石墨烯负载铜纳米粒子的制备及其催化性能研究

采用液相还原法制备了石墨烯负载铜纳米粒子(Graphene-copper nanocomposite,GCNC),对样品的形貌、晶体结构和热分解性能进行了表征和测试。结果表明:氧化石墨烯(GO)和石墨烯(r GO)呈薄片状且片层厚度较薄,铜纳米粒子均匀地负载在石墨烯薄层上。将GCNC与高氯酸铵(AP)进行复合,发现GCNC的添加质量分数为5%时,对AP的催化效果最好。分解的活化能从187.9k J/mol降到了136.5k J/mol。本研究表明GCNC对AP具有很好的催化效果。

药物靶向调控ID4基因表达的生物信息学预测与分析

ID4基因低表达与肿瘤发生关系密切,其高表达具有明确的抗白血病作用,但在白血病细胞无表达。本研究初步通过生物信息学方法分析ID4基因启动子的结构,预测调控ID4基因表达的顺式元件及相关药物,为筛选有靶向调控ID4基因表达的药物创造前提。以人类基因组数据库和计算机互联网为平台,钓取ID4基因5′侧翼区3000bp非编码DNA序列和mRNA序列中的ORF序列;利用TESS和Genomax等在线启动子分析软件在人类转录因子数据库中搜索可能存在的顺式结构;利用SAGE和GEO数据库对影响ID4基因表达的相关因素进行分析。结果表明:ID4基因具有II型启动子,在5'-非翻译区的-45bp处有1个典型的TATA盒。在长度为1300bp的ID4启动子区,存在多个顺式结构,其中包括Sp1、c-Myb、abaA、C/EBPalpha、GR、ERE和Zeste可能具有正向调控作用;CCAAT-bindingfactor、GCF、WT1-KTS、HiNF-C和EGR2可能具有负向调控作用。结论:ID4基因的表达可能受糖皮质激素、雌激素、甲状腺素和卵泡刺激素等多种活性物质的调控。

浙江省啮齿动物、牛和羊感染的无形体种属

目的鉴定浙江省啮齿动物和家畜中存在的无形体种属,分析其16SrRNA基因变异。方法在浙江省部分山区,采集啮齿动物肝脾和家畜全血,巢式PCR扩增无形体属16SrRNA片段并测序,多序列比对和系统发生分析。结果浙江省啮齿动物、牛和山羊中检测到的16SrRNA基因序列分布在6个无形体种群中,包括嗜吞噬细胞无形体、牛无形体、边缘无形体、血小板无形体,而新被认识的山羊无形体新种被证实一直存在于牛和羊中。啮齿动物除了存在嗜吞噬细胞无形体感染外,本文首次报道社鼠、黄毛鼠和青毛鼠中还存在牛无形体感染。另外,发现广泛存在于野鼠中与牛无形体相关但不同的一个无形体新种。结论浙江省的啮齿动物和家畜中至少存在6个无形体种,推测存在潜在的变异和新种,还不清楚基因多样性是否会导致发病率、致病性或临床特征上的一些变化。

双重靶向条件复制型腺病毒的包装及抗肿瘤作用

目的构建并包装以人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子调控E1A(CR2区缺失)蛋白表达的肿瘤细胞双重靶向条件复制型腺病毒(conditionally replicating adenovirus,CRAd),并探讨其对肿瘤细胞的抑制作用。方法采用PCR技术扩增hTERT启动子序列,将其克隆至pShuttle-E1A-E1Bp-E1B55K载体(E1A基因CR2区缺失)中,构建重组腺病毒质粒,并转染HEK293细胞进行病毒包装,PCR鉴定;CCK-8法检测重组腺病毒(CRAd.p-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K,简称CRAd.p)对肿瘤细胞的抑制作用。结果 hTERT启动子序列克隆正确;pShuttle-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K经KpnⅠ单酶切可见1 542bp和6 775bp两条电泳带,PCR鉴定得到250、1 148bp和298bp基因片段;CRAd.p经PCR扩增得到250、1 148bp和298bp基因片段,鉴定结果与预期完全相符;CRAd.p感染MCF-7、MDA-MB-231、HepG2和HTC-8细胞72h后与各自对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);CRAd.p感染MDA-MB-231细胞后10～250MOI组细胞吸光度值与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),随着感染时间延长,抑制作用越发明显。结论成功获得对肿瘤细胞具有双重靶向和溶瘤作用的条件复制型腺病毒,为基因治疗的靶向性和有效性提供了可能。

云南稻种矮源的进一步筛选及其矮生性的遗传研究

从云南稻种资源中进一步筛选鉴定出表现为真正矮秆的3个云南稻种;并对其进行遗传研究。结果表明,2个籼稻矮杆品种其矮生性均受与sd_1等位的一对隐性矮生基因控制。而1个粳稻矮杆品种则受制于多基因;株高与其各构成因素间具有极显著的正相关,各性状与穗粒数的相关中,以株高的相关性最大。其次是第Ⅰ节间长。

垂体瘤转化基因在垂体大腺瘤中表达的研究

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)在垂体大腺瘤中的表达及意义。方法收集经手术和病理证实的垂体大腺瘤患者40例,其中无功能腺瘤22例,生长激素(GH)腺瘤8例,泌乳素(PRL)腺瘤10例。同期经手术和病理证实的垂体微腺瘤11例为对照组,其中促肾上腺皮质激素(ACTH)腺瘤8例,PRL腺瘤3例。采用免疫组化技术(LSAB法)检测垂体大腺瘤和垂体微腺瘤中PTTG的表达水平。结合临床资料及影像学分级标准,分析PTTG表达水平与垂体大腺瘤发生机制、生物学行为之间的联系。结果40例垂体大腺瘤中均发现PTTG的表达显著高于垂体微腺瘤组(P<0.01)。在侵袭性垂体大腺瘤中,PTTG的表达显著高于非侵袭性垂体大腺瘤(P<0.01),PTTG的表达与大腺瘤向鞍上生长的高度和向海绵窦侵袭性生长的程度显著相关(P<0.05)。结论PTTG表达增高与垂体大腺瘤的生长以及肿瘤的侵袭性密切相关。PTTG的表达水平及结合影像学资料可以为患者预后及术后的辅助治疗提供可靠的判断依据。

豌豆数量性状的基因效应分析

本文对2个豌豆组合的P_1、P_2、F_1、F_2、B_1、B_2和F_3七个世代群体的资料用加性-显性模型和加性-显性-上位性模型估算了12个数量性状的基因效应。结果表明;加性效应是所研究性状的一个重要遗传分量,对不同分析模型表现稳定。显性效应对性状遗传的控制组合间变化较大,对不同分析模型较不稳定。营养生长期日数、百粒重具显著的上位性效应。显性×显性互作比加性×加性和加性×显性互作更为显著。直接采用加性-显性-上位性模型分析性状世代平均数基因效果更好。

累及11p15上NUP98基因的急性杂合性白血病的临床遗传学分析

目的运用细胞遗传学和分子遗传学方法，阐明1例与NUP98基因相关的急性杂合性白血病的临床遗传学特点。方法采用骨髓直接法和短期培养法制备染色体，应用R显带技术进行核型分析；采用3号和11号整条染色体涂染探针进行染色体涂染。用地高辛标记的跨越NUP98基因的BACRP11-120E20探针进行间期和中期荧光原位杂交（FISH）检测。结果R显带分析显示47，XX，t（3；11）（q13；pl5），＋21；染色体涂抹证实3号和11号染色体之间发生了相互易位；间期和中期nsH均显示该染色体异常累及NuP98基因。结论识别一种累及NuP98基因的新的染色体易位，为下一步研究NuP98基因新的对手基因及其在白血病发病中的作用机制打下基础。

马立克氏病毒A抗原基因所在片段的鉴定及亚克隆

根据已知A抗原基因设计并人工合成了两段寡聚核苷酸片段并进行末端标记作为探针,与pAcyc184 MDV BamHI-B 质粒经过 EcoRI、pvu Ⅱ酶切电泳后作 Southern 转印杂交,其中2.2kb 片段杂交阳性.将此片段与 pBluescript(PBS)载体连接转化 E.coli JM109菌株,经原位杂交、酶切分析鉴定,得到3株 pBSA2.2k 阳性克隆.进一步酶切证明,A 抗原基因存在于此片段中.

激光诱导碳纳米笼对细菌的杀伤作用

以羰基铁为前驱体合成了由石墨壳层构成的石墨化碳纳米笼(graphic carbon nanocages,GCNCs).在671nm激光照射下,该GCNCs迅速将光能转化为热能.0.1mg/mL的GCNCs在低功率密度的671nm激光照射15 min的情况下,可将大肠杆菌杀灭,而单独激光照射不会影响细菌活性.由于GCNCs的内部空腔可装载药物,因此在多模式杀菌领域,GCNCs将会是一种性能优异的新型载体.

抑癌基因p53密码子偏好性分析及其突变致癌预测

p53是人类恶性肿瘤中最常见的突变基因,与人类肿瘤的发生相关性最高,也是基因研究中热度最高的基因之一。为深入研究人类p53基因突变机理,选取了6条人类p53基因mRNA序列。首先,利用基于RSCU方法下的多重变量分析软件CodonW对影响密码子使用的各项参数进行计算和统计分析,分析可得,密码子适应指数(CAI)与最优密码子使用频率(FOP)、密码子偏爱指数(CBI)均呈极显著正相关(p<0.01);有效密码子数(ENC)与密码子偏爱指数(CBI)、GC含量、GC3s、最优密码子使用频率(FOP)、第三位碱基G3s、密码子适应指数(CAI)均呈极显著负相关(p<0.01)。然后,再利用QRSCU编码方法,对p53密码子偏好性间距进行了分析设计,得出了基于拟氨基酸编码的方法能充分体现p53密码子对同义密码子的一致偏好性的结论,且p53基因更偏好使用以c或g结尾的同义密码子。以上各项参数也充分验证了拟氨基酸编码方法与p53密码子偏好性研究结果的紧密关联性。最后,结合前人对抑癌基因p53突变致癌的研究,对该6条基因序列作了病变预测,从而为人类恶性肿瘤的预防和预测提供重要的理论依据。