变形链球菌GbpB融合蛋白免疫SD大鼠实验研究

目的 研究变形链球菌GbpB融合蛋白免疫SD大鼠时 ,其所诱导的血清和唾液的特异性免疫反应。方法 用纯化的变形链球菌GbpB融合蛋白皮下免疫SD大鼠 ,免疫后间隔一定时间收集大鼠的血清及唾液 ,间接ELISA检测血清及唾液中特异性抗GbpB抗体。结果 GbpB融合蛋白免疫大鼠 ,可引起血清中IgG及唾液中IgA的显著提高。另外 ,GbpB融合蛋白免疫大鼠 ,3 8天采血 ,血清中抗GbpB抗体效价最高 ,以后逐渐降低。结论 变形链球菌GbpB融合蛋白具有免疫原性 ,可供研制防龋疫苗。

唾液覆盖基托材料对变形链球菌gbpB基因表达的影响

目的:比较不同基托材料被唾液覆盖前后变形链球菌gbpB基因表达的差异。方法:将各组材料分为唾液覆盖组和未覆盖组,于体外厌氧环境下(95%N2,5%CO2,37℃,16h)在材料表面形成变形链球菌生物膜,收集生物膜菌体,提取总RNA,逆转录。实时荧光定量PCR方法检测各组样本gbpB基因的表达差异。结果:唾液未覆盖组中,热固性基托树脂表面gbpB表达最高(P<0.05),钴铬合金与瓷无显著性差异。唾液覆盖组中,各组试件表面gbpB表达均较唾液未覆盖组有所降低,材料之间无显著性差异(P>0.05)。结论:不同材料表面gbpB表达量存在一定的差异,热固型基托树脂表面gbpB表达量最高,唾液可能对gbpB的表达产生一定的抑制作用。

变形链球菌葡聚糖结合蛋白B的纯化

目的 :从变形链球菌S .mutansIngbritt (serotypec)培养液上清中纯化葡聚糖结合蛋白B。方法 :SephadxG - 2 0 0凝胶 (α - 1,6键葡聚糖 )亲和层析和Q -SephroseFF离子交换层析。结果 :纯化出约 10 μg具有葡聚糖结合特性的GbpB蛋白。结论 :通过SephadxG - 2 0 0凝胶 (α - 1,6键葡聚糖 )亲和层析和Q -SephroseFF离子交换层析纯化出变链菌葡聚糖结合蛋白B。

变形链球菌致龋抗原基因在乳酸乳球菌的表达

目的克隆变形链球菌葡聚糖结合蛋白B(GbpB)功能区的基因片段,并在乳酸乳球菌中表达。方法在实验中利用了分子克隆技术构建携带GbpB基因的重组原核表达质粒pNI1,将重组质粒转化乳酸乳球菌YF02株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的GbpB蛋白用SDS-PAGE进行鉴定。结果成功克隆了GbpB功能区的基因片段,并在乳酸乳球菌中得到其融合蛋白的表达。结论利用分子生物学技术能够成功克隆GbpB功能区基因并获得乳酸乳球菌融合蛋白的表达,为后续研究奠定了基础。

变形链球菌葡聚糖结合蛋白B功能区片段的分子克隆及表达

目的 :克隆变形链球菌葡聚糖结合蛋白B(GbpB)功能区的基因片段 ,并在大肠杆菌中表达。方法 :通过PCR技术克隆GbpB功能区的基因片段并通过蛋白重组融合表达技术使其在大肠杆菌中表达。 结果 :成功克隆了GbpB功能区的基因片段 ,并在大肠杆菌中得到其融合蛋白的表达。 结论 :利用分子生物学技术能够成功克隆GbpB功能区基因并获得其融合蛋白的表达 。