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不同穴组电针对大脑中动脉闭塞模型大鼠海马中Gasdermin-D的影响
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作者 罗来 刘庆臻 +5 位作者 许金森 潘晓华 萨喆燕 易婉莎 张叶 万隆 《山西中医药大学学报》 2024年第4期379-384,共6页
目的:观察电针背俞穴(肝俞、肾俞)、阳明经穴(曲池、足三里)、督脉穴(神庭、百会)对大脑中动脉闭塞模型(MCAO)大鼠神经功能、学习记忆能力及海马组织中Gasdermin-D mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将30只SD大鼠随机分为假... 目的:观察电针背俞穴(肝俞、肾俞)、阳明经穴(曲池、足三里)、督脉穴(神庭、百会)对大脑中动脉闭塞模型(MCAO)大鼠神经功能、学习记忆能力及海马组织中Gasdermin-D mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、背俞穴组、阳明经穴组、督脉穴组,每组6只。采用Longa改良线栓法制作MCAO大鼠模型,造模24 h后背俞穴组、阳明经穴组、督脉穴组大鼠每天电针20 min,连续7 d,模型组、假手术组大鼠予以同等条件抓取。通过改良神经损伤严重度评分(mNSS)判断大鼠神经功能缺损状况;Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力;实时定量荧光PCR(q-PCR)检测海马组织中Gasdermin-D的mRNA表达。结果:在mNSS评分中,造模后第1天模型组和3组电针组大鼠均较假手术组mNSS评分升高,差异有统计学意义(P<0.05);模型组和3组电针组大鼠比较,mNSS评分差异无统计学意义。造模后第7天,阳明经穴组和督脉穴组评分较模型组和背俞穴组明显降低,且低于同组造模后第1天,差异有统计学意义(P<0.05)。在Morris水迷宫定向航行实验中,与假手术相比,模型组和背俞穴组在4 d的平台探索总时间均上升,阳明经穴组在第3、5天上升,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,阳明经穴组和督脉穴组在4 d的平台探索总时间均降低,背俞穴组在第3、6天降低,差异有统计学意义(P<0.05);与背俞穴组相比,阳明经穴组和督脉穴组在4 d的平台探索总时间均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与阳明经穴组相比,督脉穴组在4 d的平台探索总时间降低,差异有统计学意义(P<0.05)。在空间探索实验中,与假手术组相比,模型组和背俞穴组穿越平台次数减少,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,阳明经穴组和督脉穴组穿越平台次数增加,差异有统计学意义(P<0.05)。在q-PCR实验中,模型组和背俞穴组Gasdermin-D的mRNA相对表达量较假手术组升高,差异有统计学意义(P<0.05);阳明经穴组和督脉穴组Gasdermin-D的mRNA相对表达量较模型组和背俞穴组均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电针督脉穴组和阳明经穴组均能改善神经功能评分,减轻神经功能缺损症状,提高学习记忆能力,降低海马组织中Gasdermin-D的mRNA表达,且效果优于背俞穴组,其机制可能与下调Gasdermin-D mRNA在海马组织中的表达有关。 展开更多
关键词 MCAO 电针 背俞穴 阳明经 督脉 gasdermin-d
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TREM2缺失加重小鼠肺缺血再灌注损伤的机制研究
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作者 郭有缘 梁芳特 +1 位作者 刘豪 林飞 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第2期204-210,共7页
目的:探讨2型髓系细胞触发受体(TREM2)对肺缺血再灌注损伤(LIRI)的影响及其可能的调控机制。方法:将C57BL/6J雄性小鼠(WT)及TREM2敲除鼠(TREM2 KO)各12只,随机分成WT小鼠假手术组(WT组)、TREM2 KO小鼠假手术组(TREM2 KO组)、WT小鼠LIRI... 目的:探讨2型髓系细胞触发受体(TREM2)对肺缺血再灌注损伤(LIRI)的影响及其可能的调控机制。方法:将C57BL/6J雄性小鼠(WT)及TREM2敲除鼠(TREM2 KO)各12只,随机分成WT小鼠假手术组(WT组)、TREM2 KO小鼠假手术组(TREM2 KO组)、WT小鼠LIRI组(WT+LIRI组)、TREM2 KO小鼠LIRI组(TREM2 KO+LIRI组),每组6只。WT+LIRI组和TREM2 KO+LIRI组采用夹闭左肺肺门1 h,再灌注24 h的方法制备小鼠LIRI模型,WT组和TREM2 KO组仅开胸不夹闭肺门;通过蛋白免疫印迹(western blotting)、免疫荧光、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、苏木精—伊红(HE)染色、测定肺湿干质量比值(W/D)实验,评价敲除TREM2对小鼠肺缺血再灌注后组织损伤、炎症反应以及肺内巨噬细胞焦亡情况的影响。结果:TREM2敲除明显加重了LIRI后肺组织形态学改变,增加肺损伤评分(P<0.05),升高肺组织湿干质量比值(P<0.05),促进肺组织炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)表达(P<0.05),增加LIRI后肺组织巨噬细胞焦亡标志物天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)和成孔蛋白Gasdermin-D(GSDMD)表达(P<0.05)。结论:TREM2敲除加重LIRI,其机制可能与TREM2缺失引发caspase-1介导的肺内巨噬细胞焦亡有关。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 2型髓系细胞触发受体 细胞焦亡 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1 成孔蛋白gasdermin-d 炎症反应
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血清焦亡蛋白对脓毒症急性肝损伤病情及预后的评估价值
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作者 尚德民 何通 《肝脏》 2024年第2期215-219,共5页
目的研究血清焦亡蛋白对脓毒症急性肝损伤病情及预后的评估价值。方法选择2019年5月—2022年4月期间河西学院附属张掖人民医院收治的脓毒症患者作为研究对象,参照急性肝损伤的诊断标准分为急性肝损伤组和无肝损伤组。入院时采集患者血... 目的研究血清焦亡蛋白对脓毒症急性肝损伤病情及预后的评估价值。方法选择2019年5月—2022年4月期间河西学院附属张掖人民医院收治的脓毒症患者作为研究对象,参照急性肝损伤的诊断标准分为急性肝损伤组和无肝损伤组。入院时采集患者血清并检测焦亡蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)及Gasdermin-D(GSDMD)的含量;评价脓毒症合并急性肝损伤的类型,分为高胆红素型、高转氨酶型、高胆红素高转氨酶型;评价脓毒症合并急性肝损伤的预后,分为死亡和存活。结果急性肝损伤组患者的血清Caspase-1、GSDMD含量分别为(1446.40±351.11)pg/mL、(8.21±2.04)ng/mL,均高于无肝损伤组的(1021.35±288.32)pg/mL、(6.59±1.57)ng/mL(P<0.05);急性肝损伤组患者的血清Caspase-1、GSDMD含量与C反应蛋白、降钙素原、急性生理学与慢性健康状况评分II(APACHE II)、序贯器官衰竭评分(SOFA)呈正相关;急性肝损伤组中高胆红素高转氨酶型患者的血清Caspase-1、GSDMD含量分别为(1906.02±332.32)pg/mL、(9.94±1.97)ng/mL,高于高转氨酶型患者的(1333.77±267.70)pg/mL、(7.74±1.28)ng/mL和高胆红素型患者的(1318.12±270.93)pg/mL、(7.54±2.04)ng/mL;死亡患者的血清Caspase-1、GSDMD含量分别为(1685.37±328.10)pg/mL、(9.76±1.61)ng/mL,高于存活患者的(1275.70±256.33)pg/mL、(7.10±1.53)ng/mL(P<0.05);血清Caspase-1、GSDMD含量对脓毒症合并急性肝损伤患者的高胆红素高转氨酶型具有诊断价值、对死亡具有预测价值。结论脓毒症合并急性肝损伤患者的血清焦亡蛋白Caspase-1、GSDMD含量增加,血清Caspase-1、GSDMD对病情及预后具有评估价值。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肝损伤 焦亡 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1 gasdermin-d 预后
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脊髓损伤后细胞焦亡调控机制及治疗策略 被引量:2
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作者 尚文雅 任亚锋 +4 位作者 李冰 韦慧麟 张芝兰 黄晓萌 黄靖 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第11期1772-1779,共8页
背景:调节细胞死亡和神经炎症是治疗脊髓损伤的两个重要途径,细胞焦亡是一种与神经炎症密切相关的程序性死亡模式,针对性靶向抑制脊髓损伤后焦亡,是一项有前景的治疗策略。目的:归纳细胞焦亡在脊髓损伤中的分子机制、正负向调节因子及... 背景:调节细胞死亡和神经炎症是治疗脊髓损伤的两个重要途径,细胞焦亡是一种与神经炎症密切相关的程序性死亡模式,针对性靶向抑制脊髓损伤后焦亡,是一项有前景的治疗策略。目的:归纳细胞焦亡在脊髓损伤中的分子机制、正负向调节因子及治疗策略的研究进展。方法:以“spinal cord injury,pyroptosis,nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3(NLRP3),Caspase,Gasdermin D(GSDMD),IL-1β,IL-18”为检索词,在PubMed和Web of Science数据库进行检索,最终纳入93篇英文文献。结果与结论:①作为新发现的程序性死亡方式,细胞焦亡已被证实在脊髓损伤后继发性损伤阶段起重要作用。②在脊髓损伤后细胞焦亡的调节因子中,CD73、NRF2、GDF-11、多巴胺、FANCC和miR-423-5P可抑制细胞焦亡,TLR4和Aopps可促进细胞焦亡。③在治疗策略方面,中药活性成分丹皮酚、雷公藤红素、桦木酸、胡椒碱、山奈酚、喜树碱,各种细胞来源的外泌体,药物二甲双胍、拓扑替康、锂、锌和一氧化碳释放分子3能有效抑制焦亡,减轻脊髓继发性损伤,但这些药物的毒副反应和具体剂量有待深入研究。④细胞焦亡加重脊髓损伤的具体分子机制仍知之甚少,非经典途径及其他炎性小体的作用值得进一步探索。⑤目前脊髓损伤后焦亡的研究仅停留在动物实验阶段,尚无相关临床研究,且无批准的靶向治疗药物。⑥细胞焦亡在脊髓损伤后的应用具有巨大潜能,未来需继续研究其具体调控机制,为脊髓损伤的治疗提供新的作用靶点。 展开更多
关键词 脊髓损伤 细胞焦亡 NLRP3 半胱氨酸蛋白酶 Gasdermin D 调节因子 抗焦亡疗法
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焦孔素D介导的滑膜血管内皮细胞焦亡促进类风湿关节炎关节破坏
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作者 吴滔 张学培 +4 位作者 卢烨 邹耀威 欧阳志明 马剑达 戴冽 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期709-718,共10页
【目的】了解焦孔素D(GSDMD)在类风湿关节炎(RA)滑膜血管内皮细胞(VEC)中的表达并探讨其介导的细胞焦亡对VEC功能的影响。【方法】收集22例RA及对照组18例非炎性关节病(Orth.A)患者膝关节滑膜,Western blot方法检测活性GSDMD-NT段蛋白... 【目的】了解焦孔素D(GSDMD)在类风湿关节炎(RA)滑膜血管内皮细胞(VEC)中的表达并探讨其介导的细胞焦亡对VEC功能的影响。【方法】收集22例RA及对照组18例非炎性关节病(Orth.A)患者膝关节滑膜,Western blot方法检测活性GSDMD-NT段蛋白水平并分组比较RA患者临床指标的差异;免疫荧光双染检测RA滑膜GSDMD的细胞定位。体外RA滑液干预人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)模拟炎症环境,检测细胞凋亡水平及焦亡通路相关蛋白表达。siRNA转染敲减GSDMD,检测HUVEC细胞焦亡、分泌细胞因子、增殖、迁移和血管生成能力的变化。【结果】RA滑膜组织表达GSDMD-NT显著升高,GSDMD-NT高表达组RA患者关节破坏更严重,滑膜微血管计数更高;RA滑膜VEC表达GSDMD;RA滑液可诱导HUVEC发生GSDMD介导的细胞焦亡,分泌血管内皮生长因子(VEGF)增多,增殖、迁移及血管生成能力增强;下调GSDMD表达可逆转上述效应。【结论】GSDMD介导的少部分滑膜VEC焦亡可能通过分泌VEGF诱导其余VEC增殖、迁移以及血管新生参与RA关节破坏进程,可能是抑制RA关节破坏的新靶点。 展开更多
关键词 细胞焦亡 类风湿关节炎 焦孔素D 血管内皮细胞 关节破坏
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细胞焦亡在认知功能障碍中的研究进展
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作者 张超 王晓冬 +1 位作者 王莹 邱颐 《医学综述》 CAS 2024年第20期2470-2476,共7页
随着我国人口老龄化程度加剧,认知功能障碍患者逐渐增加,同时也伴随术后并发症的增加以及老年患者生活质量的降低。目前细胞焦亡已成为认知功能障碍发病机制研究的热点,炎症小体、胱天蛋白酶、消皮素D作为细胞焦亡的重要组成部分,可通... 随着我国人口老龄化程度加剧,认知功能障碍患者逐渐增加,同时也伴随术后并发症的增加以及老年患者生活质量的降低。目前细胞焦亡已成为认知功能障碍发病机制研究的热点,炎症小体、胱天蛋白酶、消皮素D作为细胞焦亡的重要组成部分,可通过抑制与其相关的细胞信号转导、关键蛋白的合成、配体的激活组装等,有效降低细胞焦亡水平,缓解认知功能障碍。因此,未来深入研究细胞焦亡在认知功能障碍中的作用机制,可以为疾病的治疗提供新思路。 展开更多
关键词 认知功能障碍 细胞焦亡 炎症小体 胱天蛋白酶 消皮素D
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GSDMD介导细胞焦亡缓解高尿酸血症小鼠肾损伤的作用机制
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作者 马丽莎 申瑞芹 +3 位作者 焦杰 罗浩 徐爱萍 邵德翠 《皖南医学院学报》 CAS 2024年第1期5-8,共4页
目的:探讨gasdermin D蛋白(GSDMD)在高尿酸血症(HUA)后肾损伤中的作用及其可能机制。方法:选用C57BL/6J的野生型小鼠和GSDMD敲除小鼠作为实验动物,将其分为4组,野生型小鼠正常饮食组(WT-Norm-diet组),野生型小鼠高尿酸造模组(WT-HUA组),... 目的:探讨gasdermin D蛋白(GSDMD)在高尿酸血症(HUA)后肾损伤中的作用及其可能机制。方法:选用C57BL/6J的野生型小鼠和GSDMD敲除小鼠作为实验动物,将其分为4组,野生型小鼠正常饮食组(WT-Norm-diet组),野生型小鼠高尿酸造模组(WT-HUA组),GSDMD敲除小鼠正常饮食组(KO-Norm-diet组)和GSDMD敲除小鼠高尿酸造模组(KO-HUA组)。HUA动物造模选用氧嗪酸钾[250 mg/(kg·d)]和腺嘌呤[50 mg/(kg·d)]对小鼠灌胃28 d;血生化检测肌酐和尿酸变化;HE染色观察肾脏病理学变化;Western blot检测肾皮质GSDMD、GSDMD-N的蛋白表达;RT-PCR检测KIM-1和NAGL的表达量。结果:与WT-Norm-diet组比较,WT-HUA组小鼠血清中尿酸升高(P<0.01);肾皮质中GSDMD、GSDMD-N的蛋白表达水平升高(P<0.05);KIM-1 mRNA的表达水平升高(P<0.01)。与WT-HUA组比较,KO-HUA组小鼠血清尿酸、肌酐水平、NAGL mRNA表达降低(P<0.05)。HE染色结果显示,KO-HUA组小鼠高尿酸导致的肾小管扩展以及炎性细胞浸润明显改善。结论:GSDMD敲除可有效缓解高尿酸引起的肾脏损伤。 展开更多
关键词 高尿酸血症 肾损伤 细胞焦亡 gasdermin D蛋白
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FTO、GSDMD在胃癌组织中的表达及其作用机制研究
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作者 黄珊珮 韦二丹 +7 位作者 朱丽叶 宁绮婷 陈形梅 陈妮 吴江妮 丘新泽 黄杰安 刘诗权 《中国临床新医学》 2024年第4期400-406,共7页
目的探讨肥胖相关蛋白(FTO)与消皮素D(GSDMD)在胃癌(GC)组织中的表达及其作用机制。方法通过TIMER 2.0数据库分析FTO及GSDMD在GC组织中的差异表达。收集2022年1月至2023年3月广西医科大学第二附属医院手术切取的GC组织及其对应癌旁组织... 目的探讨肥胖相关蛋白(FTO)与消皮素D(GSDMD)在胃癌(GC)组织中的表达及其作用机制。方法通过TIMER 2.0数据库分析FTO及GSDMD在GC组织中的差异表达。收集2022年1月至2023年3月广西医科大学第二附属医院手术切取的GC组织及其对应癌旁组织(距离肿瘤边缘3~5 cm)各45例,并收集患者的临床病理资料。采用免疫组织化学染色法检测组织中FTO、GSDMD的表达情况,分析其与患者临床病理特征的关联性。通过转染低表达FTO慢病毒构建低表达FTO的AGS细胞(FTO低表达组),并以转染空载体慢病毒的细胞作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测两组细胞FTO mRNA、GSDMD mRNA的表达水平;采用细胞划痕实验及细胞迁移实验分析两组细胞迁移能力。结果基于TIMER 2.0数据库的分析结果及免疫组织化学染色结果显示,FTO、GSDMD在GC组织中呈高表达(P<0.05)。FTO和GSDMD高表达均与肿瘤侵犯深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。细胞实验结果显示,FTO低表达组的GSDMD mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05),划痕愈合率更低,细胞迁移数更少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论FTO可能通过调控GSDMD表达促进GC细胞转移。 展开更多
关键词 胃癌 肥胖相关蛋白 消皮素D 细胞迁移
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基于Nrf2-NLRP3途径研究桃红四物汤干预糖尿病大鼠心肌损伤的作用机制
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作者 文中玉 都永勤 +1 位作者 叶敏 沈安鲁 《安徽中医药大学学报》 CAS 2024年第4期77-83,共7页
目的观察桃红四物汤对糖尿病大鼠心脏的保护作用,同时基于核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein d... 目的观察桃红四物汤对糖尿病大鼠心脏的保护作用,同时基于核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)和NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路探讨其作用机制。方法腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病心肌病大鼠模型,将模型复制成功的大鼠分为模型组,桃红四物汤低、中、高剂量组,每组10只,另设10只正常大鼠作为对照组。比较各组大鼠血糖、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)水平。采用苏木精—伊红染色和Masson染色观察大鼠心肌组织病理变化。制备心肌组织匀浆,使用流式细胞术进行线粒体膜电位检测。Western blot法检测Nrf2、HO-1、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶1剪切体(cleaved-caspase-1)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)和消皮素D蛋白N端结构域(N-terminal gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠血糖升高,心肌纤维断裂、排列紊乱,炎症细胞浸润明显,胶原沉积明显;与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组大鼠心肌纤维化明显改善。与对照组比较,模型组SOD活性显著降低(P<0.05),MDA、BNP及cTnI水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组SOD活性显著升高(P<0.05),MDA、BNP、cTnI水平显著降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组心肌组织线粒体膜电位显著降低(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组心肌组织线粒体膜电位显著升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组心肌组织中Nrf2、HO-1、NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD和GSDMD-N蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤低、中、高剂量组心肌组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),Keap1、NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD和GSDMD-N蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论桃红四物汤改善糖尿病心肌病的机制可能与调节Nrf2-NLRP3途径,抗氧化应激及抑制细胞焦亡相关。 展开更多
关键词 桃红四物汤 糖尿病心肌病 Nrf2/HO-1信号通路 NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路
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黄连大黄药对调控ROS/NF-κB/GSDMD信号通路对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞焦亡的影响
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作者 陈源 李振华 +1 位作者 岳仁宋 杨茂艺 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第11期61-66,I0019,I0020,共8页
目的基于活性氧(reactive oxygen species,ROS)/核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)焦亡信号通路探讨黄连大黄药对发挥2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)胰岛β细胞保护作用... 目的基于活性氧(reactive oxygen species,ROS)/核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)焦亡信号通路探讨黄连大黄药对发挥2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)胰岛β细胞保护作用的分子机制。方法选取自发性T2DM大鼠—Goto-Kakizaki(GK)大鼠构建动物模型,24只符合成模标准的GK大鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.1 g·kg^(-1)·d^(-1))、黄连大黄高剂量组(4.72 g·kg^(-1)·d^(-1))及低剂量组(2.36 g·kg^(-1)·d^(-1)),并随机选取6只正常Wistar大鼠设为正常组,连续灌胃干预8周后采用免疫荧光法检测大鼠胰腺组织胰岛素(insulin,INS)阳性表达,RT-PCR法检测细胞增殖相关细胞周期蛋白D1(cyclin D1,CCND1)、髓细胞瘤病毒癌基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-Myc)mRNA表达,TUNEL染色检测胰岛细胞死亡,流式细胞术检测ROS水平,Western blot法检测NF-κB p65、GSDMD及消皮素D N端片段(gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白的表达,ELISA法检测白介素1β(interleukin 1β,IL^(-1)β)水平。结果与正常组比较,模型组大鼠胰腺组织INS平均光密度值显著降低,CCND1、c-Myc mRNA表达显著下调,TUNEL阳性率、ROS水平和NF-κB p65、GSDMD-N蛋白表达以及IL-1β水平均显著升高(P均<0.01);与模型组比较,黄连大黄低剂量组INS平均光密度值有效升高,CCND1、c-Myc mRNA表达有效上调,TUNEL阳性率、ROS水平以及NF-κB p65、GSDMD-N蛋白表达、IL-1β水平均明显降低(P<0.01,P<0.05),黄连大黄高剂量组仅c-Myc mRNA表达有效上调,NF-κB p65蛋白表达明显降低(P均<0.05)。结论黄连大黄药对可能通过ROS/NF-κB/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡,促进增殖进而起到保护T2DM大鼠胰岛β细胞的作用。 展开更多
关键词 2型糖尿病 胰岛Β细胞 焦亡 消皮素D 黄连大黄
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血清GSDMD、ACE2在小儿川崎病中的表达水平及临床意义研究
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作者 范泽卫 李荟 李竹青 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第4期447-451,456,共6页
目的 探索血清焦孔素蛋白D(GSDMD)、血管紧张素转化酶2(ACE2)在小儿川崎病(KD)患儿中的表达水平及临床意义。方法 收集2020年1月至2022年1月该院诊治的90例KD患儿为KD组,根据KD患儿是否发生冠状动脉损伤(CAL),将KD组分为CAL组(32例)和非... 目的 探索血清焦孔素蛋白D(GSDMD)、血管紧张素转化酶2(ACE2)在小儿川崎病(KD)患儿中的表达水平及临床意义。方法 收集2020年1月至2022年1月该院诊治的90例KD患儿为KD组,根据KD患儿是否发生冠状动脉损伤(CAL),将KD组分为CAL组(32例)和非CAL组(58例),选取同期因急性呼吸道感染发热住该院的患儿50例为发热对照组,另选取同期该院儿外科行择期手术的腹股沟斜疝患儿50例为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清GSDMD、ACE2水平。Pearson相关分析血清GSDMD、ACE2与临床指标的相关性。多因素Logisitic回归分析KD患者发生CAL的影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清GSDMD、ACE2对KD患儿发生CAL的诊断价值。结果 KD组血清GSDMD、ACE2水平高于发热对照组和对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。相比于非CAL组,CAL组KD患儿发热持续时间、丙种球蛋白治疗时间、红细胞沉降率、血小板计数、C反应蛋白、GSDMD、ACE2水平均明显较高,而血钠、白蛋白明显较低,差异有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关分析结果,KD组患儿血清GSDMD、ACE2水平与发热持续时间、丙种球蛋白治疗时间、红细胞沉降率、血小板计数、C反应蛋白呈正相关(均P<0.05),与血钠、白蛋白呈负相关(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清GSDMD、ACE2升高是影响KD患儿发生CAL的独立危险因素。ROC曲线分析结果显示,血清GSDMD、ACE2两项联合检测KD患儿发生CAL的曲线下面积(AUC)及其95%CI为0.918(0.868~0.949),明显大于血清GSDMD、ACE2单项检测的AUC及其95%CI[依次为0.838(0.789~0.887)、0.865(0.811~0.912)],差异有统计学意义(Z=5.116、4.217,均P<0.05)。结论 血清GSDMD、ACE2两项联合检测对于KD患儿发生CAL具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 川崎病 焦孔素蛋白D 血管紧张素转化酶2 冠状动脉损伤
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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨清化饮对慢性萎缩性胃炎大鼠胃上皮细胞焦亡的影响
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作者 林翔英 王鑫 +2 位作者 钟国栋 黄铭涵 林建龙 《实用中医内科杂志》 2024年第11期32-35,I0016,I0028,共6页
目的观察清化饮对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠胃上皮NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)细胞焦亡通路的影响,探讨清化饮治疗CAG的可能机制。方法随机将大鼠分为空白对照组(n=8)及... 目的观察清化饮对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠胃上皮NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)细胞焦亡通路的影响,探讨清化饮治疗CAG的可能机制。方法随机将大鼠分为空白对照组(n=8)及造模组(n=28),采用“氨水+去氧胆酸钠+乙醇法灌胃+高脂高糖饮食+人工气候箱饲养”复合法建立病证结合CAG大鼠模型,造模成功后将其随机分为模型组、维酶素治疗组和清化饮治疗组(n=8)。采用HE染色观察大鼠胃黏膜病变情况,Real-time PCR法检测胃组织NLRP3、Caspase-1、β-catenin、GSDMD mRNA表达情况,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、IL-18水平。结果与空白对照组相比,模型组大鼠炎症细胞浸润明显,胃黏膜固有腺体萎缩,胃黏膜组织中NLRP3、Caspase-1、β-catenin mRNA表达水平显著升高(P<0.01),GSDMD mRNA表达水平显著降低(P<0.01);血清IL-1β、IL-6、IL-18含量显著上升(P<0.01)。与模型组比较,清化饮治疗组胃黏膜固有腺体萎缩情况及炎症程度明显改善,NLRP3、Caspase-1、β-catenin mRNA表达蛋白表达水平均显著下降(P<0.01),GSDMD mRNA表达水平上升(P<0.01);血清IL-1β、IL-6、IL-18含量显著下降(P<0.01)。结论清化饮可有效改善CAG大鼠胃黏膜组织病理改变,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路,抑制细胞焦亡,从而降低胃黏膜炎症水平有关。 展开更多
关键词 清化饮 细胞焦亡 慢性萎缩性胃炎 NOD样受体蛋白3 胱天蛋白酶-1 消皮素D
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芪地糖肾方调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导高糖刺激肾小球内皮细胞焦亡的研究
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作者 史扬 董昭熙 +5 位作者 周盈 谢惠迪 郭燕 宿家铭 郑毅成 柳红芳 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第1期1-7,共7页
目的 探究芪地糖肾方通过NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/消皮素D蛋白(NLRP3/Caspase-1/GSDMD)通路介导高糖刺激的肾小球内皮细胞焦亡的作用。方法 将肾小球内皮细胞分为正常组、高糖组、芪地糖肾方组,... 目的 探究芪地糖肾方通过NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/消皮素D蛋白(NLRP3/Caspase-1/GSDMD)通路介导高糖刺激的肾小球内皮细胞焦亡的作用。方法 将肾小球内皮细胞分为正常组、高糖组、芪地糖肾方组,分别予完全培养基、30 mmol/L高糖培养基、30 mmol/L高糖培养基+芪地糖肾方100μg/mL培养48 h,采用细胞免疫荧光染色法观察细胞中NLRP3表达情况及细胞骨架情况,采用Western blot法检测细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、消皮素D蛋白(GSDMD)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)表达情况。结果 与正常组比较,高糖组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号增强,细胞骨架损伤明显;与高糖组比较,芪地糖肾方组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号减弱,细胞骨架损伤状态改善。结论 芪地糖肾方可通过抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡相关通路激活改善高糖诱导的肾小球内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾脏病 肾小球内皮细胞 芪地糖肾方 焦亡 NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 消皮素D蛋白
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瑞马唑仑调节NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路对LPS诱导的神经元焦亡的影响
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作者 耿长振 王利 叶兰 《检验医学与临床》 CAS 2024年第16期2436-2441,共6页
目的 探讨瑞马唑仑(REM)调节Nod样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的神经元焦亡的影响。方法 将对数期小鼠海马神经元HT22细胞随机分为正常对照组(Ctrl组)、LPS诱导... 目的 探讨瑞马唑仑(REM)调节Nod样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的神经元焦亡的影响。方法 将对数期小鼠海马神经元HT22细胞随机分为正常对照组(Ctrl组)、LPS诱导组(LPS组,10 mg/L LPS)、低浓度REM组(REM-低组,160μmol/L REM)、高浓度REM组(REM-高组,320μmol/L REM)和REM-高+NLRP3激活剂尼日利亚菌素组(REM-高+尼日利亚菌素组,320μmol/L REM+10μmol/L尼日利亚菌素)。除Ctrl组外,其余各组HT22细胞均使用LPS进行诱导。各组加药处理后,采用细胞计数试剂盒8测定HT22细胞的吸光度(A值)。采用Hoechst33342/碘化吡啶(PI)染色检测HT22细胞焦亡率。采用酶联免疫吸附试验检测HT22细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测HT22细胞中NLRP3信使RNA(mRNA)、Caspase-1 mRNA、GSDMD mRNA表达水平。采用蛋白质印迹法检测HT22细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达水平。结果 LPS组HT22细胞48、72 h的A_(450)值显著低于Ctrl组(P<0.05),而细胞焦亡率、上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,以及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达水平、ASC蛋白表达水平均显著高于Ctrl组(P<0.05)。REM-低组和REM-高组HT22细胞48、72 h的A_(450)值显著高于LPS组,且REM-高组高于REM-低组,差异均有统计学意义(P<0.05),而REM-低组和REM-高组HT22细胞焦亡率、上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,以及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达水平、ASC蛋白表达水平显著低于LPS组,且REM-高组低于REM-低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。REM-高+尼日利亚菌素组HT22细胞48、72 h的A_(450)值显著低于REM-高组(P<0.05),而细胞焦亡率、上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,以及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达水平、ASC蛋白表达水平均显著高于REM-高组(P<0.05)。结论 REM可能通过下调NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路减轻LPS诱导的神经元焦亡。 展开更多
关键词 瑞马唑仑 Nod样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1/消皮素D信号通路 脂多糖 神经元 焦亡
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急性痛风性关节炎患者外周血黑色素瘤缺乏因子2信号通路相关细胞因子及焦孔素D表达变化观察
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作者 付笛语 田竞 +3 位作者 初吉燕 郭琳 孙蕊 李萍 《山东医药》 CAS 2024年第15期25-29,共5页
目的观察急性痛风性关节炎患者外周血黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎症小体信号通路相关细胞因子[AIM2、双链DNA(dsDNA)、IL-1β、IL-18]及焦孔素D表达变化,并分析单个核细胞中AIM2、焦孔素D与急性痛风性关节炎患者病情[WBC、PLT、ESR、CRP... 目的观察急性痛风性关节炎患者外周血黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)炎症小体信号通路相关细胞因子[AIM2、双链DNA(dsDNA)、IL-1β、IL-18]及焦孔素D表达变化,并分析单个核细胞中AIM2、焦孔素D与急性痛风性关节炎患者病情[WBC、PLT、ESR、CRP、IL-1β、IL-18、BMI、UA、BUN、肌酐(SCr)、肌酐清除率(CCr)、TG、TC]的关系,以探讨AIM2炎症小体信号通路介导的细胞焦亡在急性痛风性关节炎发生、发展中的作用。方法纳入30例急性痛风性关节炎患者(观察组)和30例健康对照者(对照组),比较两组外周血单个核细胞(PBMCs)中AIM2、焦孔素D及血清中IL-1β、IL-18、双链DNA(dsDNA)水平。采用Spearman相关分析AIM2 mRNA和焦孔素D mRNA与急性痛风性关节炎患者病情相关指标(IL-1β、IL-18、WBC、PLT、ESR、CRP、BMI、UA、BUN、SCr、CCr、TG、TC)的关系。结果与对照组比较,观察组PBMCs中AIM2和焦孔素D mRNA的表达水平高(P均<0.05),血清dsDNA、IL-1β、IL-18水平高(P均<0.01)。PBMCs中AIM2 mRNA与WBC、ESR、CRP、BMI、TC、TG、sCr正相关(P均<0.05),焦孔素D mRNA与ESR、IL-1β、sCr正相关(P均<0.05)。结论急性痛风性关节炎患者外周血PBMCs中AIM2、焦孔素D及血清中dsDNA、IL-1β、IL-18水平均升高,AIM2炎症小体介导的细胞焦亡可能参与了急性痛风性关节炎的发生、发展。 展开更多
关键词 炎症小体 黑素瘤缺乏因子2 焦孔素D 双链DNA 白细胞介素1Β 白细胞介素18 细胞焦亡 痛风性关节炎
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老年冠心病伴冠状动脉钙化患者糖脂代谢、血清GSDMD、IL-18水平及其风险预警模型的研究
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作者 海平 章启勇 +1 位作者 梅能 张红 《中国循证心血管医学杂志》 2024年第9期1119-1123,共5页
目的研究老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)伴冠状动脉钙化患者糖脂代谢、血清消皮素D(GSDMD)、白介素-18(IL-18)水平变化及其风险预警模型。方法选择2022年12月至2023年10月于无为市人民医院确诊的冠心病患者350例作为观察对象。... 目的研究老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)伴冠状动脉钙化患者糖脂代谢、血清消皮素D(GSDMD)、白介素-18(IL-18)水平变化及其风险预警模型。方法选择2022年12月至2023年10月于无为市人民医院确诊的冠心病患者350例作为观察对象。通过冠状动脉CT血管造影(CCTA)评估冠状动脉钙化积分(CACs),将患者分为CAC组(CACs≥10分,280例)及非CAC组(CACs<10分,70例)。比较两组患者基线资料。采用Logistic回归分析模型,分析冠心病CAC的独立危险因素。并据此构建列线图以及ROC曲线。结果两组在年龄、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、胰岛素抵抗(IR)、GSDMD、IL-18比较,有统计学差异(P<0.05)。经单因素筛选得出,年龄、FBG、TG、LDL-C、IR、GSDMD、IL-18可能为老年冠心病患者冠状动脉钙化的影响因素。通过Logistic回归分析得知,年龄≥65岁、高血糖、高TG、高LDL-C、高IR、高GSDMD、高IL-18为老年冠心病患者发生冠状动脉钙化的危险因素(P<0.05)。据此构建列线图模型得出,Bias-corrected预测曲线与Ideal线基本吻合,说明该模型预测患者出现冠状动脉钙化与实际风险一致性良好。该模型的决策曲线显示,其在阈值概率范围0.04~1.00之间表现出净收益率大于0的特点,超过了两条无效线。通过ROC分析显示,联合预测指标的AUC为0.888,大于单项指标的AUC,说明其对老年冠心病患者伴冠状动脉钙化有良好的区分度。结论年龄≥65岁、高血糖、高TG、高LDL-C、高IR、高GSDMD、高IL-18均为老年冠心病患者发生冠状动脉钙化的危险因素。 展开更多
关键词 老年冠心病 冠状动脉钙化 糖脂代谢 血清GSDMD 白介素-18
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细胞焦亡在急性肾损伤中的研究进展 被引量:3
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作者 王敏 张利鹏 《中国中西医结合急救杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期117-120,共4页
急性肾损伤(AKI)的主要病理特征是肾脏毛细血管内皮损伤引起的血管功能障碍、强烈的炎症反应和肾小管上皮细胞(TEC)损伤。细胞焦亡是由内源性细胞损伤〔损伤相关分子模式(DAMPs)〕或外源性细菌、病毒〔病原体相关分子模式(PAMPs)〕激活... 急性肾损伤(AKI)的主要病理特征是肾脏毛细血管内皮损伤引起的血管功能障碍、强烈的炎症反应和肾小管上皮细胞(TEC)损伤。细胞焦亡是由内源性细胞损伤〔损伤相关分子模式(DAMPs)〕或外源性细菌、病毒〔病原体相关分子模式(PAMPs)〕激活炎症小体相继引发下游信号活跃度增加的级联放大反应,是可导致细胞膜破坏且内容物大量释放的一种区别于凋亡的细胞死亡方式。近年来焦亡与AKI的关系也不断被报道且广受关注。现重点对细胞焦亡的分子机制及细胞焦亡与AKI关系的相关研究成果进行综述,以期为今后临床医生防治AKI提供帮助。 展开更多
关键词 焦亡 急性肾损伤 NOD样受体蛋白3 Gasdermin D 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-1/11
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PANoptosis-like cell death in ischemia/reperfusion injury of retinal neurons 被引量:10
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作者 Wei-Tao Yan Wen-Juan Zhao +5 位作者 Xi-Min Hu Xiao-Xia Ban Wen-Ya Ning Hao Wan Qi Zhang Kun Xiong 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期357-363,共7页
PANoptosis is a newly identified type of regulated cell death that consists of pyroptosis,apoptosis,and nec roptosis,which simultaneously occur during the pathophysiological process of infectious and inflammatory dise... PANoptosis is a newly identified type of regulated cell death that consists of pyroptosis,apoptosis,and nec roptosis,which simultaneously occur during the pathophysiological process of infectious and inflammatory diseases.Although our previous lite rature mining study suggested that PANoptosis might occur in neuronal ischemia/repe rfusion injury,little experimental research has been reported on the existence of PANoptosis.In this study,we used in vivo and in vitro retinal neuronal models of ischemia/repe rfusion injury to investigate whether PAN optosis-like cell death(simultaneous occurrence of pyroptosis,apo ptosis,and necroptosis)exists in retinal neuronal ischemia/repe rfusion injury.Our results showed that ischemia/repe rfusion injury induced changes in morphological features and protein levels that indicate PANoptosis-like cell death in retinal neurons both in vitro and in vivo.Ischemia/repe rfusion inju ry also significantly upregulated caspase-1,caspase-8,and NLRP3 expression,which are important components of the PANoptosome.These results indicate the existence of PANoptosis-like cell death in ischemia/reperfusion injury of retinal neurons and provide preliminary experimental evidence for future study of this new type of regulated cell death. 展开更多
关键词 apoptosis gasdermin-d(GSDMD) ISCHEMIA/REPERFUSION mixed lineage kinase domain-like protein(MLKL) NECROPTOSIS NOD-like receptor protein 3(NLRP3) PANoptosis PYROPTOSIS receptor-interacting protein kinase 3(RIPK3) retinal neuron
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甘草附子汤加减方通过抑制GSDMD介导的焦亡治疗CIA大鼠的作用机制研究 被引量:4
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作者 张铭 吴天宇 +7 位作者 刘小碣 张妍 何晓宇 刘赛赛 赵士弟 陈莉秋 陈传好 张小楠 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期325-334,共10页
目的:探讨甘草附子汤加减方(GCFZD)抑制gasdermin D (GSDMD)介导细胞焦亡途径对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果。方法:SD大鼠尾跟部注射由牛Ⅱ型胶原与弗氏佐剂混合形成的乳化剂,构建CIA大鼠模型并对其关节炎指数进行评估,将成功... 目的:探讨甘草附子汤加减方(GCFZD)抑制gasdermin D (GSDMD)介导细胞焦亡途径对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果。方法:SD大鼠尾跟部注射由牛Ⅱ型胶原与弗氏佐剂混合形成的乳化剂,构建CIA大鼠模型并对其关节炎指数进行评估,将成功诱发关节炎的30只雄性SD大鼠随机分为模型组、甘草附子汤低(4 g/kg)、中(8 g/kg)和高(16 g/kg)剂量组及甲氨蝶呤(1 mg/kg)组,每组6只,连续给药30 d。测定大鼠的体重、关节炎指数和足爪肿胀指数;X线影像学观察骨质破坏和软组织厚度改变;HE染色观察脾脏和关节组织病理学改变;番红O-固绿染色观察关节软骨改变;TUNEL染色观察关节内细胞焦亡发生情况;Western blot测定TLR4、caspase-1、NLRP3和GSDMD蛋白表达;real-time PCR和ELISA测定IL-1β、IL-6和IL-10细胞因子表达。结果:与模型组相比,GCFZD治疗显著改善CIA大鼠软组织肿胀和骨质破坏,降低脾脏和胸腺指数;HE染色结果显示,GCFZD治疗减轻CIA大鼠脾脏和踝关节组织病理学改变;番红O-固绿染色结果显示,GCFZD治疗减少软骨组织破坏,修复软骨结构;TUNEL染色结果显示,GCFZD显著抑制关节组织内的细胞焦亡;Western blot结果表明,GCFZD降低CIA大鼠脾脏中TLR4、cleaved caspase-1、NLRP3和GSDMD-N的蛋白表达;real-time PCR和ELISA结果显示,GCFZD减少CIA大鼠IL-1β和IL-6的mRNA和蛋白水平的表达,上调IL-10的mRNA和蛋白水平的表达。结论:GCFZD能够抑制GSDMD介导的细胞焦亡,减少IL-1β和IL-6分泌,促进IL-10分泌,有效减轻CIA大鼠的类风湿关节炎症状。 展开更多
关键词 甘草附子汤 类风湿关节炎 gasdermin D 细胞焦亡
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高氧暴露BPD小鼠模型中巨噬细胞焦亡的检测及意义 被引量:1
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作者 涂子坤 高雅静 +2 位作者 韩晓 郭海艳 周玉峰 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期791-801,共11页
目的 探讨巨噬细胞焦亡是否参与支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的肺病理损伤。方法 40只足月新生小鼠随机分为空气(room air,RA)组和高氧(hyperoxia,HO)组,每组20只。建立慢性高氧诱导的BPD小鼠模型。HE染色评估小... 目的 探讨巨噬细胞焦亡是否参与支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的肺病理损伤。方法 40只足月新生小鼠随机分为空气(room air,RA)组和高氧(hyperoxia,HO)组,每组20只。建立慢性高氧诱导的BPD小鼠模型。HE染色评估小鼠的肺泡化情况;CD31免疫组化检测肺血管发育状况;Masson染色分析肺组织的纤维化程度;qRT-PCR检测肺组织中的炎症因子和趋化因子(Il6、Il1b、Mmp12、Ccl2、Ccl5、Il8)基因表达水平;ELISA检测血清和肺组织匀浆中的IL-1β水平;Western blot检测细胞焦亡通路的关键蛋白NLRP3、Caspase-1 p20、N-消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、IL-1β表达;流式分析支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞比例;免疫荧光检测F4/80与NLRP3/Caspase-1/IL-1β的共定位;免疫组化分析AQP5的表达水平。结果 与RA组相比,HO组小鼠的肺泡化阻滞和肺血管生成障碍,肺纤维化显著增加;肺组织中促炎细胞因子的表达显著上调,细胞焦亡相关蛋白表达水平显著增加,血清和肺组织匀浆中IL-1β水平显著升高;支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞比例显著升高,肺组织中F4/80与NLRP3、Caspase-1、IL-1β均存在显著的免疫荧光共定位现象,AQP5阳性的肺泡Ⅰ型上皮细胞严重受损。结论 高氧诱导的BPD小鼠模型中,NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路过度活化,可能导致BPD的肺部病理损伤。 展开更多
关键词 支气管肺发育不良(BPD) 消皮素D(GSDMD) 巨噬细胞 焦亡 小鼠
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