外源添加VB_(12)对肺炎克雷伯氏菌代谢3-羟基丙酸的影响

为了探究外源添加维生素B12(Vitamin B12,VB_(12))对Klebsiella pneumoniae HD79和K.pneumoniae HD79-T利用甘油还原途径生产3-羟基丙酸(3-hydroxypropionic acid,3-HP)的影响以及摸索VB_(12)对K.pneumoniae HD79和K.pneumoniae HD79-T的阈值上限,将不同浓度(0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 g/L)的VB_(12)添加到K.pneumoniae HD79及K.pneumoniae HD79-T的发酵培养基中,利用HPLC检测其底物消耗及产物产生情况、qRT-PCR检测还原途径相关基因的mRNA表达情况以及酶联免疫试剂盒检测代谢相关酶活性。结果表明,VB_(12)对K.pneumoniae HD79和K.pneumoniae HD79-T的阈值为0.01 g/L和0.03 g/L。与未添加VB_(12)相比,菌株K.pneumoniae HD79和K.pneumoniae HD79-T的3-HP产量分别提高了24.39%,8.86%;醛脱氢酶基因puuC表达量分别提高了2.49倍和1.68倍;ALDH、GDHt和PDOR的酶活力分别提高了50.24%、40.36%和18.29%,及30.49%、37.84%和13.56%。说明通过外源添加辅酶因子VB_(12)对肺炎克雷伯氏菌高产3-HP是可行策略。

ALAD和VDR基因多态性与铅肾毒性易感性的关系

[目的 ]探讨δ 氨基乙酰丙酸脱水酶 (ALAD)和维生素D受体 (VDR)基因多态性与铅肾毒性的关系。 [方法 ]选择 2 16名职业铅接触工人。测定血铅 (BPb)、尿铅 (UPb)、尿ALA(UALA)、尿N 乙酰 β D 葡萄糖苷酶 (NAG)活性、尿白蛋白 (ALB)含量和尿肌酐。尿相关指标采用肌酐进行校正。利用限制性片段长度多态 (RFLP)技术进行基因型分析。 [结果 ]铅接触浓度≥ 0 0 3mg/m3 时 ,ALDA 11基因型和ALAD 12基因型工人的平均血铅水平分别是 2 0 6μmol/L和 2 45μmol/L(P >0 0 5 ) ,VDR BB/Bb基因型工人的平均血铅水平 (2 91μmol/L)高于VDR bb基因型工人的平均血铅水平 (2 0μmol/L) ,P <0 0 5。当血铅水平≥ 1 92 μmol/L时 ,ALAD 12基因型工人的NAG活性 (4 5 4U/mmolCr)明显高于ALAD 11基因型工人 (1 2 6U/mmolCr) ,P <0 0 5。ALDA 11基因型工人血铅与NAG活性不呈剂量 效应关系 ,而ALAD 12基因型工人的血铅与NAG活性呈剂量 效应关系 ,回归直线的斜率为 1 5 8(P <0 0 5 )。 [结论 ]本研究提示ALAD和VDR基因多态与血铅水平升高可能有关 ,ALAD

δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶基因与铅中毒关系研究进展

此文通过综合分析国内外近年来对不同水平接铅及其血铅、骨铅变化和由此引起的肾毒性、神经毒性、性激素反应与ALAD基因型个体的分布特性研究,阐述了ALAD基因与铅中毒的关系。

5-氨基乙酰丙酸脱水酶缺失对大肠杆菌生长的影响

5-氨基乙酰丙酸(ALA)脱水酶直接关系到ALA的积累,研究该酶突变对细胞的影响对生物法生产ALA具有重要意义,然而目前这方面认识比较混乱。本研究通过无痕敲除E.coli MG1655菌株的ALA脱水酶的结构基因hemB,发现ALA脱水酶酶活大幅降低,且突变株生长受到极大的影响,但是仍然有10%的残余酶活支持细胞微弱且不依赖于ALA生长。本研究的结果加深了对ALA代谢途径的了解,为构建高效积累ALA的工程菌株提供了依据。

低水平职业性铅接触人群生物标志物间关系的研究

目的 研究铅的接触、效应及易感性标志物间的关系,探讨其用于评估低水平职业性铅接触人群健康危害的敏感性和实际应用价值.方法 应用职业卫生检测方法测定江苏省某铅酸蓄电池生产企业作业场所中铅烟、铅尘浓度,对该企业233名职业性铅接触工人和76名非职业性铅接触工人采用石墨炉原子吸收光谱法测定血铅（Pb-B）,血液荧光计法测定锌原卟啉（ZPP）,分光光度计法测定血δ-氨基乙酰酮戊酸脱水酶（ALAD）,Taqman荧光探针实时定量聚合酶链反应测定ALAD基因多态性,用石墨炉原子吸收光谱法测定尿铅（Pb-U）,分光光度测定方法测定尿δ-氨基乙酰丙酸（ALA-U）,多元线性回归法分析上述指标的相关关系.结果 18个铅烟与30个铅尘检测点浓度分别为0.002～0.019 mg/m3和0.004～0.013 mg/m3;233名职业性铅接触工人Pb-B与Pb-U、ZPP呈正相关（r值分别为0.62、0.47,P＜0.01）,与ALAD呈负相关（r=-0.77,P＜0.01）;218人（93.6％）Pb-U≤70 μg/L,其中15人（6.9％）Pb-B≥400μg/L;Pb-B＜190 μg/L时,Pb-B与ZPP不相关（r=0.18,P=0.068）;Pb-B≥190 μg/L时,Pb-B与ZPP呈正相关（r=0.36,P＜0.01）;Pb-U与ALA-U、ZPP呈正相关（r值分别为0.49、0.47,P＜0.01）;ZPP与ALAD呈负相关（r=-0.19,P＜0.01）,与ALA-U呈正相关（r=0.27,P＜0.01）;ALAD与ALA-U不相关（r=-0.11,P＞0.05）;ALAD1-2基因型工人的Pb-B、ZPP水平和ALAD活力与ALAD1-1基因型工人差异无统计学意义（P＞0.05）.76名非铅接触工人中,两种基因型工人的Pb-B水平差异无统计学意义（P＞0.05）,ALAD1-2基因型工人ALAD活力低于ALAD1-1基因型工人,ZPP平均水平高于ALAD1-1基因型工人,差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 在低水平职业性铅接触人群中,ZPP与Pb-B相关的阈值为190 μg/L,ALAD可作为低Pb-B水平的效应标志物;ALAD基因多态性对职业性与非职业性铅接触人群的Pb-B水平及其毒性效应的影响作用不同.

δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶和维生素D受体基因多态性与铅肾毒性易感性的相关研究

目的探讨δ-氨基-γ-酮戊酸脱水酶(ALAD)和维生素D受体(VDR)基因多态性以及基因-基因、基因-环境之间的联合作用对铅肾毒性的作用。方法选择233名铅作业工人,根据工人接触铅水平是否超过职业接触限值将其分为两组,分别测定血铅、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)和尿肌酐,全血提取DAN基因组,多聚酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法分析ALAD和VDR基因多态性。结果超职业限值组,ALAD1-2/2-2基因型和ALAD1-1基因型工人尿NAG的浓度分别为(2.12±0.07)U/mmol Cr和(1.73±0.03)U/mmol Cr,差异具有显著性P<0.05;VDR-Bb基因型的工人尿β2-MG浓度[(20.94±0.12)μg/mmol Cr]高于携带VDR-bb基因型工人的尿β2-MG浓度[(15.28±0.09)μg/mmol Cr](P=0.01)。多因素Logistic回归分析发现,铅接触、高血铅等环境因素以及环境-基因的联合作用都是铅作业工人肾损害的危险因素,接铅水平、血铅水平、ALAD基因型和接铅水平的联合作用引起尿NAG异常的OR值分别为6.85(2.51～10.87)、2.41(1.70～3.41)、3.01(1.10～8.19)。结论在高铅浓度接触下ALAD和VDR基因型与铅肾毒性有关,ALAD-2等位基因和高铅接触是加重铅肾毒性的危险因素。