抗肿瘤候选药物Gedatolisib在体外血浆和人工胃/肠液中的稳定性研究及其降解产物分析

目的:考察抗肿瘤候选药物Gedatolisib在体外血浆和人工胃/肠液中的稳定性,并分析其在体外血浆中可能的降解产物。方法:采用高效液相色谱法,以吲哚美辛为内标,分别检测Gedatolisib在SD大鼠(雄性)血浆中孵育0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 h和在空白人工胃液(pH 1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH 6.8,不含酶)、人工胃液(pH 1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH 6.8,含胰蛋白酶)中孵育0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 h的含量变化,计算其剩余百分比;利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术分析空白血浆和血浆孵育样品的总离子流图,比较差异峰并通过MS图推测降解产物。结果:Gedatolisib在大鼠血浆中孵育2.0 h时的剩余百分比约为63%,继续孵育无明显变化;在空白人工肠液中孵育不同时间的剩余百分比均在(99.18±2.15)%^(103.20±3.41)%范围内;在人工肠液中孵育2.0 h的剩余百分比降至(88.76±1.53)%,在空白人工胃液中孵育2.0 h的剩余百分比降至(85.63±1.55)%,继续孵育均无明显变化;在人工胃液中孵育的剩余百分比从0 h的(94.94±3.52)%降至6.0 h的(16.19±1.17)%。UPLC-Q-TOF/MS的总离子流图显示,血浆孵育样品与空白血浆的差异峰出现在正离子模式扫描下的6.42 min处,该峰扫描通道可见m/z 616.3351、632.3277、630.3170、602.2786[M+H]+的分子离子峰,推测Gedatolisib在大鼠血浆中可能生成1-(4-(3-(4,6-双吗啉-1,3,5-三嗪-2-基)苯基)脲基)苯甲酰基)-N,N-二甲基哌啶-4-氧化胺、1-(4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-羰基)苯基)-3-(4-(4-吗啉-6-(3-氧代吗啉)-1,3,5-三嗪-2-基)苯基)脲和1-(4-(3-(4-(4,6-双吗啉-1,3,5-三嗪-2-基)苯基)脲基)苯甲酰基)-N-甲基哌啶等3个降解产物。结论:Gedatolisib在大鼠血浆中不稳定,可能发生末端氮原子氧化、吗啉环氧化和末端氮脱甲基化等反应;在人工肠液和空白人工胃/肠液中稳定性良好,在胃蛋白酶存在下发生明显降解。

Gedatolisib的合成工艺改进

目的研究gedatolisib的合成工艺。方法以三聚氯氰为起始原料,依次经取代、Suzuki偶联、异氰酸酯成脲、水解、缩合等5步反应得到目标化合物。结果与结论该合成路线总收率达43.6%(以三聚氯氰计),各步反应条件温和,操作简便,生产成本降低,为中试放大奠定基础。

Gedatolisib的合成

本研究合成了抗肿瘤药物gedatolisib。三聚氯氰(2)与吗啉在丙酮/水中反应得2-氯-4,6-二(吗啉-4-基)-1,3,5-三嗪,与4-氨基苯硼酸频哪醇酯在四三苯基膦钯催化下,经Suzuki偶联得4-[4,6-二(吗啉-4-基)-1,3,5-三嗪-2-基]苯胺(5),本步反应中钯催化剂的用量由文献的5%减少至0.8%,后处理用乙酸乙酯重结晶代替柱色谱纯化,保证收率的同时,简化了操作。用价廉的N,N'-羰基二咪唑代替高毒的氯甲酸苯酯作羰基化试剂与化合物5反应后,再与(4-氨基苯基)[4-(二甲胺基)哌啶-1-基]甲酮缩合得目标化合物,降低了生产成本,且环境更友好。本工艺路线短,原料易得,条件温和,操作简便,总收率40.1%(以2计)。