Twist基因检测对大肠癌临床病理诊断价值的探讨

目的:探讨转录调节因子Twist在大肠癌组织中的表达及其在临床病理诊断中的应用价值。方法:应用鼠抗人Twist单克隆抗体采用SP免疫组织化学方法检测112例大肠癌组织及40例正常肠黏膜组织中Twist的表达,并与临床病理指标进行比较。结果:在112例大肠癌组织中,Twist基因阳性表达78例(69.6%),正常组织中为15例(17.5%),两者比较差异有统计学意义,χ2=11.21,P=0.001;进一步结合临床病理资料分析,Twist在大肠癌组织中表达与肿瘤的分化程度(χ2=9.575,P=0.008)、肿瘤浸润(χ2=8.183,P=0.017)、淋巴结转移(χ2=4.05,P=0.044)和Duke分期(χ2=11.114,P=0.011)有关;而与患者年龄(P=0.286)、性别(P=0.887)无关。结论:Twist基因表达对大肠癌临床病理学诊断有明确的指导作用。

Tiam1和Rac1在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的观察人大肠癌和正常大肠黏膜组织中T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(T lymphoma invasion and metastasis inducing factor1,Tiam1)和RacGTP酶激活蛋白1(Rac GT-Pase activating protein1,Rac1)的表达情况并探讨其临床意义。方法应用SP免疫组化法检测50例经4%中性甲醛固定和石蜡包埋的大肠癌及50例正常大肠黏膜组织标本中Tiam1和Rac1蛋白的表达情况并分析其与大肠癌临床病理参数间的关系。结果Tiam1和Rac1蛋白在正常大肠黏膜组织中均呈阴性染色(0/50,0),但在大肠癌组织中则呈阳性染色(42/50,84.00%),两者间差异有统计学意义,P=0.003。Tiam1和Rac1蛋白染色阳性率在高分化(9/13,69.23%)和低分化(14/14,100.00%)之间、T1+T2或Ⅰ+Ⅱ期(8/13,61.54%)和T3+T4或Ⅲ+Ⅳ期(34/37,91.89%)之间、无淋巴结转移(15/22,68.18%)和有淋巴结转移(27/28,96.43%)之间的差异均有统计学意义(P值分别为0.025,0.01,0.007),但Tiam1和Rac1蛋白表达水平与大肠癌患者的性别、年龄、癌变原发部位及癌肿大小无关(P值分别为0.686,0.975,0.791,0.709),差异无统计学意义。结论Tiam1和Rac1蛋白的表达与人大肠癌浸润和转移密切相关。

幽门螺杆菌与蛋白激酶C在胃癌及癌前病变基因突变中的作用

目的通过检测慢性胃炎、肠化生、不典型增生和胃癌组织中幽门螺杆菌(Hp)感染、蛋白激酶C(PKC)水平、细胞增殖水平以及p53突变基因表达状态探讨Hp感染在胃癌发生中的作用及其作用机制。方法采用病例对照研究,病例来源于中山医院,经内镜和病理检查证实。Hp感染采用快速尿素酶和病理Gimsa染色检测。PKC的检测采用免疫组化EnVision^(TM)法,增殖细胞核抗原(PCNA)、突变型p53基因表达的检测采用免疫组织化学方法。结果①总的Hp感染的检出率为76.2％(138/181)。在慢性胃炎肠化生组、不典型增生组、胃癌组分别为62.0％(31/50),88.6％(39/44),78.3％(68/87),均明显高于单纯慢性胃炎对照组52.6％(20/38,P<0.05)。②PCNA增殖指数在三组病例中均处于高水平,且Hp阳性组均高于Hp阴性组。③突变型p53基因表达在肠上皮化生、不典型增生和胃癌组阳性率分别为36.0％(18/50),54.6％(24/44),57.2％(48/84)。不典型增生和胃癌组均明显高于肠上皮化生组。在肠化生组,Hp阳性病例的P53表达率明显高于Hp阴性病例(48.5％ vs15.8％,P=0.020)。但在不典型增生和胃癌组,Hp阳性与Hp阴性病例的P53突变蛋白表达率无明显差别(53.9％ vs60.0％,P=0.794;53.8％ vs 68.4％,P=0.258)。P53表达与PCNA增殖指数有明显的相关性。④PKC在慢性胃炎伴肠化生、不典型增生和胃癌组阳性表达的比例呈递增趋势,分别为16.0％,28.5％,41.8％,对照组的阳性表达率不足5％。Hp阳性组PKC表达阳性率(47/130,36.2％)高于Hp阴性组(6/41,14.6％.P=(0.010)。PKC表达组,其P53表达的阳性率和阳性表达程度均高于PKC无表达的病例,在肠化生组统计学检验差异有显著性(75.0％ vs 28.6％,P=0.012),不典型增生(66.7％ vs 50.0％,P=0.430)和胃癌(63.6％ vs 52.2％,P=0.310)统计学检验差异无显著性。结论在从慢性胃炎到肠上皮化生、不典型增生、胃癌的发生过程中,存在PKC表达水平的增高、PCNA高表达和突变型P53基因表达的异常增高,而且这种增高在肠上皮化生阶段就很明显。Hp感染在肠化生阶段促进p53基因突变,其作用途径可能系通过PKC表达增强。P53蛋白可以作为早期监测胃癌发生或高危人群(肠化生)的指标。

nm23-H1、p53、PCNA的表达与大肠癌浸润转移关系的研究

应用LSAB免疫组织化学方法检测74例大肠癌中nm23－H1、p53、PCNA以及Ⅳ型胶原的表达情况，并探讨它们的表达与肿瘤浸润转移的关系。结果显示大肠癌中nm23－H1、p53、PCNA的阳性率分别为71．6％、52．7％、81．1％。nm23－H1低表达与淋巴结转移有关（P＜0．025），在Ⅳ型胶原表达不同的肠癌中nm23－H1的表达无明显差异；p53、PCNA过表达与浸润程度以及淋巴结转移有关（P＜0．05）。提示nm23－H1低表达仅作用于大肠癌的转移过程，可作为预测大肠癌转移的较好指标。p53过表达在浸润转移过程及细胞增殖中均起重要作用。

胃粘膜肠化及异型增生和胃癌组织中多基因异常

目的探讨多种基因改变在癌前病变及胃癌组织中的作用,方法应用 PCR-RFLP,PCR-SSCP,RT-PCR 及免疫组化技术同时对60例肠化生,30例异型增生及52例胃癌组织中抑癌基因 APC,MCC,DCC,YNZ22,p53及癌基因 Ki-ras,Bcl-2多种变异形式进行检测。结果随着肠化生粘膜向异型增生、胃癌的发展,多种基因改变的频率逐步升高,胃癌组织中 APC,DCC,YNZ22,p53,Bcl-2的改变频率分别为57.7%(30/52),43.1%(22/51),51.6%(16/31),67.3%(35/52),68.6%(35/51)显著高于肠化生上述基因的改变(APC 33.3%,DCC4.3%,YNZ22 19.4%,p5326.7%,Bcl-2 33.3%)(P<0.05,0.01),异型增生组织中DCC 基因改变为12.5%(3/24),也显著低于胃癌组织中的改变.Ⅲ型肠化中 APC 及 bcl-2基因蛋白表达率分别为61.1%,55.6%,p53突变及蛋白表达率为57.1%,27.8%,显著高于Ⅰ,Ⅱ型肠化中 APC,Bcl-2蛋白表达率(6.3%,23.8%)(P<0.01,O.05)及 p53突变及蛋白表达率(18.2%,2.4%)(P<0.05).肠型胃癌 APC,p53,Ki-ras 突变率分别为52.9%;82.4%;29.4%,显著高于胃型胃癌各基因的突变(APC 18.2%;p53 45.8%;Ki-ras 3.0%)(P<0.05).肠型胃癌 APC,Ki-ras,bcl-2基因的蛋白表达率分别为76.5%;41.2%;93.8%,胃型胃癌分别为30.3%;3.0%;54.5%,两型相比差别显著(P<0.01,0.05).APC,p53及 Bcl-2基因可能是肠化生癌变及肠型胃癌的热点基因,肠化生及异型增生阶段即可检测到基因改变的累积现象,但以胃癌组织中最显著。结论多种基因改变的累积与胃癌的发生及演进密切相关,不同类型肠化生分子改变机制不同,APC,p53及 Bcl-2基因有可能成为肠型胃癌早期诊断的分子标志。

p16蛋白在大肠癌中的表达及其临床意义

应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测了１０５例大肠癌组织中ｐ１６蛋白。结果：大肠癌ｐ１６蛋白表达阳性率为６０．０％，与癌组织分化程度呈正相关（Ｐ＜０．０１），与癌组织浸润深度和Ｄｕｋｅｓ′分期呈负相关（Ｐ＜０．０１）。无区域淋巴结转移者的ｐ１６蛋白表达阳性率为７６．９％，伴区域淋巴结或远处器官转移者为５０．０％，二者有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。生存超过５年者ｐ１６蛋白表达阳性率（８３．３％）明显高于５年内死亡者（５３．１％），有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。说明ｐ１６基因能抑制大肠癌的浸润与转移。

p53,nm23-H1和CEA表达与大肠癌术后肝脏转移和局部复发的关系

1 材料和方法1.1 材料收集1994-09/1999-09我院外科手术治疗的结直肠癌患者185例标本,其中96例在不同时期出现了肝转移或(和)局部复发;其中男63例,女33例,年龄25岁～81岁,平均54.5岁.右半结肠癌56例,左半结肠癌47例,直肠癌85例.全部病例经手术治疗和病理确诊.该组病例中,第一次手术行根治术85例,姑息性手术11例.术后定期复查,结合 B-US,CT,CEA 提示肝脏转移41例,局部复发55例。

C-erbB-2和CD34在大肠癌中表达及其临床意义分析

目的探讨C-erbB-2和CD34在大肠癌中的表达及其与临床病理指标的关系,为大肠癌的治疗提供理论依据。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法对53例大肠癌患者的癌组织、正常大肠组织中C-erbB-2和CD34表达进行检测,将结果与临床病理指标进行综合分析。结果 C-erbB-2主要是在细胞膜和(或)细胞浆内表达,在大肠癌及正常组织的阳性表达率分别为56.6%和24.5%,二者差异有统计学意义(P<0.01)。C-erbB-2的表达与患者年龄、性别、分化程度、肿瘤大小、生长部位均无关,与Dukes分期、淋巴结转移、肠壁浸润深度均有关(P<0.05)。CD34蛋白表达在大肠癌及正常组织的表达分别为(35.63±12.23)/HP和(6.12±0.97)/HP,二者差异有统计学意义(P<0.01)。CD34的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、生长部位均无关,与Dukes分期、淋巴结转移、分化程度、肠壁浸润深度均有关(P<0.05)。结论 C-erbB-2和CD34在大肠癌组织中高表达,可能参与了大肠癌的发生、侵袭和转移,联合检测可为大肠癌的诊治和预后提供新的参考指标。

MDM_2基因产物在大肠癌中的表达及其临床意义

目的 研究MDM2 基因蛋白表达与大肠癌生物学行为及预后的关系。方法 应用免疫组化LDP法检测 6 0例大肠癌手术标本、30例癌旁组织及 16例大肠良性病变组织中MDM2 基因蛋白的表达。结果 大肠癌组织中 ,MDM2 基因蛋白表达阳性率为 75 % ( 4 5 /6 0 ) ,其中伴有区域淋巴结转移者阳性率为 95 .6 % ( 4 3/45 ) ,无伴有淋巴结转移者阳性率为 13 .3 % ( 2 /15 ) ,两者比较差异有高度显著性 ( χ2 =36 .30 ,P <0 .0 0 1) ;MDM2 基因蛋白表达水平在不同的大肠癌分化程度、浸润深度中差异有高度显著性 ( χ2 分别为 2 8.42 ,2 4.6 7,P均 <0 .0 0 1) ;但在不同的Duke分期、不同年龄组、不同部位及类型的大肠癌之间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;MDM2 基因蛋白表达阳性者术后 5年生存率与阴性者比较差异有显著性 ( χ2 =6 .40 ,P <0 .0 5 )。 30例癌旁组织及 16例良性病变呈阴性表达。结论 MDM2 基因在大肠癌浸润和淋巴结转移过程中发挥重要作用 ,MDM2 基因蛋白的检测 ,可作为大肠癌预后判断的一个重要指标。

Survivin基因和增殖细胞核抗原在大肠癌组织中表达及其意义

目的:探讨Survivin和增殖细胞核抗原PCNA在大肠癌组织中的表达和意义。方法:采用免疫组织化学方法检测正常大肠粘膜、腺瘤和腺癌组织中Survivin和PCNA表达。结果;Survivin在正常大肠粘膜无表达,在大肠腺癌和腺瘤组织中表达的阳性率分别为70.9%和62.5%;大肠癌组和大肠腺瘤组OD值显著高于正常大肠粘膜组;大肠癌组中PCNA-LI为(50.2±13.2)%,显著高于正常大肠粘膜组(12.6±3.1)%和大肠腺瘤组(33.2±7.9)%;大肠癌组中Survivin阳性的PCNA-LI为(61.3±9.3)%,显著高于Survivin阴性的PCNA-LI(36.4±6.6)%。结论:Survivin和PCNA的高表达在大肠癌的发生、发展中起重要作用,PCNA可反映大肠癌的增殖状况,两者可作为判断其预后的参考指标。

大肠癌中增殖细胞核抗原和p53与nm23的表达及意义

目的 研究大肠癌中增殖细胞核抗原PCNA、p5 3、nm2 3的表达及临床病理特征间的关系。方法 应用SP免疫组织化学方法检测 77例大肠癌中PCNA、p5 3、和nm2 3的表达。 结果 PC NA表达强弱与肿块大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期密切相关 ;p5 3与淋巴结转移及临床分期密切相关 ;nm2 3表达与淋巴结转移有统计学意义。结论 PCNA与p5 3蛋白的表达强度与大肠癌的进程呈正相关 ,nm2 3的强表达与淋巴结转移负相关 ,PCNA与 p5 3正相关 ,与nm2 3负相关。由此可见 ,三项指标的综合表达对大肠癌的临床诊治及其预后评估有重要意义。

P16蛋白在大肠癌及癌前病变中的表达及意义

目的探讨抑癌基因P16与大肠癌的发生及临床病理特征之间的关系。方法采用SABC免疫组化技术检测大肠癌、大肠黏膜腺瘤伴异型增生、炎症及正常组织中P16蛋白的表达。结果大肠癌的P16阳性表达率为42.19%,明显低于正常组织、炎症、轻度异型增生(P<0.01),亦低于中度异型增生(P<0.05),与重度异型增生无差别(P>0.05);高分化大肠癌的阳性率高于低分化组(P<0.05),有淋巴结转移组的阳性率低于无转移组(P<0.01);有血道转移组的阳性率低于无转移组(P<0.05);随Ducks分期进展,P16表达率依次下降(P<0.05)。结论P16基因参与大肠黏膜的癌变过程,检测其表达产物可作为判断大肠癌的生物学行为及预后的一个重要指标。

p53和nm23在大肠癌中的表达及其生物学意义

①目的探讨大肠癌组织中ｐ５３及ｎｍ２３的表达与浸润转移的关系。②方法应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测７５例大肠癌中ｐ５３及ｎｍ２３的表达。③结果大肠癌组织中ｐ５３，ｎｍ２３的阳性率分别为５３．３％和６５．３％．ｐ５３过表达和ｎｍ２３低表达均与大肠癌的浸润深度及淋巴结转移有关。ｐ５３在低分化癌中的表达明显高于高分化癌（χ２＝１０．０８，Ｐ＜０．０１），而ｎｍ２３表达与大肠癌分化程度无关（χ２＝３．３９，Ｐ＞０．０５）。④结论ｐ５３高表达和ｎｍ２３低表达在大肠癌的浸润转移中起重要作用。

大肠癌中p16蛋白的表达

①目的研究大肠癌中ｐ１６蛋白的表达与肿瘤分化程度及浸润转移等生物学行为的关系。②方法应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测１０５例大肠癌组织中ｐ１６蛋白的表达。③结果大肠癌ｐ１６蛋白表达的阳性率为６０．０％，随大肠癌分化程度降低、浸润肠壁深度和Ｄｕｋｅｓ分期的进展，原发灶中ｐ１６蛋白表达阳性率降低，差异具有显著性（χ２＝６．４８～１２．８０，Ｐ＜０．０１，０．０５）。无区域淋巴结转移者ｐ１６蛋白阳性率为７６．９％，伴区域淋巴结或远处器官转移者ｐ１６蛋白阳性率为５０．０％，二者差异有显著性（χ２＝７．４０，Ｐ＜０．０５）。④结论ｐ１６蛋白能抑制大肠癌的浸润与转移，ｐ１６蛋白的表达水平可作为判断大肠癌病人预后的生物学指标。

NF1与Twist在胃组织中的表达及其与临床病理相关性的研究

[目的]探讨神经纤维瘤基因(NF1)和转录因子Twist在不同胃组织中的表达状态及意义。[方法]应用免疫组织化学的方法检测NF1和Twist在87例胃癌组织、42例正常胃组织中的表达,比较两者的相关性。[结果]NF1在正常胃组织中阳性率10.3%,胃癌组织中为64.3%,差异有统计学意义(P<0.05);Twist在正常胃组织中阳性率5.0%,胃癌组织中为68.6%,差异有统计学意义(P<0.01)。胃癌组织中NF1与Twist的表达具有负相关性(P<0.01)。NF1高表达组5年生存率明显高于低表达组(52.1%vs 17.6%);Twist高表达组5年生存率显著低于低表达组(17.9%vs 47.8%)。[结论]Twist蛋白在胃癌组织中高表达,NF1蛋白低表达,它们的表达水平与胃癌患者的预后相关。

大肠侧向发育型肿瘤p53、c—myc和Ki-67的表达研究

目的探讨大肠侧向发育型肿瘤（LST）p53、c—mye和Ki-67的基因表达改变及其与大肠腺癌的关系。方法应用免疫组化sP法测定大肠侧向发育型肿瘤、大肠隆起型腺瘤、大肠腺癌的p53、c—myc和Ki-67的表达。结果p53在LST中阳性率为26．3％（10／38），腺瘤和腺癌中的阳性率分别为8．1％（5／62）和69．4％（25／36），各组间阳性表达率差异均有统计学意义（P〈0．05）；c—mye在LST中阳性率为28．9％（11／38），腺瘤和腺癌中阳性率分别为58．1％（36／62）和80．6％（29／36），各组间阳性表达率差异均有统计学意义（P〈0．05）；Ki-67在LST、腺瘤和腺癌中的阳性率分别为23．7％（9／38）、19．4％（12／62）和50．0％（18／36），LST与腺癌以及腺瘤与腺癌组间阳性表达率差异均有统计学意义（P〈0．05），但LST与腺瘤组间阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。LST和隆起型腺瘤中，Ki-67表达均与p53、c—mye表达无关；腺癌中，Ki-67表达与p53、c—myc表达呈显著相关。结论LST、隆起型腺瘤和大肠癌三者具有不同的p53、c—mye和Ki-67表达，提示三者的发生、发展可能存在不同基因调控机制，LST的癌发生途径可能与隆起型腺瘤不同。

XRCC1基因在大肠癌组织中表达的临床病理意义

目的探讨大肠癌XRCCl基因表达的临床病理意义。方法免疫组织化学法检测107例大肠癌、25例癌旁黏膜与36例正常大肠黏膜的XRCCl表达，分析其与临床病理特征的关系。结果XRCCl在大肠癌和癌旁黏膜的阳性表达率分别为87．9％（94／107）和84．0％（21／25），均明显高于正常大肠黏膜[27．8％（10／36）]（P=0．000，P=0．000）；大肠癌中，XRCCl的阳性表达率在低分化组为44．4％（4／9），明显低于中分化组和高分化组的94．8％（50／58）（P=0．000）和87．5％（35／40）（P=0．015）；XRCCl表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、浸润深度及淋巴转移均无明显相关关系（P〉0．05）。结论监测XRCCl表达可能有助于大肠癌的诊断。