HPLC法测定利咽含漱液中木犀草苷含量及^(60)Co-γ射线辐照对其含量的影响

建立了一种采用HPLC法测定利咽含漱液中木犀草苷含量的方法,并考察不同剂量^(60)Co-γ射线辐照对其含量的影响.用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸(20∶80)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃;检测波长为350 nm,进样量为10μL,用外标法计算含量.研究表明,木犀草苷含量测定方法的专属性良好;浓度在1.8954~47.3858μg·mL^(-1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为Y=31.13X-15.793,相关系数r=0.9997(n=6);平均加样回收率为99.73%(n=6);精密度的RSD值为0.58%(n=6),稳定性的RSD值为1.26%(n=6),重复性的RSD值为0.87%(n=6),耐用性的RSD均小于3%.经^(60)Co-γ射线辐照后利咽含漱液中木犀草苷含量下降,下降幅度与辐照剂量呈正相关.本方法专属性强、准确度高,适用于利咽含漱液中木犀草苷含量测定.利咽含漱液不宜进行^(60)Co-γ射线辐照灭菌.

木犀草苷对阿尔茨海默病模型细胞凋亡和炎性因子表达的研究

目的探究木犀草苷通过下调有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MEKK3)对阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。方法体外培养PC12细胞,经不同剂量(6.25、12.5、25 mg/L)木犀草苷孵育24 h后,建立β淀粉样肽(Aβ)_(25-35)诱导的AD细胞模型;另转染MEKK3小干扰RNA或过表达载体至PC12细胞,经25 mg/L木犀草苷孵育24 h后,建立Aβ_(25-35)诱导的AD细胞模型。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β]水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MEKK3蛋白表达。结果木犀草苷可降低Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞增殖抑制率、凋亡率、炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平,且降低细胞中MEKK3蛋白表达(P<0.05);敲减MEKK3可降低Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞增殖抑制率、凋亡率、炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平,过表达MEKK3呈相反作用;上调MEKK3表达可减弱木犀草苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞增殖抑制率、凋亡率和炎性因子水平的影响。结论木犀草苷可能通过下调MEKK3抑制AD模型细胞凋亡及炎性因子水平,具有治疗AD的潜在价值。

基于信息熵赋权法的正交试验设计优选利咽含漱液提取工艺

优选利咽含漱液提取工艺,建立利咽含漱液水提液中木犀草苷HPLC测定方法,以木犀草苷含量和干膏率为工艺评价指标,应用信息熵赋权法确定指标的客观权重,采用正交试验设计考察溶媒用量、提取时间和提取次数.建立的木犀草苷HPLC测定方法的专属性、线性、精密度、稳定性、重复性均符合规定,优选的提取工艺为:加15倍水,提取2次,每次1 h.表明优选的提取工艺科学、稳定、可行,为利咽含漱液的生产提供参考依据.

吕梁山引种金银花花蕾质量分析

[目的]评估引种到吕梁山的不同品种金银花花蕾质量,选出适合在山西省吕梁山区规模化种植的最优品种。[方法]在吕梁山开展种植试验,并采用随机抽样方法对产自山东平邑、河南封丘、陕西杨陵的4个品种金银花(北花1号、四季金银花、豫纯1号、金花3号)的花蕾大小、千针重量、折干率、色泽等外观质量指标进行测量;同时,采用高效液相色谱法对4个品种金银花花蕾的绿原酸和木犀草苷含量进行测定。[结果]4个品种金银花花蕾长度、直径、千针干重、折干率等指标差异不显著(P>0.05),千针鲜重差异显著(P<0.05),总色差(ΔE)、绿原酸含量、木犀草苷含量差异极显著(P<0.01);在4个引种的金银花中,北花1号的每个花蕾质量指标均优于其他品种。[结论]山西省吕梁山区非常适合种植金银花,尤其是从山东省平邑县引种的北花1号表现出明显的品质优势,可作为吕梁山规模化种植的金银花品种。

HPLC法测定桑叶和金银花中绿原酸及四种黄酮类化合物

目的建立一种同时测定绿原酸和黄酮类成分的含量测定方法,并应用于桑叶和金银花试样,为中药材和天然产物的提取工艺研究、质量分析探索适应性强的新分析方法,并探索更为环保的中药材水分测定方法。方法运用HPLC法,色谱柱为Agilent extend C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸,采用梯度洗脱,325 nm和350 nm双波长检测,柱温30℃,流速1 mL·min^(-1);以色谱级甲醇为提取溶剂,采用超声辅助提取方法制备供试液,随后分别采用常压干燥法和减压干燥法测定了桑叶和金银花试样的水分含量,用于计算试样干品中绿原酸及四种黄酮类化合物的含量。结果绿原酸、木犀草苷、芦丁、槲皮素、木犀草素浓度分别在0.11~53.70μg·mL^(-1)、0.12~58.20μg·mL^(-1)、0.12~58.50μg·mL^(-1)、0.13~63.30μg·mL^(-1)、0.10~50.90μg·mL^(-1)范围内线性良好,相关系数r分别为0.9993、0.9999、0.9999、1.0000、0.9995;供试液和混合对照品溶液在24 h内稳定性良好。结论建立的HPLC梯度洗脱方法准确度高、重现性好、精密度优,可作为桑叶、金银花中绿原酸和黄酮类成分的含量测定方法;此外,桑叶、金银花样品提取方法操作简便、溶液稳定性好。

不同产地金银花及其掺杂叶中活性成分比较研究

目的比较研究三大产地5个品种金银花及其掺杂叶活性成分含量及指纹图谱相似度,为其优质优价采购以及资源综合利用提供参考。方法采集山东大毛花、鸡爪花和四季花、河南豫封一号和河北巨花一号不同茬次的金银花,分离其掺杂叶,测定并比较92份样品中活性成分的含量和HPLC指纹图谱相似度。结果 5个品种金银花活性成分含量均随采收时间呈先降后升趋势,头茬花含量最高,二茬花含量最低;绿原酸含量头茬花大毛花最高,四茬花巨花一号最高,木犀草苷含量不同品种间未体现差异;不同品种金银花HPLC指纹图谱相似度在0.9以上,豫封一号与其它品种相似度相对较低;掺杂叶的绿原酸和木犀草苷含量均高于金银花,HPLC指纹图谱与金银花相似度为0.815~0.892。结论头茬花和四茬花品质较高,头茬花以大毛花质量为优,四茬花以巨花一号质量较佳;掺杂叶不能与金银花混用,但其活性成分含量高于金银花。本研究为金银花品质评价和掺杂叶的开发利用提供了科学依据。

山东10个不同种质金银花中木犀草苷的含量测定

目的：以木犀草苷含量为指标，结合药材产量及绿原酸含量，评价山东产金银花10个不同种质的内在质量。方法：高效液相色谱法。结果：10个不同种质金银花中木犀草苷的含量为0．075％～0．221％。结论：不同种质金银花中木犀草苷的含量存在着较大差异。以木犀草苷含量结合产量及绿原酸含量，筛选出4个优良种质，1个淘汰种质，为金银花优良种质的筛选与评价积累依据。

野菊花提取物的质量标准研究

目的建立野菊花提取物的质量标准。方法以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(7:3:1:1.2)为展开剂,以2%三氯化铝乙醇溶液为显色剂,采用TLC法对野菊花提取物进行鉴别。采用HPLC法,色谱柱为AgilentEclipse,分别以甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸(5:6:89)、甲醇-0.5%冰醋酸(47:53)为流动相,检测波长均为326nm测定绿原酸、咖啡酸和蒙花苷的含量。结果在TLC色谱中检出野菊花提取物中的绿原酸、木犀草苷、蒙花苷。HPLC法中绿原酸、咖啡酸和蒙花苷的线性关系良好,平均回收率分别为101.12%、101.63%和100.37%,RSD分别为3.08%、1.61%、1.97%。结论所建立的方法简便可行,重现性好,可用于野菊花提取物的质量控制。

金银花药材的HPLC指纹图谱及绿原酸、木犀草苷含量的同时测定

【目的】建立金银花药材的 HPLC指纹图谱，并同时测定不同产地商品中绿原酸和木犀草苷的含量，全面评价金银花药材质量。【方法】采用Aglient TC-C18（4.6 mm＆#215;250 mm，5μm）色谱柱。采用梯度洗脱，流动相A为1％HAC，流动相B为乙腈，洗脱程序为：0～5 min，A为95％→92％；5～7 min，A为92％→87％；7～28 min，A为87→85％；28～38 min，A为85→84％；38～43 min，A 为84→82％；43～53 min，A 为82→72％；53～63 min，A 为72→50％；63～65 min，A为50→5％；75 min，A为5％。流速为0.8 mL/min；检测波长250 nm；柱温30℃。指纹图谱共有模式的建立采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A 版”进行处理分析。【结果】在指纹图谱研究中，标定了15个共有峰，建立了对照指纹图谱，10批药材与共有模式之间相似性良好，相似度均在0.9以上；在所建立的分析条件下，绿原酸、木犀草苷均达到了基线分离，且两者在线性范围内线性关系良好，两种成分的加样回收率分别为99.2％、99.4％。【结论】本法灵敏、准确、简便，可用于金银花药材的综合质量评价。

金银花和山银花有效成分测定及比较分析

为了比较金银花与山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量差异．采用Dia—monsil C18色谱柱（4．6mmX250mm，5pm），分别以流动相乙腈-0．5％磷酸（10：90）和检测波长327nm，流动相乙腈一0．5％醋酸梯度洗脱和检测波长348nIn测定绿原酸、木犀草苷，以蒸发光散射检测器和流动相乙腈～0．4％醋酸梯度洗脱检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙．结果发现：绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的线性范围分别为15．28-76．4、10．8～43．2、49-196和54．6-218．4μg／mL．山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙含量分别为0．0513％、6．953％、1．132％、5．59％；金银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙含量分别为2．82％、0．1847％、0．056％．本结果可为有效鉴别金银花和山银花提供依据，同时HPLC方法为全面控制金银花和山银花药材的质量提供了可靠的方法．

一测多评法同时测定菊花中4种活性成分含量

目的:建立一测多评法(QAMS)同步测定菊花中绿原酸、木犀草苷、槲皮素和金合欢素4种成分的含量,并验证该方法在菊花质量评价中的应用价值。方法:采用Shim-pack C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B),梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长348 nm。以绿原酸为内参物,建立其与木犀草苷、槲皮素和金合欢素的相对校正因子,并计算各成分含量,实现一测多评。同时采用外标法验证一测多评法的准确性和可行性。结果:绿原酸与木犀草苷、槲皮素和金合欢素的相对校正因子分别为0.6865、0.9976、0.6665,RSD(n=6)分别为0.1439%、0.2512%、0.3971%;一测多评法与外标法含量测定结果无显著性差异。结论:以绿原酸为内标同时测定木犀草苷、槲皮素和金合欢素的一测多评法可用于菊花的定量分析。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC—ELSD）法测定金银花中绿原酸及木犀草苷的方法。方法采用Chromasil C18色谱柱（4．6mm×250mm／5．0μm）为色谱柱，用乙腈（A）-0．5％冰醋酸（B）为流动相梯度洗脱，以蒸发光散射检测器检测绿原酸和木犀草苷。梯度程序为：0min（A：10％，B：90％）→16min（A：25％，B：75％）→22 min（A：50％，B：50％）；流速1．0ml·min^-1；检测器漂移管温度110℃，载气流速3．0ml·min^-1。结果绿原酸及木犀草苷的回归方程分别为：lgA=1．34lgm＋4．360，r=0．9995；lgA=1．653lgm＋5．327，r=0．9996。线性范围分别为5．0—45μg和0．4—3．6μg；平均回收率分别为99．94％（RSD=1．43％，n=5）和100、85％（RSD=1．78％，n=5）。结论该方法操作简便、结果准确，专属性强，分离效果和重现性好，可有效缩短总分析时间。为较全面控制金银花药材的质量控制提供了简便可靠的方法。

不同产地金银花提取物的指纹图谱及绿原酸、木犀草苷含量测定

通过15批不同产地金银花提取物的指纹图谱研究及其指标成分绿原酸、木犀草苷的含量测定,为合理评价金银花提取物质量提供参考.采用HPLC法建立15批金银花提取物指纹图谱,并采用外标法测定其指标成分绿原酸、木犀草苷的含量,指纹图谱共有模式的建立采用国家药典委员会"中药指纹图谱相似度评价系统软件(2012A)"进行处理分析. 15批金银花提取物指纹图谱中标定共有峰12个,确认9个,相似度高于0.94;15批金银花提取物的提取收率范围为35.60%～47.05%,绿原酸含量范围为3.33%～4.84%;木犀草苷含量范围为0.067%～0.091%.结果表明不同产地金银花提取物的指纹图谱、指标成分含量存在差异,又存在一定程度的相关性,为金银花提取物的评价及合理利用提供实验数据.

RP-HPLC法同时测定不同产地金银花中木犀草苷和6种有机酸

目的建立反相高效液相色谱法测定不同产地金银花中木犀草苷、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸和异绿原酸A、B、C的方法。方法PhenomenexODSC】。色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），以乙腈（A）-0．4％磷酸（B）为流动相，梯度洗脱（0～10rain，5％→9％A；10—30min，9％A；30—60min，9％-30％A；60—80min，30％A），体积流量1．0mL／min，最大吸收波长下检测（木犀草苷在350iqtm，隐绿原酸、绿原酸和新绿原酸在327am，异绿原酸A、B、C在330nm）。结果7种待测成分分离度良好；各成分质量浓度与峰面积在测定范围内均呈良好线性关系（r≥0．9990），木犀草苷、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸和异绿原酸A、B、C的平均回收率（RSD）分别为99．52％（2．56％）、97．93％（2．19％）、96．12％（1．19％）、102．50％（1．63％）、97．57％（1．60％）、97．12％（2．64％）、100．32％（2．89％）。结论该方法简便、准确、重复性好，可用于金银花的质量控制。

慢性咽炎协定处方代茶饮两种制备方法的比较

目的测定两种不同方法制备的慢性咽炎协定处方代茶饮其主要指标含量差异,探索适当的制备条件,为指导患者合理用药提供依据。方法采用单因素考察法比较该处方水煎煮和水泡服两种方法制备的代茶饮水溶性浸出物的情况;采用紫外分光光度法测定两种代茶饮水溶液吸光度的变化;采用高效液相色谱法测定两种代茶饮水溶液中绿原酸和木犀草苷的含量变化;采用微生物限度检查法测定两种代茶饮水溶液的细菌、霉菌、酵母菌和大肠埃希菌染菌情况。结果水泡服代茶饮出膏率21.46%,紫外吸光度在326 nm下为1.052,主要成分绿原酸、木犀草苷含量总和为141.11 mg,微生物检查情况为细菌90 cfu/m L、霉菌<10 cfu/m L、未检出大肠埃希菌;水煎煮代茶饮出膏率28.38%,紫外吸光度在326 nm下为1.162,主要成分绿原酸、木犀草苷含量总和为131.21 mg,微生物检查情况为细菌70 cfu/m L、霉菌<10 cfu/m L,未检出大肠埃希菌。结论水煎煮代茶饮在出膏率和吸光度上占有优势,水泡服代茶饮在主要成分溶出率占有优势,二者均符合微生物限量检查标准。

HPLC法测定清咽含片中的木犀草苷

目的建立清咽含片中木犀草苷含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:Phenomenex lunaC18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.5%冰醋酸(梯度洗脱);流速:1mL.min-1;检测波长:350nm;柱温:25℃。结果木犀草苷在0.0771μg～0.7712μg范围内线性关系良好,r=0.9996;平均回收率为101.35%,RSD=1.58%。结论该方法简便、灵敏、准确,可为木犀草苷在复方制剂中的含量测定提供依据。

HPLC测定灰毡毛忍冬不同部位中绿原酸和木犀草苷的含量

目的:利用HPLC测定灰毡毛忍冬不同部位中绿原酸和木犀草苷的含量。方法:采用Agilent ZORBAX SB-phenyl C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.5%醋酸水溶液进行等度洗脱,检测波长为350 nm,流速为1 mL·min-1,柱温为25℃。结果:灰毡毛忍冬不同部位中绿原酸的含量为花>叶>枝;木犀草苷的含量为叶>花>枝。结论:本法简便、灵敏、重复性好,可用于灰毡毛忍冬不同部位样品中绿原酸和木犀草苷的含量测定。

亳菊和大马牙中绿原酸、黄酮类成分及挥发油含有量的比较

目的 建立HPLC法同时测定亳菊和大马牙中绿原酸、木犀草苷、黄芩苷、槲皮素和金合欢素,为选用药用菊花提供参考。方法 2种菊花以70%甲醇提取,HPLC分析采用Shim-pack C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈（A相）-0.1%磷酸（B相）梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,柱温30℃,检测波长348 nm;按《中国药典》方法测定它们的总挥发油含有量。结果 绿原酸、木犀草苷、黄芩苷、槲皮素和金合欢素分别在0.5~5.0μg、0.11~1.1μg、0.74~7.4μg、0.39~3.9μg、0.28~2.8μg范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为99.3%（RSD=2.0%）、99.3%（RSD=2.0%）、99.7%（RSD=1.9%）、99.1%（RSD=2.0%）、98.0%（RSD=1.8%）。亳菊挥发油提取率为0.52%,大马牙为0.42%。亳菊中的绿原酸、木犀草苷、槲皮素、金合欢素和总挥发油含有量高于大马牙,但大马牙的黄芩苷含有量高于亳菊4倍多。结论 大马牙中绿原酸和木犀草苷含有量未能在线性范围内测得,所以不能代替亳菊入药。

正交试验法优化清开灵注射液中金银花提取液的醇沉工艺

目的:优化金银花提取液的醇沉工艺,规范清开灵注射液中金银花提取液的生产,减少批次间差异。方法:采用正交试验,以绿原酸和木犀草苷的含量为指标,并采用多指标综合评分法处理数据,优化醇沉工艺中加醇时的药液温度、搅拌速度和加醇速度3个因素。结果:金银花提取液的最佳醇沉工艺为加醇时药液温度为20℃,搅拌速度240 rpm,加醇速度1倍生药量/min。结论:优化的醇沉工艺稳定可行。

不同产地金银花中绿原酸及木犀草苷的快速检测

[目的]利用HPLC法同时检测不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷。[方法]采用迪马公司Kromasil-C18色谱柱（250×4.6mm,5μm）,以甲醇-1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为350nm,柱温为室温,流速1ml/min,进样量5μl。[结果]绿原酸浓度在0~1mg/ml内与峰面积呈良好线性关系（r=0.9991）,回收率为98.79%~101.67%,相对标准偏差为1.05%;木犀草苷浓度在0~0.1mg/ml内与峰面积呈良好线性关系（r=0.9987）,回收率为98.06%~101.17%,相对标准偏差为1.17%。[结论]该方法可同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量,结果准确度高、精密度好,可为金银花药材的质量控制研究提供一种可靠的参考方法。