大蒜紫斑病菌产毒培养条件的筛选

为了研究大蒜紫斑病菌培养的最佳产毒条件,从具有典型病斑的发病大蒜叶片上分离得到大蒜紫斑病菌,对该病菌的产毒培养条件进行了研究。结果表明,最佳病毒条件为:培养基为改良Fries培养基,培养温度为26℃,培养基pH值为7,培养时间为6 h,培养方式为连续24 h黑暗+振荡培养。同时试验选择山东章丘大葱种子,以种子发芽抑制法对粗毒素进行生物检测,表明培养得到的粗毒素具有一定的毒性。

大蒜紫斑病菌的分离及培养条件研究

从田间具有典型病斑的发病大蒜叶片上分离病菌并培养,形态和致病性鉴定结果表明,得到的病菌为大蒜紫斑病病菌,属葱链格孢（Alternaria porri（Elliott）Cif.）。培养条件研究表明,病菌在马铃薯葱汁琼胶培养基上生长速率最快,产孢量也最多;菌丝生长的适宜温度范围为22-30℃,低于18℃或者高于37℃均不适宜生长,菌丝培养的最适温度为26℃;病菌产孢的适宜温度范围为20-26℃,产孢培养的最适温度为22℃。菌丝在光暗交替条件下生长最快,在连续黑暗条件下产孢最多;在pH5-12范围内均能生长和产孢,以pH8产孢最多。

大蒜紫斑病抗性鉴定方法的研究

以G087(抗病)、G064(中抗)、G073(感病)大蒜为鉴别品种,对大蒜紫斑病的侵染途径,抗性鉴定的接种叶龄、接种浓度、接种部位,接种后培养温度及调查时期等进行了研究。结果表明,苗期紫斑病菌通过伤口和自然孔口均可浸染大蒜植株,而花芽鳞芽分化期只可通过伤口侵入。抗病性鉴定最适接种叶龄为5叶期;最适接种浓度为1×106个.mL-1;离体接种法较活体接种法更简便快捷。离体接种鉴定时,叶面接种和叶背接种鉴定结果无显著性差异;接种后最适培养温度为21℃;最适调查时期为接种后第6天。以G057(抗病)、G103(中抗)、G083(感病)大蒜为验证品种,离体接种鉴定结果显示,建立的大蒜紫斑病抗病性鉴定方法可行,能如实反映品种的真实抗性。

‘改良蒜’抗紫斑病变异株系的离体筛选

以‘改良蒜’品种带蒜瓣基部的茎盘为外植体,在含有不同浓度大蒜紫斑病菌粗毒素的MS培养基上采取分步筛选法筛选大蒜抗病变异系,并诱导形成小鳞茎;对小鳞茎繁殖的幼苗叶面喷施病菌粗毒素进行抗病性鉴定。结果表明,大蒜紫斑病菌粗毒素对‘改良蒜’愈伤组织的诱导有显著抑制作用,粗毒素浓度越高,抑制作用越强,抗病愈伤组织诱导的适宜病菌粗毒素浓度为30%;在粗毒素浓度10%、20%和30%的培养基上依次分步培养筛选获得了抗紫斑病变异系。粗毒素接种抗性鉴定表明,抗性系幼苗的抗病性比对照增强。

基于Brn1基因的大蒜紫斑病菌PCR检测技术

大蒜紫斑病菌是一种严重危害大蒜生产的真菌性病害,是中国大蒜出口中需要检疫的一种病害。根据1,3,8-三羟基萘还原酶基因(Brn1)的部分序列,设计出一对大蒜紫斑病菌特异性引物AP4/CTU,该引物特异性好,能专一扩增出480 bp电泳条带,而供试大蒜上的其他病害、不同属的真菌及空白对照均无扩增条带,建立了大蒜紫斑病菌的PCR鉴定方法。该方法灵敏度较高,DNA检测灵敏度为4 ng。该方法快速简便,适用于出入境检验检疫及大蒜健康检测领域。

大蒜紫斑病及其防治方法的研究现状

大蒜紫斑病是真菌性病害,在大蒜叶部和颈部发病,严重时全株枯黄,病部组织失水死亡。虽然目前大蒜紫斑病的研究取得了一定的进展,但随着大蒜种植面积扩大,该病害发生、传播日趋严重,防治日趋困难。对国内、外大蒜紫斑病的发生、发展、防治方法以及现存的问题进行了综述,并对今后该病害的防治研究进行展望。