明胶/白芨胶多孔材料的细胞相容性研究

目的以明胶、白芨胶及中药黄连、丹参的提取物为原料,制备一种海绵状多孔材料,研究其与细胞的相容性熏为该产品作为创面敷料修复材料和皮肤、肌腱组织工程支架材料提供实验依据。方法将中药提取液复合到明胶和白芨胶支架材料中,通过冷冻干燥法制备成海绵状多孔材料熏以L-929细胞作为对象熏利用浸提液培养及材料表面直接培养法研究该材料的细胞相容性。结果载药材料在第2、4、7天的细胞相对增殖度在100.9%～111.3%范围内,其细胞毒性级别为0级;通过L-929细胞与明胶/白芨胶载药材料复合培养第2、7天的扫描电镜观察,L-929细胞在该材料上能很好地贴附、生长。结论明胶/白芨胶载药多孔材料有良好的细胞相容性,是可以安全使用的创面修复和皮肤、肌腱组织工程用材料。

明胶、白芨胶载药生物敷料的制备及理化性能分析

目的以明胶、白芨胶及中药提取物为原料制备载药生物敷料,并对其理化性能进行分析。方法以明胶、白芨胶及中药提取物为原料,应用冷冻干燥法制备生物敷料。并对该敷料的外观、表面结构、单位体积质量、透气率、吸水能力、抗撕强度、pH值、炽灼残渣测定等理化性能进行了检测和分析。结果制备的载药敷料是一种疏松多孔的海绵状材料,扫描电镜下材料孔隙均匀,互相连通,样品透气率57.3%、密度12.52 mg/cm3、吸水力13.03倍、抗撕强度153g/cm3、pH值为6.02、炽灼残渣0.4%。结论该载药材料符合敷料材料的理化性能要求。

明胶/白芨胶载药敷料的抗炎镇痛药效学研究

目的 :评价明胶 /白芨胶载药生物敷料的抗炎镇痛作用。方法 :采用小鼠耳廓二甲苯致炎试验、大鼠蛋清足跖肿胀试验进行抗炎作用研究 ;采用小鼠热板法、小鼠醋酸扭体法进行镇痛作用研究。结果 :明胶 /白芨胶载药敷料有明显抑制小鼠耳廓肿胀的作用 ,能明显减轻蛋清所致的足趾肿胀 ,能延长热痛试验中小鼠舐后足的时间 ,能明显减少醋酸所致小鼠扭体的次数 ,其作用呈一定的量效关系。结论明胶 /白芨胶载药敷料具有明显的抗炎、镇痛作用。

明胶-白芨胶/丹参材料对大鼠损伤皮肤转化生长因子-β1表达的影响

目的:将明胶-白芨胶/丹参材料植入大鼠损伤皮肤下,讨论丹参对创面修复中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:将30只大鼠随机为对照组(15只)和实验组(15只)。大鼠皮下切除真皮组织造模,实验组皮下植入明胶-白芨胶/丹参材料,对照组植入单纯明胶-白芨胶多孔材料。术后1、3、7、14d和28d,每组随机选3只大鼠处死。将含周围组织的材料取出,制成病理切片,常规HE染色,镜下观察组织恢复程度。将术后1、3、7、14d的切片标本行TGF-β1抗体免疫组化染色,利用ImageJ软件分析,镜下观察比较。结果:组织切片未显示异常反应。免疫组化染色结果显示,实验组TGF-β1表达强于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:明胶-白芨胶/丹参多孔材料能增强大鼠损伤皮肤TGF-β1表达,进而可能促进真皮组织恢复。

白芨胶载外源性rhEGF对创面中羟脯氨酸含量的影响

目的观察中药白芨胶（BSG）作为外源性重组人表皮生长因子（rhEGF）的载体,在兔背部的创面愈合过程中对羟脯氨酸（HYP）含量的影响,并探讨其机制。方法选取健康家兔40只,体重2.5～3.0kg,雌雄各半。随机分为盐水对照（SW）、BSG、rhEGF、BSG＋rhEGF四组,于脊柱的两侧其正中旁开2.0cm处手术制作皮肤全层缺损创面各3个,面积约2.0cm×2.0cm。分别用浸透上述四种液体的纱布外敷创面,隔日换药1次。于外敷后第3、5、7、10天取材,行HYP含量的测定。结果四组的HYP含量于外敷后第3天均较低,以后逐渐递增,至第10天达较高水平。在同一时间段上,BSG＋rhEGF组的HYP含量显著高于其余三组（P〈0.05）,BSG组略高于rhEGF组（P〉0.05）,但三组均显著高于SW组（P〈0.05）。结论BSG＋rhEGF能促进创面中HYP合成的增加,从而缩短了创面的愈合时间,提高了愈合质量。

明胶白芨胶/血竭多孔材料的生物相容性评价

目的:评价明胶白芨胶/血竭多孔材料的安全性,为该产品作为创面修复和组织工程支架材料提供实验依据。方法:以明胶和白芨胶为支架材料,把中药血竭极细粉复合到其中,通过冷冻干燥法制备成海绵状多孔材料,通过急性毒性实验、皮肤刺激实验、致敏实验、热原实验和细胞毒性实验进行其生物相容性评价。结果:明胶白芨胶/血竭多孔材料在急性毒性实验、皮肤刺激实验、致敏实验、热原实验和细胞毒性实验等指标均符合规定要求。结论:明胶白芨胶/血竭多孔材料作为创面修复和组织工程支架材料具有安全可靠性。

明胶/白芨胶载药多孔材料的体外抑菌试验

目的:观察明胶/白芨胶载药多孔材料的体外抑菌作用。方法:用灭菌后明胶/白芨胶载药多孔材料和培养液制备浸提液,再用无菌蒸馏水稀释成1%、0.5%、0.25%、0.125%等4种浓度。用琼脂扩散纸片法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等菌种做抑菌试验。结果:明胶/白芨胶载药多孔材料对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均具有抑制作用,不同浓度的明胶/白芨胶载药多孔材料的抑菌作用不同。高浓度明胶/白芨胶载药多孔材料抑菌比低浓度明胶/白芨胶载药多孔材料的抑菌作用要强。明胶/白芨胶载药多孔材料浓度为0.125%时即可起到一定的抑菌作用。结论:明胶/白芨胶载药多孔材料具有较好的抑菌作用。

明胶-白芨胶/丹参多孔材料的理化性质研究

目的评价明胶-白芨胶/丹参多孔材料作为组织工程皮肤支架的理化性质。方法以明胶和白芨胶为基质材料,复合丹参提取液制备多孔材料。参照ISO10993-1标准,观察材料性状、吸水性和体外降解性,并采用急性毒性试验、热原试验和溶血试验,评价材料的理化性质。结果实验材料具有较好的韧性、吸水性及可降解性。材料浸提液注入小鼠腹腔未引起急性毒性反应,注入家兔耳缘静脉内未引起发热反应,材料浸提液溶血率为2.59%,符合规定。结论明胶-白芨胶/丹参多孔材料具有良好的理化性质,具备成为组织工程皮肤支架的条件。

微米大黄炭白芨胶对胃黏膜损伤的保护作用及机制

目的研究微米大黄炭白芨胶调控局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、Vinculin、kindlin-2对胃黏膜损伤的保护作用.方法选用80只SD大鼠,随机分为4组处理:对照组、模型组、微米大黄炭组、微米大黄炭白芨胶组.造模后第14天,检测各组大鼠黏膜损伤面积;放射免疫法检测各组大鼠血清中前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)、胃泌素(gastrin,GAS)含量及胃黏膜组织白介素-8(interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量;提取胃组织总RNA和总蛋白,RT-PCR及Western blot检测FAK、Vinculin、kindlin-2的mRNA及蛋白表达.结果与对照组相比,模型组大鼠的胃黏膜损伤面积显著增大(P<0.01),血清中PGE_2含量显著降低(P<0.01),GAS含量显著升高(P<0.01),胃黏膜组织中TNF-α、IL-8的含量显著升高(P<0.01),FAK、Vinculin、kindlin-2的mRNA及蛋白表达均显著下降(P<0.01);与模型组相比,微米大黄炭组与微米大黄炭白芨胶组大鼠胃黏膜损伤面积显著减少(P<0.01),血清中PGE_2含量显著升高(P<0.01),GAS含量显著降低(P<0.01),胃黏膜组织中TNF-α、IL-8的含量显著降低(P<0.01),FAK、Vinculin、kindlin-2的mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),微米大黄炭白芨胶组各检测指标变化均优于微米大黄炭组.结论微米大黄炭白芨胶能显著改善模型大鼠胃黏膜损伤状况,对损伤胃黏膜的保护作用可能与FAK、Vinculin、kindlin-2的表达增强有关.

白芨胶载外源性rhEGF对伤口愈合影响的组织学研究

目的:探讨中药白芨胶(Bletillastriatagelatin,BSG)作为外源性重组人表皮生长因子(RecombinantHumanEpidermalgrowthfactor,rhEGF)的载体对兔背部伤口愈合的影响及其机制。方法:选取健康家兔40只,体重2.5～3kg,雌雄各半。距脊柱正中旁开2cm处做皮肤全层切口,面积约2cm×2cm,左右各3个。用已配置好的药液浸透双层纱布外敷伤口,每日换药一次。取材后进行伤口愈合时间、伤口愈合率、HE和Masson染色后的光镜组织学观察。结果:BSG+rhEGF的伤口愈合率和伤口愈合时间与SW组(Salinewater,SW)、BSG组和rhEGF组比较均有显著差异(P<0.05)。HE和Masson染色后光镜组织学观察发现BSG+rhEGF能促进炎症细胞渗出,肉芽组织、新生毛细血管和胶原纤维形成。结论:BSG载外源性rhEGF通过促进肉芽组织、新生毛细血管和胶原纤维的生成进而促进伤口愈合,其作用优于单用白芨和单用表皮生长因子。

Biological Evaluation of ChuangYuLing Dressing—A Multifunctional Medicine Carrying Biomaterial

The safety of Chuangyuling (CYL) dressing—a multifunctional medicine carrying biomaterial was evaluated in order to provide foundation for the application of CYL as material used in the wound healing. The traditional Chinese medicine (TCM) extract solution was compounded with scaffolds (gelatin and Bletilla hyacinthine gum), and then frozen and dried to form spongy and porous material CYL. According to the standard of biological evaluation of medical devices that was instituted by the ministry of health of China \, the biological evaluation of CYL dressing was conducted. The results showed that all the contents of biological evaluation test consisting of acute toxicity, skin irritation, sensitization and cytotoxicity met the requirement of standards. It was concluded that the biomaterial carrying TCM (CYL dressing) is safe for application of wound healing.

明胶/白芨胶-微米三七海绵材料对创面愈合影响的实验研究

目的将微米三七赋以新型复合材料载体,制作出一种新型止血材料,并通过理化试验初步评估其性能及生物相容性。研究该材料对大鼠背部创伤模型愈合的影响,探讨其促进创面愈合的机制。方法应用高能球磨法制备超微米级的三七粉,与明胶、白芨胶按一定比例通过冷冻干燥法制备出可降解的复合性海绵。经过常规理化分析及溶血率测定,证实具有良好的生物相容性。选取SPF级健康SD雄性大鼠60只,将其随机分为空白对照组(A组)、明胶海绵组(B组)、明胶/白芨胶海绵材料组(C组)和明胶/白芨胶-微米三七海绵材料组(D组),各15只。先制备全层皮肤缺损的大鼠动物模型,再分别用无菌纱布、明胶海绵、明胶/白芨胶海绵材料(不载有微米三七)、明胶/白芨胶-微米三七海绵材料覆盖创面,并分别于术后第3、7、14天测量伤口面积并取材(每组每次各取5只),计算各组的创面愈合速率,并用免疫组织化学染色(SABC法)检测各组干预措施对创面组织VEGF(血管内皮生长因子)的表达情况。结果明胶/白芨胶-微米三七海绵材料的理化性能符合创面敷料基本要求,具有组织相容性;各组在术后第3、7天的创面愈合速率差异均有统计学意义(P<0.05),在第14天,各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);各组各时间点VEGF的阳性表达差异均有统计学意义(P<0.05),其中材料治疗组创面肉芽组织中VEGF阳性表达显著性升高。结论明胶/白芨胶-微米三七海绵可作为一种新型创面止血敷料,它具有良好的组织相容性、制备工艺简便、成本低等特点。通过动物模型实验初步证实该材料可促进创面的愈合,其作用机理可能与促进创面VEGF的高表达相关。

明胶-白芨胶/丹参多孔材料与大鼠组织相容性研究

目的评价明胶-白芨胶/丹参多孔材料的组织相容性。方法以明胶和白芨胶为基质材料,复合丹参提取液,制备多孔材料及其浸提液。参照ISO10993-1标准,浸提液与L929细胞共同培养,观察材料细胞毒性。通过试验和皮下植入试验,评价此材料的组织相容性。结果实验材料与L929细胞共同培养时,细胞生长良好,未见毒性反应;材料植入大鼠皮下,于术后第3天、1、2、3、4、6、8周取材观察。材料在体内约8周内完全降解,无明显炎症和异物排斥反应,符合规定。结论明胶-白芨胶/丹参多孔材料与大鼠组织具有良好的组织相容性,具备成为组织工程皮肤支架的条件。

白芨胶载HMW－NGF促进伤口愈合的实验研究

用中药白芨胶（ｂｌｅｔｉｌａｓｔｒｉａｔａｇｅｌａｔｉｎ，ＢＳＧ）作为外源性高分子神经生长因子（ｈｉｇｈｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＨＭＷ－ＮＧＦ）的载体，观察促进大鼠伤口愈合的作用。实验分两部分进行：①将生理盐水、ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ分别加入无血清培养基中，观察其对鸡胚背根神经节的影响；②选用ＳＤ大鼠４０只，分Ａ、Ｂ、Ｃ及Ｄ四组，在各大鼠背部切取２ｃｍ的伤口，一组大鼠伤口不用药，其余三组伤口分别给予外用ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ，每天用药１次。在用药后第３及第１０天测量伤口面积，并用图象分析仪计算伤口面积，用光学显微镜观察细胞渗出类型和数量，并观察伤口愈合时间。结果表明：ＢＳＧ对ＨＭＷ－ＮＧＦ的活性无影响；ＢＳＧ、ＨＭＷ－ＮＧＦ及ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ都能促进伤口愈合和增加创面渗出多形核白细胞、单核细胞和成纤维细胞，尤以ＨＭＷ－ＮＧＦ＋ＢＳＧ的作用最为显著。

明胶/白芨胶-三七多孔材料对糖尿病溃疡大鼠创面修复及β-catenin、GSK-3β、RSPO-3表达的影响

目的研究自制明胶/白芨胶-三七多孔材料对糖尿病溃疡大鼠模型创面愈合的影响,探讨其促进慢性溃疡愈合的机制。方法将60只高糖高脂喂养4周后SPF级SD雄性大鼠随机分为明胶/白芨胶-三七组、明胶/白芨胶组、凡士林组和空白组,每组15只。各组大鼠均采用磁石在背部脊柱两侧制作直径为2cm大小的全层皮肤缺损模型,分别用明胶/白芨胶-三七多孔材料、明胶/白芨胶多孔材料、凡士林敷纱和无菌纱布覆盖创面,无菌敷料和绷带固定,每天换药1次,单笼饲养防止互舔。分别于致伤后第3天和第7天取材(每组每次各5只),光学显微镜下观察大鼠背部组织细胞生长分化和创面组织中毛细血管生长情况,并用Westernblot法检测各组创面组织中β-连环素(β-catenin)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、R-脊椎蛋白3(RSPO-3)表达情况。结果造模第3天,4组创面均可见增生的毛细血管,其中明胶/白芨胶-三七组最多,明胶/白芨胶组次之;造模第7天,明胶/白芨胶-三七组、明胶/白芨胶组皮肤结构基本恢复正常,凡士林组和空白组皮肤结构与正常皮肤结构差异大,新生的毛细血管亦较少。造模第3天、第7天,明胶/白芨胶-三七组β-catenin、RSPO-3蛋白表达水平均明显高于其他组(P均<0.05),GSK-3β蛋白表达水平均明显低于其他组(P均<0.05)。结论明胶/白芨胶-三七多孔材料可明显促进糖尿病溃疡大鼠创面愈合,其机制可能与上调Wnt/β-catenin通路中β-catenin、RSPO-3表达,下调GSK-3β蛋白表达相关。

管壁不同厚度的聚乳酸管对周围神经再生影响的实验研究

目的 探讨可吸收性聚乳酸管管壁厚度对周围神经再生的影响。方法 选用wister大鼠 4 5只 ,分为三组 ,分别以 0 1,0 3,0 5mm三种不同管壁厚度的聚乳酸管桥接单侧坐骨神经 10mm缺损 ,同时管内植入相同浓度的雪旺细胞和白芨胶混合液 ,旨在提高神经再生率。术后 8周、12周进行显微解剖学、组织学等检查。结果 管壁为 0 3mm的聚乳酸管内有较多的再生神经纤维 ,三个月内管壁变薄 ,但无软化变形。结论 壁厚 0 3mm的聚乳酸管为缺损的周围神经再生最佳管道。

阿胶、白及灌肠治疗溃疡性结肠炎的观察与护理

总结了三年来,收治52例应用中药阿胶、白及、锡类散进行灌肠治疗溃疡性结肠炎的病例。详细介绍了灌肠方法,护理注意事项,效果评价等。通过临床观察讨论后发现:中药阿胶、白及、锡类散联合保留灌肠,适用于绝大多溃疡性结肠炎的患者,治疗效果显著,并能有效防止复发。

明胶-白芨胶／丹参多孔材料的生物相容性

目的观察明胶．白芨胶／丹参多孔材料的生物相容性。方法小鼠腹腔注射材料浸提液，观察其急性毒性反应；家兔耳缘静脉注射浸提液，观察其发热反应；分光光度法分析0．02g/ml浓度浸提液溶血率；噻唑蓝（MTr）比色法观察3种浓度（0．10、0．02、0．01g／ml）浸提液对L929细胞生长的影响；材料植入SD大鼠皮下，分别于第1、2、4、8周取出，评价材料组织相容性。结果浸提液腹腔注射未引起小鼠急性毒性反应；注入家兔耳缘静脉内未引起发热反应；浸提液溶血率为2．59％，符合规定；3种浓度浸提液在1d时RGR分别为102．8、101．2、100．5，3d时RGR分别为104．5、100．6、103．4，7d时RGR分别为109．7、104．6、106．7；材料在体内约8周完全降解，未见异常反应。结论明胶-白芨胶／丹参多孔材料无毒性，无热源性，无溶血性及细胞毒性，具有良好的生物相容性。

明胶-白芨胶/丹参多孔材料复合大鼠真皮成纤维细胞构建组织工程真皮的实验研究

目的:探讨明胶-白芨胶/丹参多孔材料复合大鼠真皮成纤维细胞制成组织工程真皮。方法:制备明胶-白芨胶/丹参多孔材料及其浸提液,与L-929细胞共同培养,观察浸提液与L-929细胞相容性。提取大鼠真皮层中成纤维细胞,与材料复合构建组织工程真皮。复合组织采用苏木精-伊红染色及电镜下观察结合效果。结果:L-929细胞在浸提液中生长情况良好。大鼠真皮成纤维细胞与材料共同培养2周,苏木精-伊红染色及电镜观察,细胞能在材料上正常粘附与生长。结论:明胶-白芨胶/丹参多孔材料无细胞毒性。能与大鼠真皮成纤维细胞成功复合为组织工程真皮。

丹参浓度对明胶-白芨胶／丹参材料促血管再生作用的影响

目的评价明胶-白芨胶／丹参材料组织相容性，探讨丹参浓度对材料促进损伤组织血管再生作用的影响。方法以明胶和白芨胶为基质材料，复合丹参提取液，制备成多孔材料。175只大鼠随机（随机数字法）为5组，每组35只。四个试验组大鼠皮下依次植入含丹参浓度为1，2，4，5mL／100g的材料，对照组植入单纯明胶-白芨胶多孔材料。术后1d，3d，7d，14d，21d，28d和56d，每组随机选5只大鼠处死。将含周围组织的材料取出，制成病理切片，常规HE染色，镜下观察组织相容性。将术后1d，3d，7d，14d的切片标本行VEGF抗体免疫组化染色，镜下观察比较。结果材料约8周完全降解，组织切片未显示异常反应。免疫组化染色结果显示，材料内丹参浓度约为2mL／100g时，促进血管再生效果最佳。结论明胶-白芨胶／丹参多孔材料具有良好的组织相容性，丹参在材料内促进组织血管再生的适宜浓度约为2mL／100g。