重组人球状脂联素在毕赤酵母中的表达和生物学活性分析

脂联素是一种重要的脂肪细胞因子,而球状脂联素(脂联素的球状结构域,gapM1)有望开发为一种新药,用来治疗Ⅱ型糖尿病。本研究分别通过摇瓶和发酵罐培养,用毕赤酵母工程菌进行重组人gapM1的表达,并用凝胶过滤和阴离子交换进行蛋白的纯化。然后,用高脂饲料和低剂量STZ(链脲佐菌素)相结合的方法建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,鉴定gapM1的生物学活性。SDS-PAGE结果表明gapM1在毕赤酵母中得到了高效表达,Western blotting结果显示表达的蛋白为gapM1,并从10 L发酵上清中纯化得到200 mg纯度为96%的gapM1。而制备的重组人gapM1能显著降低Ⅱ型糖尿病大鼠的血糖(34.2%)、血甘油三酯(79.6%)和血总胆固醇(62.1%)水平。因此,重组人gapM1在毕赤酵母中得到了成功表达,并且通过动物模型证明其有很好的降血糖和降血脂活性。