相色谱法测定赶黄草中没食子酸在不同冲泡条件下的溶出量

本文建立测定赶黄草中没食子酸含量的高效液相色谱法,评估赶黄草中没食子酸在不同冲泡条件下的溶出量。用25℃、80℃和90℃超纯水分别冲泡赶黄草的叶、茎和花5~60 min,然后测定溶出的没食子酸含量。没食子酸在0.005~10μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9998),加标回收率为93.2%~98.2%,相对标准偏差为2.27%~7.05%。赶黄草的叶、茎和花中没食子酸冲泡后的溶出量分别为91~2478 ug·g^(-1),118~616ug·g^(-1)和116~787 ug·g^(-1)。所建高效液相色谱法操作简单,准确度高,重复性好,可用于赶黄草中没食子酸含量测定及产品质量监控。赶黄草的叶、茎和花分别经超纯水在80℃冲泡60 min、90℃冲泡20 min和90℃冲泡60 min后溶出的没食子酸含量最高。

RP-HPLC测定不同厂家六味地黄浓缩丸中的没食子酸

目的测定六味地黄浓缩丸中的没食子酸,并比较不同厂家产品中没食子酸的含量。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Alltima C18柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱,流速为0.5ml·min-1,检测波长为242nm,进样量5μl,时间为30min,柱温为30℃。结果没食子酸线性回归方程为:Y=7.526×103X-47.308(r=0.9994),线性范围0.103～1.648μg;平均加样回收率为98.96%(RSD=1.16%)。结论所建方法简便、准确、稳定、可靠,可评价不同厂家的六味地黄浓缩丸。

余甘子叶化学成分没食子酸诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡机制的研究

目的:探讨余甘子叶化学成分没食子酸诱导人肝癌细胞株BEL-7404产生凋亡的机制。方法:采用PI和Hoechst33342双染色法流式检测对人肝癌细胞株BEL-7404各周期的影响;细胞荧光免疫染色法和Western blot法检测Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。结果:PI和Hoechst33342双染色法分析结果表明,余甘子叶化学成分没食子酸作用BEL-7404细胞72 h后,G2/M期细胞数增多,呈现细胞阻滞现象,并伴有大量的细胞凋亡。荧光免疫染色显示,药物作用人肝癌细胞株BEL-7404 72 h后Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达则降低。Western blot法实验亦显示Bax蛋白表达升高。结论:余甘子叶化学成分没食子酸能阻滞G2/M期细胞,并通过上调Bax和下调Bcl-2蛋白表达,导致线粒体膜电位的下降,进而激活Caspase,最终导致细胞死亡,可能是其诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡的分子机制之一。

薄层色谱法鉴别紫地合剂及四种止血方剂中的地稔

目的建立紫地合剂中地稔药材的薄层色谱鉴别方法,制定紫地合剂的质量标准之一——鉴别项。方法采用薄层色谱法对紫地合剂中的主要成分地稔进行鉴别,并以同是止血经典方的十灰散、小蓟饮子、咳血方、黄土汤四个方剂为辅助鉴别,检验方法的普遍性。结果本文所建立的方法稳定、可靠,无干扰,可作为该制剂的质量控制方法之一。该方法对于鉴别复方制剂中的地稔具有普遍意义。

檀香对广枣中原儿茶酸和没食子酸的药代动力学影响

目的建立大鼠体内的没食子酸和原儿茶酸的反相高效液相色谱分析方法,研究檀香对广枣中没食子酸、原儿茶酸在大鼠体内药代动力学的影响。方法给SD大鼠灌服广枣水提液和广枣-檀香水提液,采用反相高效液相色谱法测定大鼠给药后不同时间血浆中原儿茶酸和没食子酸的浓度,DAS2.0药动学软件拟合房室模型,计算药动学参数。结果广枣水提液组没食子酸的主要药动学参数Cmax为(0.112±0.008)mg·L-1,CL/F(0.132±0.016)L·min-1·kg-1;Tmax(45.0±0)min,t1/2β(69.3±0)min;原儿茶酸的主要药动学参数Cmax为(0.550±0.028)mg·L-1,Tmax(52.0±0)min,CL/F(0.078±0.011)L·min-1·kg-1,t1/2β(60.7±1.1)min。广枣-檀香水提液组没食子酸的主要药动学参数Cmax为(0.187±0.010)mg·L-1,CL/F(0.094±0.017)L·min-1·kg-1,Tmax(30.0±0)min,t1/2β(69.3±3.3)min;原儿茶酸的主要药动学参数Cmax为(1.080±0.066)mg·L-1,Tmax(45.0±0)min,T1/2β(69.3±0.2)min,CL/F(0.011±0.001)L·min-1·kg-1。结论广枣-檀香水提液组没食子酸和原儿茶酸的达峰时间提前,清除率降低,半衰期延长,提示檀香可促进广枣中酚酸类物质吸收,延缓其消除。

高效液相色谱法测定利水通淋软胶囊中没食子酸含量

目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定利水通淋软胶囊中没食子酸的含量。方法色谱柱为Phenomenex C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为水-N,N-二甲基甲酰胺-甲醇(85∶13∶2,用冰醋酸调pH至3.5),检测波长272nm。结果没食子酸进样量在0.22～1.02μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999(n=5),平均回收率为97.36%,RSD=0.30%(n=6)。结论所用方法准确、快捷,可用于利水通淋软胶囊中没食子酸的含量测定。

方药配伍对白芍中没食子酸溶出率的影响

目的建立UPLC方法测定白芍不同配伍煎液中没食子酸含量,研究配伍对没食子酸溶出率的影响。方法采用Waters Acquity UPLC BEHC18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈-0.5%醋酸为流动相(2∶98,V/V);流速:0.3ml/min;柱温:40℃;检测波长271 nm;进样量:3μl,分析白芍不同配伍煎液中没食子酸含量。结果 UPLC方法快速、灵敏、准确,可靠,重复性好。白芍不同配伍煎液中没食子酸含量大小为:四逆散>芍药甘草汤>白芍单煎液,结果有显著性差异(P<0.01)。结论 方药配伍对其白芍的活性成分没食子酸的溶出率有显著影响。

紫地合剂的薄层鉴别研究

目的建立紫地合剂的薄层鉴别方法。方法优化展开剂、显色剂、点样量等色谱条件,考察薄层板、温度与湿度等因素,建立紫地合剂的薄层色谱鉴别方法。结果最佳方法为:以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(3∶2∶1)为展开剂,1%三氯化铁乙醇溶液为显色剂,点样量为供试品溶液4μL、对照品溶液2μL;该方法对不同薄层板、温度及湿度的适应性良好。结论方法操作简便、专属性强、耐用性好,可用于该制剂的质量控制。

HPLC法测定维吾尔药理血奇朗糖浆中没食子酸的含量

目的:建立高效液相色谱法测定维吾尔药理血奇朗糖浆中没食子酸的含量测定方法。方法:采用色谱柱为VP-ODS(4.6mm×250mm,5μm);流动相为0.4%磷酸:乙腈(97:3);流速1 mL·min-1;检测波长270nm;柱温;40℃。结果:没食子酸进样量在0.0506μg～0.4060μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为100.95%,RSD=3.9%。理血奇朗糖浆中没食子酸的平均含量为0.83 mg·mL-1。结论:本方法简便、准确,可用于理血奇朗糖浆的质量控制。

HPLC法测定痔速宁片中芦丁与没食子酸的含量

目的建立HPLC法测定痔速宁片中芦丁与没食子酸含量的方法。方法采用Thermo Acclaim TM 120C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.4mL·L^(-1)磷酸溶液,梯度洗脱;流速为1.0mL·min^(-1);检测波长为257和273nm;进样量5μL;柱温35℃。结果芦丁与没食子酸的线性范围分别为10.54~105.4μg·mL^(-1)(r=0.999 9,n=6)和51.075~510.75μg·mL^(-1)(r=0.999 9,n=6);提取回收率分别为99.2%(RSD=0.7%,n=6)和99.4%(RSD=0.9%,n=6)。结论该方法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制。

大鼠血浆中儿茶素主要代谢产物没食子酸含量测定

目的建立大鼠血浆中儿茶素主要代谢产物没食子酸含量检测方法。方法采用改进的高效液相色谱法测定对大鼠口灌儿茶素后血浆中没食子酸含量,色谱柱为大连依利特BDS C18（250×4.6mm）色谱柱,流动相为乙腈∶0.1%柠檬酸水溶液=5∶95;柱温30℃,波长280nm,以茶碱作为内标。结果改进的HPLC方法测定儿茶素体内代谢产物没食子酸在0.01~20.0mg.L-1范围内线性关系良好（r〉0.999）,平均回收率85%以上,精密度10%以下。大鼠口灌儿茶素后血浆中检测到代谢产物没食子酸。结论本研究建立一种灵敏、准确、可靠的RP-HPLC儿茶素代谢产物没食子酸的定量检测方法,并将其应用于大鼠体内的儿茶素代谢研究。

HPLC测定不同部位烟叶中没食子酸的含量

建立了高效液相色谱（HPLC）测定烟叶中没食子酸含量的方法。以超纯水为萃取剂,样品经超声提取后,采用C18色谱柱分离/二极管阵列检测器测定。结果表明：没食子酸在0.5-50.0 mg/L范围内的线性相关系数为0.9999,检出限为1.07μg/g,加标回收率为92.7%-101.6%,RSD〈5%（n=5）。9个烟叶样品没食子酸含量在107.0-242.8μg/g之间;不同部位烟叶没食子酸含量排序为：上部烟叶〉中部烟叶〉下部烟叶。

HPLC法测定桂枝芍药知母汤中5种有效成分

目的 建立HPLC法同时测定桂枝芍药知母汤中没食子酸、芒果苷、芍药苷、苯甲酸和肉桂酸的量.方法 采用Zorbax Extend-C18（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长为230nm,柱温为25℃.结果 没食子酸、芒果苷、芍药苷、苯甲酸和肉桂酸进样量分别在0.052～0.52 （r=0.999 8）、0.078～0.78 （r=0.999 8）、0.336～3.36 （r=0.999 9）、0.029 6～0.296 （r=0.999 8）、0.020 6～0.206 （r=0.999 9） μg线性关系良好；平均回收率（RSD）分别为99.73％ （1.63％）、99.33％ （1.02％）、100.2％ （1.79％）、98.96％ （1.02％）和99.64％ （1.62％）.结论 本方法简便、可靠、重复性好,为桂枝芍药知母汤物质基础研究提供了依据.

没食子酸抑菌活性分析

目的通过测定没食子酸的体外抑菌活性,为其相关抑菌药物的研制提供科学依据。方法采用纸片扩散法测定没食子酸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、蜡样芽孢杆菌、白色念珠菌的抑制作用及其最小抑菌浓度。结果没食子酸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌抑菌环直径依次为9.00、7.50、8.50、9.45 mm,阳性对照组中青霉素对金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌抑菌环依次为32.00、18.00 mm;头孢他啶对大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌的抑菌环依次为36.00、39.50、37.00 mm;两性霉素对白色念球菌的抑菌环直径为15.00 mm,阳性对照效果良好,表明实验结果比较可靠,没食子酸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌均有较好的抑制作用;经过初次筛选、二次筛选,得到没食子酸对以上4个菌种的最小抑菌浓度分别为1、5、<0.5、10 mg/mL,其中对肠炎沙门菌抑菌效果最好。结论没食子酸对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌均有较好的抑制作用,具有开发相关抑菌药物的价值。

HPLC法同时测定珠子草中没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、鞣花酸和芦丁的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定珠子草中没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、鞣花酸和芦丁5个化学成分的含量,并对方法学进行考察。方法:采用菲罗门Gemini C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0~20 min,3%A→15%A;20~45 min,15%A→28%A;45~55 min,100%A;56~65 min,3%A);流速:1 m L·min-1;柱温:室温;检测波长:254 nm。结果:没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、鞣花酸和芦丁的进样量分别在0.072~1.84μg、0.172~4.32μg、0.124~3.12μg、0.076~1.92μg、0.156~3.97μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。测定珠子草药材粉末5份,没食子酸、短叶苏木酚、柯里拉京、鞣花酸、芦丁平均含量分别为0.21%、0.53%、0.24%、0.41%、0.11%。结论:本方法经方法学验证可用于珠子草多成分质量评价方法。

RP-HPLC研究冰片对广枣中没食子酸在家兔体内的药动学影响

目的研究冰片对广枣中没食子酸药动学的影响。方法采用RP-HPLC测定广枣水提液和广枣-冰片配伍液灌胃后家兔血浆中没食子酸的药-时曲线,DAS2.0药动学软件拟合房室模型,计算药动学参数,比较没食子酸在家兔体内的药动学差异。结果广枣单独给药、广枣-冰片配伍后给药,没食子酸在体内代谢动力学模型均为二室开放模型。配伍后,没食子酸的达峰时间提前,V/F减少,CL/F增大。结论冰片可以促进没食子酸的转运和吸收,体现的了冰片对广枣的增效作用。

HPLC波长切换法同时测定桂枝、白芍药对提取物中8个成分的含量

目的:建立同时测定桂枝、白芍药对提取物中8个成分(没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、香豆素、肉桂酸、苯甲酰芍药苷)含量的高效液相色谱法。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为267 nm(0～13 min,检测没食子酸)、258 nm(13～20 min,检测氧化芍药苷)、230 nm(20～35 min,检测芍药内酯苷、芍药苷)、274 nm(35～47 min,检测1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖)、280 nm(47～61 min,检测香豆素、肉桂酸)、230 nm(61～70 min,检测苯甲酰芍药苷),柱温为30℃。结果:桂枝、白芍药对提取物中8个成分没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、香豆素、肉桂酸、苯甲酰芍药苷进样量分别在0.0936～0.936μg(r=0.9995)、0.005320～0.05320μg(r=0.9991)、0.1365～1.365μg(r=0.9996)、0.1456～1.456μg(r=0.9996)、0.0939～0.939μg(r=0.9997)、0.02678～0.2678μg(r=0.9992)、0.1336～1.336μg(r=0.9993),0.01938～0.1938μg(r=0.9992)与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=5)分别为99.8%、99.2%、99.0%、99.1%、98.3%、100.0%、98.1%、99.9%。结论:该方法准确可靠、重复性好,可用于桂枝、白芍药对提取物的质量控制。

麻黄与老鹳草配伍前后有效成分提出率

目的:考察麻黄与老鹳草配伍前后主要活性成分盐酸麻黄碱和没食子酸提出率的变化,探讨两药配伍使用的增效作用机制。方法:以盐酸麻黄碱和没食子酸为指标,HPLC测定含量,采用正交试验法优选配伍前后提取工艺。结果:麻黄配伍后盐酸麻黄碱的提出率分别为5.136,5.485 mg·g-1,老鹳草配伍前后没食子酸的提出率分别为1.352,1.564 mg·g-1。结论:麻黄和老鹳草配伍前后盐酸麻黄碱、没食子酸提出率均增加,为两药配伍使用增效作用提供依据。

HPLC法同时测定知柏地黄丸中3种主要成分的含量

目的:建立同时测定知柏地黄丸中没食子酸、马钱苷、丹皮酚含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Zorb-ax C18柱,流动相为甲醇(A)-0.2%甲酸水溶液(B)梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1,检测波长为252nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:没食子酸、马钱苷、丹皮酚进样量分别在0.36～5.78(r=0.9998)、0.67～5.39(r=0.9999)、0.60～4.80(r=0.9997)μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为99.67%、99.16%、100.01%,RSD分别为1.26%、1.95%、1.78%(n=9)。结论:该方法准确、灵敏、可靠、重复性好,可用于知柏地黄丸的质量控制。

HPLC同时测定珠子草中没食子酸、短叶苏木酚和鞣花酸的含量

目的建立同时测定珠子草中没食子酸、短叶苏木酚和鞣花酸的HPLC法，并对珠子草该3种成分进行含量测定。方法色谱柱：ShimazuC18（150mm×4．6mm，5μm）；流动相：0．1％磷酸（A）．乙腈（B）梯度洗脱，流速为0．8mL·min^-1；柱温：室温；检测波长：270nm；进样量10此。结果没食子酸、短叶苏木酚和鞣花酸含量分别在0．6~9．6μg、0．525~8．4μg、0．475～7．6μg内与峰面积呈良好的线性关系。没食子酸的平均含量为0．1962％，短叶苏木酚为o．5182％，鞣花酸为0．4110％。结论本方法操作简便，准确度高，可用于珠子草中没食子酸、短叶苏木酚和鞣花酸3种成分含量的测定。