Bmi-1、cyclin D1、p16在胃癌中的表达及意义

目的探讨细胞周期调控因子Bmi-1、cyclin D1、p16在胃癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测15例正常胃黏膜组织、35例不典型增生和60例胃癌组织中Bmi-1、cyclin D1、p16的表达。结果胃癌组织中Bmi-1和cyclin D1的表达显著高于在正常胃黏膜组织和不典型增生中的表达(P<0.01),p16的表达显著低于在正常胃黏膜组织和不典型增生中的表达(P<0.01)。Bmi-1的表达与胃癌瘤体大小、肿瘤分化、淋巴结转移、临床分期密切相关(P<0.05);cyclin D1的表达与瘤体大小、肿瘤分化、临床分期密切相关(P<0.05);p16的表达与瘤体大小、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。Bmi-1与cyclin D1在胃癌组织中的表达呈正相关(P<0.05),Bmi-1与p16的表达呈负相关(P<0.05),cyclin D1与p16的表达也呈负相关(P<0.05)。结论Bmi-1、cyclin D1、p16与胃癌的发生、发展有关,它们可能是通过bmi-1-p16-cyclinD1通路来相互影响相互作用,从而影响胃癌的发生发展。

Bmi-1在正常胃组织和胃癌及其癌前病变中的表达及意义

目的：检测Bmi-1在正常胃粘膜、胃癌及癌前病变中的表达，分析探讨Bmi—1与核增殖抗原ki-67和凋亡抑制基因Bcl-2之间的关系，以及Bmi-1^＋细胞与Bcl-2^＋／ki-67^-细胞分布之间的关系，探讨其与胃癌临床病理因素的关系及意义。方法：采用免疫组化Envision法检测162例胃癌及配对正常胃粘膜中Bmi-1和ki-67的表达，采用免疫组化双染法观察Bcl-2^＋／ki-67^-细胞的分布。结果：胃癌组织中Bmi-1表达（52．5％）明显高于正常胃粘膜（21．6％），P〈0．05；胃癌中Bmi-1表达与Lauren分型、Borrmann分型和胃癌临床病理分期有关（P〈0．05）。胃癌中ki-67表达与Borrmann分型有关（P〈0．05）。Bcl-2在胃癌中的表达与胃癌Lauren分型有关（P〈0．05）。在胃癌组织和肠化生粘膜中，Bmi-1与Bcl-2呈正相关（P〈0．05）。结论：胃癌及其癌前病变中Bmi-1表达可能与细胞增殖、凋亡和癌变有关。在胃癌和肠化生粘膜中Bmi-1和Bcl-2表达的相关性以及Bmi-1^＋细胞和Bcl-2^＋／ki-67^-细胞分布之间的关系提示Bmi-1与胃癌的发生密切相关。

Bmi-1基因对胃癌细胞增殖的影响及机制

目的:探索干扰Bmi-1基因后对其可能的下游基因Akt/PKB活性和P16INK4a基因表达的影响及对肿瘤细胞增殖和细胞衰老的作用.方法:用siRNA技术干扰Bmi-1表达后,运用Western blot检测Bmi-1蛋白及相关蛋白pAkt、Akt和P16INK4a的表达,同时进行SA-β-Gal染色检测细胞衰老,软琼脂克隆形成实验检测细胞的增殖能力.结果:转染Bmi-1 i质粒组平均细胞衰老率28%±3.5%,而对照Ctrli组为16%±2.7%,有明显统计学差异(P<0.01).转染Bmi-1 i质粒组细胞平均克隆形成数为3.4±1.4个,而对照Ctrli组为11±2.3个,两组比较有明显的统计学差异(P<0.01).Bmi-1 i组较Ctrli组Bmi-1和pAkt蛋白表达明显下降,而P16INK4a蛋白表达升高.结论:干扰Bmi-1可以通过降低Akt/PKB活性和上调P16INK4a蛋白表达,促进肿瘤细胞衰老并减弱肿瘤细胞的增殖能力.

RNAi技术沉默Bmi-1基因对人胃癌AGS细胞株的作用

目的:探讨RNA干扰(RNAi)技术沉默Bmi-1基因表达对人胃癌细胞株AGS增殖和侵袭能力的影响。方法:利用慢病毒表达体系pHelper1.0/pHelper2.0/pGCL-GFP,构建针对Bmi-1基因shRNA序列的RNAi重组质粒vshRNA-Bmi-1,转染AGS细胞,采用Western blot检测重组质粒对Bmi-1蛋白表达的影响,MTT法检测重组质粒对AGS细胞体外生长的抑制作用,PI单染法流式细胞术检测转染重组质粒后细胞凋亡与细胞周期的变化,小室侵袭实验检测AGS细胞侵袭能力变化。结果:成功构建了vshRNA-Bmi-1重组质粒,并成功转染AGS细胞抑制Bmi-1蛋白的表达。转染重组质粒后,AGS细胞增殖明显受到抑制,细胞凋亡增加,S期比例上升,细胞侵袭能力弱于非特异性转染组。结论:vshRNA-Bmi-1重组质粒明显下调Bmi-1蛋白在AGS胃癌细胞中的表达,并抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭,促进其凋亡。

胃癌组织中Bmi-1基因表达的研究

目的:多梳基因家族的Bmi-1被认为是一种癌基因,在多种肿瘤组织中均有表达。本研究主要是检测Bmi-1基因在胃癌组织中的表达及探讨其临床意义。方法:应用RT-PCR和Western blotting方法检测45例胃癌中Bmi-1基因的表达情况,并结合患者的临床病理资料分析与其相关性。结果:Bmi-1基因阳性表达率在胃癌中为88.9%(40/45),癌旁组织为17.7%(8/45),差异有显著性(P<0.05);Bmi-1基因阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小及有无淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度及TNM分期有关(P<0.05)结论:Bmi-1基因在胃癌中高表达,与胃癌的疾病进展密切相关,检测Bmi-1的表达可作为胃癌生物学行为的一项评估指标。

Bmi-1和MMP-9在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨原癌基因蛋白-1(Bmi-1)和金属蛋白酶-9(MMP-9)在胃癌组织中蛋白表达情况及其临床病理意义。方法采用微波Eli VisionTM免疫组织化学法检测56例胃癌组织(实验组)中Bmi-1和MMP-9的表达情况,并与40例正常胃组织(对照组)进行比较。结果 Bmi-1蛋白和MMP-9蛋白阳性信号分别定位于细胞核和细胞浆;Bmi-1在实验组和对照组中表达分别为76.79%(43/56)和27.50%(11/40);MMP-9在实验组和对照组中表达情况分别为83.93%(47/56)和35.00%(14/40),Bmi-1和MMP-9在组间的表达差异有统计学意义(P<0.05)。两者在实验组中的表达均与肿瘤的分化程度、c TNM和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。两者在实验组中的表达呈正相关(P<0.05)。结论 Bmi-1蛋白和MMP-9蛋白在胃癌呈高表达,且与胃癌的发生、发展和转移过程中起到一定的作用。

Bmi-1基因RNA干扰对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响

目的构建针对Bmi-1基因的RNAi表达载体，观察其对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响。方法利用慢病毒表达体系pHelperl．0／pHelper2．0／pGCL—GFP，成功构建针对Bmi-1基因的RNAi重组质粒vshRNA—Bmi-1，适时定量PCR（real—timePCR）检测稳定转染后胃癌细胞SGC-7901中Bmi-1mRNA表达，流式细胞术检测细胞凋亡，MTr法检测其增殖能力。结果稳定转染vshRNA—Bmi-1后SGC-7901细胞Bmi-1mRNA表达明显下降，总抑制效率达85％；癌细胞增殖减慢，凋亡率明显增加。结论构建针对Bmi-1基因的RNAi表达载体，成功转染胃癌细胞SGC-7901，可促进癌细胞凋亡，抑制其增殖能力。