七彩神仙鱼催乳素基因的克隆、定位及表达分析

【目的】七彩神仙鱼(Symphysodon aequifasciatus)具有特殊的亲代抚育行为,克隆并定位七彩神仙鱼催乳素基因,分析其在亲代抚育中的表达模式,为理解催乳素在七彩神仙鱼亲代抚育中的作用提供依据。【方法】通过BLASTP对七彩神仙鱼全基因组进行分析,鉴定出1个催乳素基因,命名为dfprl。基于dfprl基因的CDS区,设计克隆和PCR引物,通过RACE技术克隆获得dfprl基因全长,并利用生物信息学对dfprl基因进行结构分析,对其氨基酸序列进行理化性质和进化分析。对不同抚育阶段七彩神仙鱼的脑、性腺和皮肤进行转录组分析,探究dfprl基因在亲代抚育中的表达特征,并利用原位杂交技术对dfprl基因在七彩神仙鱼皮肤中的表达进行定位。【结果】dfprl全长为1282 bp,cDNA序列开放阅读框长度为639 bp,共编码212个氨基酸,5'-UTR为309 bp,3'-UTR为334 bp。dfprl蛋白存在PRL家族的典型结构域Hormone_1,dfprl蛋白与慈鲷科其他鱼类PRL蛋白相似性较高,与尼加拉瓜湖始丽鱼(Archocentrus centrarchus)对应的氨基酸序列同源性最高、为96.70%。亲鱼进入抚育阶段后,dfprl在性腺和皮肤中的表达水平逐渐上升,抚育结束时表达水平下降。原位杂交结果显示,dfprl在皮肤粘液细胞中表达,且与七彩神仙鱼催乳素受体(dfprlr)表达位点重叠,在抚育早期阶段高表达。【结论】七彩神仙鱼dfprl基因高度保守,存在稳定的Hormone_1结构域。七彩神仙鱼dfprl基因在亲代抚育阶段的皮肤中高表达,且在亲代抚育阶段的皮肤粘液细胞中与dfprlr表达位点重合,表明dfprl可能通过作用于dfprlr进而促进七彩神仙鱼独特抚育行为的发生。

铁皮石斛多糖合成相关基因在不同组织及低温胁迫下的表达分析

为探讨多糖合成基因对铁皮石斛生长发育的调控作用及低温胁迫对多糖合成基因的影响,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对铁皮石斛多糖合成途径中UAM、UGP、RHM、SPS、CSLA和PGM基因在不同组织(根、茎、叶、花)及0℃胁迫24 h的表达水平进行定量分析。结果显示:GAPDH基因在5个候选基因中稳定性最高,可作为本研究的内参基因;7个多糖合成相关基因在铁皮石斛根、茎、叶、花中均有表达,且在花和根中的表达量高于成熟茎和叶;低温胁迫下,PGM基因呈持续下调表达,RHM和SPS基因呈先下调后上调至正常表达水平,UGP、UAM和CSLA基因则呈现先下调后上调再下调表达的波动。研究结果提示,GAPDH基因可作为内参基因用于铁皮石斛不同组织及低温胁迫基因表达水平研究中;7个与多糖合成相关的基因在铁皮石斛生长发育中也起到一定的调控作用;夜间0℃低温对铁皮石斛多糖合成相关基因的表达有显著的影响。

香草乙酮对胶原蛋白COL17A1基因表达的影响及在护肤品中的应用

研究香草乙酮对17型胶原蛋白(COL17A1)基因表达的“量效关系”和安全剂量,在此基础上开发新型抗衰老护肤产品并检验实际功效。体外培养HaCaT细胞(人永生化角质形成细胞株),用不同浓度的香草乙酮处理细胞,实时定量PCR法(RT-PCR)检测HaCaT细胞中COL17A1基因mRNA的转录水平,Western blot检测COL17A1蛋白表达水平;利用鸡胚绒毛膜尿囊膜血管毒性实验(CAMVA)确定既安全又有效诱导COL17A1表达的香草乙酮浓度制备护肤品,并在28名中老年志愿者皮肤上进行功效测实。结果表明,经香草乙酮处理后,HaCaT细胞中COL17A1基因表达量在一定浓度范围内显著提高,当香草乙酮浓度达到60μmol/L时,COL17A1基因表达量最高;浓度为120μmol/L时,COL17A1基因表达量开始呈下降趋势。香草乙酮浓度小于8400μmol/L时具有良好安全性;人体皮肤皱纹严重程度在使用香草乙酮后得到一定缓解。

国外护肤品发展现状与趋势分析(一)

结合欧美、日、韩护肤品强国的发展历程和法律法规,阐述了目前国外护肤品行业的发展现状,并指出全球化并购扩张、基因定制护肤以及微生态护肤等绿色美容方式是今后全球护肤品行业的发展趋势。

国外护肤品发展现状与趋势分析(二)

结合欧美、日、韩护肤品市场的发展历程和法律法规,阐述了目前国外护肤品行业的发展现状,并指出全球化并购扩张、基因定制护肤以及微生态护肤等绿色美容方式是今后全球护肤品行业的发展趋势。