产地及生长期对灵芝中灵芝酸B含量的影响

本文应用高效液相色谱法对七个产区培养的灵芝以及不同生长期中灵芝酸B的含量进行了测定,结果表明:不同产区灵芝酸B的含量差别较大;不同生长期以生长初期含量较高。

RP-HPLC法测定不同部位灵芝中灵芝酸B含量

目的 测定灵芝中具有苦味的成分灵芝酸 B在灵芝中不同部位的含量。方法 采用 RP- HPL C法测定灵芝菌盖的表皮层、木栓层、菌柄、孢子粉、菌盖子实体等部位中灵芝酸 B的含量。结果 灵芝药材中灵芝酸 B主要集中在灵芝的表皮部位 ,其它部位则较少。结论 为寻找灵芝的有效成分分布规律提供了客观依据。

复方灵芝降糖胶囊中灵芝酸B的含量测定

目的：测定复方灵芝降糖胶囊中灵芝酸Ｂ。方法：反相ＨＰＬＣ，流动相０．５ ％ 高氯酸－ 甲醇（５０∶５０） ，流速０ ．７ｍｌ／ｍｉｎ ，柱温４０°Ｃ。结果：回收率１０２ ．６ ％ 。ＲＳＤ 为２ ．４１ ％ 。结论：本法简单易行。

超高效液相色谱-串联质谱法测定灵芝红茶中灵芝酸A和灵芝酸B

样品经40%(体积分数)甲醇溶液15.0mL超声提取20min。以Ultimate UPLC XBC18色谱柱(150mm×2.1mm,1.8μm)分离,用乙腈-水(45+55)溶液洗脱,采用负离子模式监测。以氯霉素为内标物。灵芝酸A、B的线性范围分别为0.051 3~0.513 mg·L^(-1)和0.020 8~0.125mg·L^(-1),方法的检出限(3S/N)分别为0.15,0.062mg·L^(-1)。方法用于灵芝红茶样品的分析,加标回收率在96.0%~104%之间,测定值的相对标准偏差(n=9)在1.1%~2.8%之间。

灵芝烯酸B诱导Oct4去SUMO化激活G0期胃癌侧群细胞

[目的]从蛋白质类泛素化修饰角度研究灵芝烯酸B(GAB)对静息期G0胃癌侧群细胞的活化作用,为胃癌侧群细胞靶向治疗提供新策略。[方法]流式细胞术分离CD133+的SGC-7901胃癌侧群细胞,培养细胞克隆球,给予GAB处理96 h,于不同时间点检测克隆球大小,绘制克隆球变化曲线;流式细胞术检测胃癌侧群细胞周期变化;蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测小泛素样修饰蛋白-1(SUMO-1)、八聚体结合转录因子4(Oct4)、细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、Cyclin A2和Cyclin B1的表达水平;四甲基噻唑蓝(MTT)法检测顺铂对CD133+胃癌侧群细胞的半数致死量(IC50)。[结果] GAB组胃癌侧群细胞克隆球生长速度明显低于对照组;对照组CD133+胃癌侧群细胞主要集中于G0/G1期,而GAB组CD133+则主要集中于G2/M期;与对照组比较,GAB组胃癌侧群细胞的SUMO-1、Oct4和Cyclin D1蛋白表达水平降低,而Cyclin E1、Cyclin A2和Cyclin B1蛋白表达水平升高(P<0.05);GAB处理使顺铂对胃癌侧群细胞IC50从69.84μg/mL下降至35.67μg/mL。[结论] GAB能够通过诱导Oct4去SUMO化激活G0期胃癌侧群细胞,增加胃癌侧群细胞对顺铂的化疗敏感性。

灵芝酸B对乳腺癌细胞MCF-7增殖作用的影响

目的:研究灵芝酸B在体外对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法:采用CCK8试剂盒分别检测对照组和不同浓度灵芝酸B(0、1、5、10、20、50、100μmol·L-1)对MCF-7细胞增殖的影响。每组设3个复孔,分别接种于96孔板中,分别于培养24h和48h检测其OD值。结果:CCK8法检测,与对照组相比,随着灵芝酸浓度增加,细胞存活率下降,当灵芝酸浓度为100μmol·L-1时,细胞存活率最低(P<0.05或P<0.01),细胞抑制作用最强。同时随着药物处理时间增长,细胞存活率下降。结论:表明灵芝酸的抑制作用具有浓度依赖性和时间依赖性。

鹿角灵芝提取三萜酸的研究

为了高值化利用鹿角灵芝,初步研究了乙醇浸提法提取三萜酸的工艺条件。通过单因素试验和正交试验,确定了最佳的浸提条件:液固比30∶1,温度90℃,时间120 min,乙醇浓度70%(v/v)。在最佳条件下进行验证试验,灵芝酸A和灵芝酸B的总提取率达到0.536‰。

HPLC法测定红曲灵芝丹参胶囊中4种成分的含量

目的建立同时测定红曲灵芝丹参胶囊与丹参提取物中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B和丹参酮ⅡA含量的HPLC法。方法采用Agilent TC-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相为2 mL·L^(-1)甲酸水(A)-甲醇(B),梯度洗脱;流速为0.6mL·min^(-1);柱温:30℃;检测波长:280nm;进样量:20μL。结果测定红曲灵芝丹参胶囊中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B和丹参酮ⅡA 4种成分的含量,每1g中丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B和丹参酮ⅡA的含量分别为0.451 2,0.119,1.398和3.789mg,与丹参提取物中各成分的含量相比差异较大。结论该方法简便、准确,灵敏度高,专属性好,可用于红曲灵芝丹参胶囊与丹参提取物的质量控制。

超临界CO_2萃取灵芝子实体中的三萜类成分

目的:筛选超临界CO2萃取灵芝子实体中三萜类成分的最佳工艺条件。方法:采用RP-HPLC测定灵芝酸B的含量、可见分光光度法测定灵芝总三萜含量,设计正交试验优化超临界CO2萃取灵芝子实体中三萜类成分的工艺条件。结果:超临界CO2萃取灵芝子实体中三萜类成分的最佳工艺条件:萃取压力为25 MPa,萃取温度为45℃,萃取时间为1.5 h,夹带剂(95%乙醇)用量为3 mL.g-1。结论:超临界CO2萃取灵芝子实体中三萜类成分具有萃取效率高、萃取时间短、操作简单等优点,其方法可靠,切实可行。

RP-HPLC和UV-VIS法测定灵芝不同收获期的多糖肽和灵芝酸

目的研究灵芝不同栽培方式和不同收获期中多糖肽和灵芝酸A、B的变化,为灵芝规范化栽培及制定产品质量标准提供依据。方法 RP-HPLC测定菌草灵芝和仿野生栽培的灵芝提取物的灵芝酸A、B的变化。色谱柱为XB-C18柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.05%磷酸-乙腈(65:35),检测波长254nm,常温,进样量50μL。以灵芝多糖肽为对照品,采用Folin-酚试剂法,通过紫外-可见吸收光谱法检测菌草灵芝和仿野生栽培灵芝不同收获期提取物的多糖肽。结果灵芝酸A、B线性范围分别为14.8～371.0和16.4～409.0μg/mL,平均回收率为95.0%、100.5%,RSD分别为1.18%、3.37%(n=6)。灵芝多糖肽在100～600μg/mL与吸光度值呈线性关系,r=0.9995,回收率95%～100%。结论该方法简便、快速,可用于灵芝及其产品中多糖肽和灵芝酸A、B的质量控制。菌草灵芝沸水提取能将多糖肽和灵芝酸分离,既简化了灵芝水、醇提取工艺,又提高经济效益。