壁虎醇提物对人食管癌EC-109细胞增殖抑制作用及其机制研究

目的:研究壁虎醇提物(Gecko alcohol extract,GAE)对人食管癌EC-109细胞的增殖抑制作用及其机制。方法:MTT法检测GAE对细胞增殖抑制作用;Hoechest 33342荧光染色观察细胞形态学的改变;流式细胞术检测凋亡率;SP免疫组化法检测Fas和Caspase-3蛋白的表达。结果:GAE具有抑制食管癌EC-109细胞增殖的作用;3.0mg/mL、4.0 mg/mL GAE作用细胞48 h后凋亡率分别为20.60%和37.93%;与正常对照组相比GAE组Fas蛋白和Caspase-3蛋白的表达显著增加(P<0.05)。结论:GAE能够抑制EC-109细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加Fas蛋白和Caspase3蛋白的表达有关。

壁虎醇提物抗肿瘤及增效减毒作用的研究

目的:研究壁虎醇提物对S180小鼠的抗肿瘤作用及其对化疗药物环磷酰胺(CTX)的增效减毒作用。方法:以S180荷瘤小鼠为模型,观察不同剂量的壁虎醇提物的抑瘤率,ELISA法测定小鼠血清TNF-α的含量。腹腔注射壁虎醇提物与CTX(20 mg/kg)联合用药12 d后,检测各组小鼠的抑瘤率、外周血白细胞数、脾指数、胸腺指数等指标,分析壁虎醇提物对CTX的增效减毒作用。结果:不同剂量的壁虎醇提物(0.6、1.2、2.4 g/kg)均可抑制S180肉瘤在昆明小鼠体内生长,抑瘤率分别为44.88%、63.94%、69.53%,对小鼠血清TNF-α含量影响不明显。单用CTX组抑瘤率为46.17%,联用壁虎醇提物低、中、高剂量组的抑瘤率分别为56.93%、67.15%、70.24%,与单用CTX组抑瘤率比较(P<0.01)。壁虎醇提物各组联用CTX,与单用CTX组比较,可不同程度地升高荷瘤小鼠的白细胞数(P<0.01)和胸腺指数、脾指数(P<0.05)。结论:壁虎醇提物对S180荷瘤小鼠具有抗肿瘤作用,对化疗药物CTX具有增效减毒作用。

壁虎提取物对U_(14)荷瘤鼠的药效研究

目的:研究壁虎不同方式提取物对U14荷瘤鼠的抗肿瘤作用。方法:制备小鼠U14肿瘤模型,观察壁虎全粉、壁虎水提物及壁虎水提醇沉物对U14荷瘤鼠的抑瘤效果。结果:生药量相等的壁虎全粉①组、壁虎水提物①组、壁虎醇沉物组肿瘤抑瘤率分别为24.27%、43.37%、48.41%;给药重量相等壁虎醇沉物组、壁虎水提物②组、壁虎全粉②组的肿瘤抑瘤率分别为48.41%、40.05%和6.23%,CTX组、壁虎水提物①组、壁虎醇沉物组与对照组比较差异极显著(P<0.01),其余各组抑瘤率比较无明显差异(P>0.05)。结论:壁虎水提醇沉物中对肿瘤有抑制作用的有效成分比较富集。

壁虎醇提物急性毒性研究

目的观察壁虎醇提物对小白鼠的急性毒性作用。方法运用急性毒性的实验进行半数致死量(LD50)的计算。预实验用较大范围壁虎醇提物试液少量动物进行实验求出致死范围,然后在全数致死量和零致死量之间将实验用小白鼠分为5组,计算各组剂量公比,每组10只雄性小白鼠,进行正式实验,将实验结果记录后运用改良寇氏法进行计算。结果灌胃给予壁虎醇提物,小鼠无死亡出现,但活动减少,反应迟钝,1 h后恢复正常,小白鼠每日灌胃的最大耐受量(MTD)为48.0 g·kg-1。经腹腔注射给药的LD50为6.475 g·kg-1,95%可信限为6.862~6.088 g·kg^(-1)。结论壁虎醇提物毒性极小,临床应用相对较安全。

壁虎醇提物对人食管鳞癌细胞EC9706的作用和体内抗肿瘤活性

目的：观察壁虎醇提物体内外抗肿瘤作用。方法：体外实验采用四噻唑蓝法（MTT）检测壁虎醇提物对人食管鳞癌细胞EC9706的增殖抑制作用;采用Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡的形态改变;采用TUNEL法检测细胞凋亡率;采用SP免疫组化法检测细胞内凋亡蛋白Bax和Bc l-2的表达。体内实验以小鼠S180肉瘤为模型,观察壁虎醇提物对肿瘤生长的抑制作用。结果：6-8 g.L-1壁虎醇提物作用于细胞24,48,72 h后能够明显抑制EC9706食管鳞癌细胞株的生长（P（0.01）,抑制作用呈剂量和时间依赖性;Hoechst33258荧光染色可见凋亡细胞;6,7 g.L-1壁虎醇提物处理组细胞凋亡率高于阴性对照组（P〈0.05,P〈0.01）,凋亡率分别为（12.73±3.84）%,（19.80±2.32）%;免疫组化结果显示细胞内Bc l-2蛋白无明显变化,而Bax蛋白表达升高（P（0.01）,Bax/Bc l-2升高。不同剂量的壁虎醇提物（0.6,1.2,2.4 g.kg-1）均可抑制S180肉瘤在昆明小鼠体内生长,抑瘤率分别为44.88%,63.94%,69.53%。结论：壁虎醇提物体内体外具有抗肿瘤作用,体外诱导EC9706细胞凋亡的作用机制可能与凋亡相关蛋白Bax/Bc l-2升高有关。

壁虎醇提物体外诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡及机制研究

目的:研究壁虎醇提物(GAE)体外诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡作用及其可能机制,为激素非依赖性前列腺癌的治疗提供理论依据。方法:以前列腺癌PC-3细胞为研究对象,MTT法检测3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L^(-1)GAE作用细胞24,48,72 h后对激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用;3.5,4.0,5.0 g·L^(-1)的GAE作用48 h后,另设空白组,Hoeehst33342荧光染色法,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,SP免疫组化法检测细胞内半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)和Fas的表达情况并做统计学处理。结果:3.5,4.0,4.5,5.0,5.5 g·L^(-1)GAE作用细胞24,48,72 h后能显著抑制PC-3细胞的生长且呈剂量和时间依赖性;与空白组比较,3.5,4.0,5.0 g·L^(-1)的GAE作用48 h后Hoeehst33342荧光染色发现部分PC-3细胞发生典型的凋亡形态学改变;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测显示3.5,4.0,5.0 g·L^(-1)的GAE作用48 h后,早期凋亡细胞分别占6.51%,12.48%和22.81%,且免疫组化显示细胞内蛋白Caspase-3和Fas的表达均上调且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:GAE能够诱导激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞凋亡,其作用机制可能与死亡受体介导的信号通路有关。