RP-HPLC法测定新鲜大蒜中蒜氨酸含量

采用反相高效液相色谱法测定蒜氨酸的含量,优选样品的最佳处理方案.结果表明微波法较好,大蒜中蒜氨酸平均含量为1.263%（n=3）,回收率为（99.99±1.53）%,浓度在20～202μg/mL范围内峰面积与浓度线性关系良好（r=0.9999）,日间精密度0.76%.该法操作简便,重现性好,结果准确、可靠.

HPLC内标法测定鲜蒜中蒜氨酸

目的:建立准确、方便的 HPLC 法测定鲜蒜中蒜氨酸。方法:采用微波灭酶,以利巴韦林为内标物,HPLC 紫外检测,测定鲜蒜中蒜氨酸含量。与美国药典蒜氨酸衍生化 HPLC 测定进行比较。结果:同一鲜蒜样品测定蒜氨酸含量,以微波法灭酶大蒜的含量最高,为1.291%(RSD=1.4%),回收率为98.80(±2.0)%;美国药典方法测定结果为1.287%(RSD=3.6%),回收率为96.03(±2.6)%。结论:HPLC 内标法与美国药典方法测定结果一致,操作步骤简化。

HPLC测定独头蒜和大蒜中的蒜氨酸和大蒜素

为准确、快速、方便的测定大蒜中的蒜氨酸和大蒜素，采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC），Waters symmetry C18（4．6mmi．d．×150mm，5μm）色谱柱，蒜氨酸检测波长214nm、大蒜素检测波长254nm，流动相：甲醇：水（30：70），流速0．8ml／min，结果蒜氨酸在0．01～0．35mg／ml，呈良好的线性关系，相关系数99．6，平均回收率99．85±1．53％

反相高压液相色谱法测定鲜蒜中的蒜氨酸

为准确、快速、方便的测定大蒜中的蒜氨酸,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),Hypersil ODS C18(250 mm×4.6 mm)色谱柱,检测波长200 nm,5%甲醇+95%pH=5磷酸缓冲液为流动相,流速为0.5 mL/min,柱温为20℃等条件下进行测定.测定结果为:蒜氨酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性范围为10～350μg/mL;利用蒜氨酸酶反应样品的HPLC行为差异或纯蒜氨酸均可对蒜氨酸进行定性测定.测定结果表明,该方法经济、简便、快速、重现性好.

高效液相色谱法测定甘孜州大蒜有效成分蒜氨酸的含量

建立了高效液相色谱(HPLC)法测定大蒜中蒜氨酸含量的方法。色谱条件为:Eclipse XDB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5.0μm);流动相A-水溶液,B-甲醇,95%B等度洗脱;检测波长214nm。对四川省甘孜州种植的红七星、道孚、金蒜一号、曲Ⅰ4个大蒜品种进行测定,并与市售大蒜和市售独头蒜进行比较。该方法重复性好(RSD=1.95%),稳定性好(RSD=0.90%),精密度高(RSD=0.36%),加标回收率较好(RSD=5.4%)。结果表明,红七星中蒜氨酸含量最高,为3.67%;道孚、金蒜一号、曲Ⅰ中蒜氨酸含量较接近,均在1.70%~1.80%;市售独头蒜中蒜氨酸含量为2.44%;市售大蒜蒜氨酸含量最低,仅为1.58%。

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定大蒜中的蒜氨酸及其有关物质

采用6-氨基喹啉-N-（羟基琥珀酰亚胺基）氨基甲酸酯（AQC）为柱前衍生化试剂,建立了AQC柱前衍生化反相高效液相色谱法用于测定大蒜中的蒜氨酸及其有关物质的含量。该衍生化反应可瞬间完成,衍生化产物稳定。采用的色谱条件为：KromasilC18柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相A为0.1%乙酸铵（含0.03%乙酸）,流动相B为水-乙腈（体积比为40∶60）,线性梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为248nm。蒜氨酸在1.1719-1500μg/mL范围内线性关系良好（r=0.9998）,日内、日间测定的精密度良好（相对标准偏差（RSD）为1.8%,n=5）,添加回收率为99.1%（RSD=1.9%,n=5）,最小检出浓度为0.15μg/mL。该方法准确、方便、快速。

不同产地大蒜挥发油成分分析及大蒜素含量的测定

[目的]分析比较不同产地大蒜挥发油的化学成分,并对大蒜素的含量进行测定。[方法]利用GC-MS分析分别产自贵阳、贵州麻江、山东、云南和重庆的大蒜挥发油的成分,并利用HPLC法测定各产地大蒜中大蒜素的含量。[结果]不同产地大蒜大蒜素的含量均相对最高,但差异较大;大蒜素在进样量为0.562～2.810μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(R=0.999 2,n=5),平均加样回收率为99.39%,RSD为1.76%。[结论]GC-MS法能快速、简便、高效地检测大蒜挥发油的化学成分;用HPLC法测定大蒜素的含量,操作简便、结果可靠,重复性好。该研究为生产大蒜调味油时大蒜原料的选择以及提高大蒜调味油的品质奠定了理论基础。

大蒜中三种主要蒜氨酸的合成及表征

以L-半胱氨酸盐酸盐为原料,合成了大蒜中三种主要的蒜氨酸——S-甲基-L-半胱氨酸亚砜、S-丙基-L-半胱氨酸亚砜和S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜,并通过HPLC、MS和1 H NMR方法对三种合成化合物的纯度进行了检测。结果表明,三种化合物的纯度为99.99%,产率分别可达46.5%,34.6%,46.2%。

液相色谱-二极管阵列检测器测定大蒜制品中的蒜氨酸

建立了液相色谱-二极管阵列检测器测定大蒜制品中蒜氨酸的分析方法。用甲醇+水提取试样中的蒜氨酸,经HLB固相萃取柱净化后,以C18柱分离、二极管阵列检测器扫描检测,以保留时间和蒜氨酸的二阶导数光谱图定性,以215 nm波长下蒜氨酸峰面积定量。方法的线性范围:5.0～500.0μg/ml;加标回收率:89.0%～105.4%。

高效液相色谱法同时测定黑蒜中蒜氨酸、脱氧蒜氨酸及γ-谷氨酰半胱氨酸含量

黑蒜中蒜氨酸及相关硫化物具有较强抗氧化性和多种药理活性。建立同时测定黑蒜中蒜氨酸、脱氧蒜氨酸和γ-谷氨酰半胱氨酸含量高效液相色谱法。黑蒜样品用榨汁机粉碎,超声提取后过滤离心,以甲醇+0.1%磷酸(1􀏑9)为流动相,经ZORBAX-Eclipse XDB-C18 Analytical色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,220 nm下检测。结果表明,蒜氨酸、脱氧蒜氨酸和γ-谷氨酰半胱氨酸分别在27.20~275.00μg·mL^-1(R^2=0.9992)、22.40~280.00μg·mL^-1(R^2=0.9991)、36.80~368.00μg·mL^-1(R^2=0.9988)范围内,线性关系良好;3种物质加标回收率分别为94.61%、96.39%和92.56%;相对标准偏差RSD分别为2.87%、1.07%和0.98%。该方法样品前处理简单,测定快速,回收率高,精密度高,适用于黑蒜中蒜氨酸、脱氧蒜氨酸和γ-谷氨酰半胱氨酸含量同时测定。

大蒜冻干粉指纹图谱的建立及蒜氨酸含量测定

目的:建立大蒜冻干粉指纹图谱及蒜氨酸含量测定方法,为大蒜冻干粉的质量控制提供依据。方法:对9种杀酶条件和9个酶抑制剂(羧甲基羟胺半盐酸盐)用量进行筛选以确定样品的前处理方法;建立15批大蒜冻干粉的指纹图谱,并用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价;建立蒜氨酸的含量测定方法,与《美国药典》衍生化法的样品测定结果进行配对样本的Wilcoxon符号秩和检验。结果:确定杀酶方式为酶抑制剂杀酶,加入样品量2.18%的酶抑制剂可以达到彻底杀酶的效果;15批大蒜冻干粉与对照指纹图谱的相似度均≥0.996,共标定出11个共有峰;建立的含量测定方法线性关系良好,精密度、稳定性、重复性均符合要求,加样回收率平均值为98.42%;本研究方法测定的15批样品蒜氨酸含量与《美国药典》衍生化法的测定结果相比无显著性差异(P>0.05)。结论:建立的指纹图谱及含量测定方法易于操作、结果准确、重复性好,可以为生产企业有效控制大蒜冻干粉的质量提供简便、易行、可靠的方法。

液相色谱-质谱联用测定大蒜中的蒜氨酸

介绍了液相色谱一质谱测定大蒜中蒜氨酸的方法。最佳工作条件下，该方法的线性范围为10．0-320．0ng／mL，加标回收率为94．0％～99．1％，且精密度、准确度较好，可满足大蒜中蒜氨酸的检测要求。

蚓粪对大蒜中蒜氨酸和大蒜素含量及大蒜精油抗菌活性的影响

以大蒜为材料,测定不同处理下蒜氨酸和大蒜素含量并检测大蒜精油对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抑制效果,为开发大蒜天然抑菌药物和高效防腐保鲜剂提供参考。结果表明,施用蚓粪和化肥的大蒜蒜氨酸含量(w,后同)分别为44.05 mg·g^(-1)和33.86 mg·g^(-1),大蒜素含量分别为0.33 mg·g^(-1)和0.13 mg·g^(-1),施用蚓粪的大蒜蒜氨酸和大蒜素含量均显著高于施用化肥处理;施用蚓粪的大蒜精油得率显著高于化肥处理;在1.25~40.0 mg·mL-1质量浓度内,2种施肥处理大蒜提取得到的精油对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的最小抑菌质量浓度均为2.5 mg·mL-1,并表现出一定的量效关系;同一浓度处理下,蚓粪处理的大蒜精油对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的抑制作用优于化肥处理。

HPLC非衍生化同时测定大蒜中蒜氨酸及其同系物

目的:建立同时测定大蒜中的蒜氨酸及其同系物的HPLC非衍生化分析方法。方法:采用AgilentZORBAXSB-C18(250mm×4.6mm,5.0μm)柱;流动相为水(100%);流速0.8mL/min;检测波长:220nm;柱温为25℃。结果:蒜氨酸在8.003～200.1μg/mL(R2=0.9999)、异蒜氨酸在2.243～69.34μg/mL(R2=0.9998)、甲基蒜氨酸在20.54～385.1μg/mL(R2=0.9996)范围内线性关系良好,加样回收率分别为98.80%、99.18%、99.92%。结论:本法简便、快速、准确,可用于对大蒜中风味前体物质蒜氨酸、异蒜氨酸和甲基蒜氨酸的含量测定。

大蒜质量标准中商榷内容的研究

目的:参照美国药典、欧盟药典和英国药典对2010版中国药典收载的大蒜薄层鉴别和含量测定等进行研究。方法:采用微波灭酶法处理样品,对大蒜药材进行薄层色谱鉴别;采用阳离子交换色谱柱,以磷酸盐缓冲溶液为流动相,流速0.5 mL.min-1,检测波长214 nm,测定大蒜药材中蒜氨酸含量。结果:不同产地大蒜药材的薄层色谱在与蒜氨酸和精氨酸对照品斑点Rf值相同的位置上,均检出相同的斑点。建立的蒜氨酸含量测定HPLC法,经方法学实验表明,蒜氨酸浓度在31.2～374.4μg.mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.9999);低、中、高浓度平均回收率(n=9)分别为102.8%(RSD=4.0%),101.8%(RSD=3.0%),111.0%(RSD=3.8%)。结论:本研究建立了大蒜药材的薄层色谱鉴别和高效液相色谱含量测定方法,可用于大蒜药材的定性与定量分析,建议作为大蒜质量标准进一步研究的参考。

液相色谱-二极管阵列检测器测定大蒜中的蒜氨酸

建立液相色谱-二极管阵列检测器测定大蒜中蒜氨酸的分析方法。鲜蒜在脱氧水介质中,经微波灭酶后,用甲醇-水提取其中的蒜氨酸,以C18柱分离、二极管阵列检测器扫描检测。以保留时间和蒜氨酸的二阶导数光谱图定性,以215 nm波长下蒜氨酸峰面积定量。方法的线性范围为5.0～500.0μg/mL,加标回收率为93.2%～101.1%。

高效液相色谱法测定蒜米中蒜氨酸的含量

以金乡杂交蒜米和苍山四六瓣蒜米为原料,采用高效液相色谱法(HPLC)测定蒜米中蒜氨酸含量。其中:Arcus EP-C_(18)单泵色谱柱(5μm,4.6 mm×150 mm),柱温25℃;流动相为甲醇与水体积比(85︰15);流速1.0mL·min^(-1),紫外检测波长214 nm,进样量10μL。结果表明,蒜氨酸的质量浓度在0.08~1.00 mg/mL范围内呈现良好线性关系(r^2=0.999 1),以S/N=3︰1的信噪比得到蒜氨酸的最低检出量是20.3μg。该操作方法切实有效、快速、重复性好,平均回收率90.18%,RSD为1.132%(n=6),因此可用于测定蒜米中蒜氨酸的含量。