基于磁性自组装分子印迹传感器测定赤霉素A3

利用共沉淀法合成了磁性Fe3O4纳米粒子,进一步表面功能化,合成Fe3O4@Au磁性纳米粒子提高粒子表面的亲和性。在高亲和力的金壳表面自组装L-半胱氨酸-GA3,将其滴涂在磁控玻碳电极表面,电聚合L-半胱氨酸制得对GA3具有特异性识别能力的MIP/Fe3O4@Au修饰电极。对Fe3O4@Au磁性纳米粒子的表面形态及粒度分布进行了透射电镜分析,对GA3,MIP及nMIP的结构及成分进行了红外光谱对比分析。利用电化学方法对测试体系的工作条件进行了优化。研究表明,当电聚合圈数为30圈,以乙酸-甲醇（1：8,V/V）作为洗脱液、洗脱时间为5min、重吸附时间为7min时,传感器具有较高的稳定性,且对GA3具有较好的识别效果。结果表明,探针离子K3[Fe（CN）6]/K4[Fe（CN）6]的氧化峰电流值与GA3浓度在1.0×10^-11-1.0×10^-8mol/L范围内呈线性关系,检出限为2.6×10^-12mol/L。此传感器已应用于啤酒中GA3的检测。

低温和植物生长物质对南荻种子萌发的影响

以南荻种子为材料,设4℃低温处理(常温为CK)和GA3、IAA、6–BA和2,4–D 4种植物生长物质(各设4个质量浓度50、100、200、400 mg/L),均以清水为CK,处理南荻种子,测定南荻种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、根长以及芽长等指标。结果表明,与CK相比,4℃低温处理能显著提高南荻种子的发芽率、发芽势,极显著提高南荻种子的发芽指数、活力指数、根长,但芽长差异没有统计学意义;各质量浓度的GA3能显著或极显著提高发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和芽长,其中100 mg/L GA3处理对南荻种子萌发的效果较好;除400 mg/L外,IAA各质量浓度均能提高发芽率、发芽势、活力指数和促进根的生长,其中以50 mg/L IAA处理对南荻种子的萌发效果较好;各质量浓度的6–BA处理能极显著提高南荻种子的发芽率、发芽指数,显著或极显著提高南荻种子的发芽势和促进芽的生长,极显著的降低南荻种子的活力指数和抑制根的生长;2,4–D对南荻种子发芽率、发芽势以及发芽指数的影响都随浓度的增加先升高后下降,各质量浓度的2,4–D可极显著降低南荻种子的活力指数和抑制根的生长,其中以200 mg/L 2,4–D处理对南荻种子萌发的效果较好。

外源激素对露珠杜鹃花期调控的影响

研究了外源激素对贵州百里杜鹃花区露珠杜鹃(Rhododendronirroratum Franch.)始花期、盛花期、末花期和开花数的调控效果。结果表明:高浓度赤霉素和乙烯利均能提前始花期,但前者效果较好;与只喷洒1次相比,连续喷洒5次赤霉素可进一步提前始花期,同时延长盛花期,而乙烯利却没有明显效果;丁酰肼与赤霉素和乙烯利的组合延迟始花期和末花期,而2,4-D与其组合则提前始花期和末花期;赤霉素能显著增加开花数,乙烯利无影响,2,4-D和丁酰肼则减少开花数。

高效液相色谱法测定蔬菜和水果中烯酰吗啉和赤霉素的残留

采用高效液相色谱技术,以草莓、西瓜和西红柿为研究对象,建立了一种快速、准确测定蔬菜、水果中烯酰吗啉与赤霉素残留测定方法。酸性条件下(pH 2.5),样品用乙酸乙酯提取,经弗罗里硅土柱净化后,使用配有紫外检测器的高效液相色谱仪进行检测。结果表明,各组分分离良好,在0.025、0.050、0.100mg/kg这3个添加水平,2种农药的回收率为81.2%~91.3%,相对标准偏差均小于6.7%;在0.025~1.00μg/mL浓度范围内,线性关系良好,相关系数均大于0.9995;烯酰吗啉与赤霉素的检出限分别为为0.01、0.02 mg/kg。该方法准确、灵敏、快速,可满足对蔬菜、水果中烯酰吗啉与赤霉素农药残留的检测需要。

赤霉素对法麦制麦特性的影响

研究了一定浓度的硫酸锌配合不同浓度的赤霉素处理对麦芽生长代谢以及麦芽品质的影响。结果表明,当赤霉素处理浓度为0.10mg/L时,麦芽中有机锌含量最高可达150.9μg/g;赤霉素提高了绿麦芽的呼吸强度和各种酶活性;提高了成品麦芽的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性;影响了麦芽中糖类和蛋白质的含量;赤霉素不同程度地提高了麦芽的酿造品质。

赤霉素对草甘膦的增效作用及其作用机制

将系列浓度的赤霉素(GA3)和草甘膦混合喷施玉米幼苗,研究外源GA3对草甘膦喷施效果的影响。结果表明:10～50 mg.L-1GA3与草甘膦混用,比同剂量草甘膦单剂处理玉米幼苗叶色更黄、萎焉更严重,其中50 mg.L-1GA3对草甘膦增效幅度最强。草甘膦和50 mg.L-1GA3混用喷施后,玉米幼苗的株高、地上部鲜质量、叶片叶绿素含量均明显降低,叶片莽草酸、丙二醛(MDA)含量明显增加。

赤霉素GA_3急性毒性和遗传毒性

目的：研究赤霉素GA3的急性毒性和遗传毒性，为合理使用赤霉素以及赤霉素残留限量标准的制定提供参考。方法：采用最大剂量耐受法测定赤霉素GA3的急性毒性，采用蚕豆根尖细胞微核实验、小鼠骨髓细胞微核实验和小鼠精子畸形实验测定赤霉素GA3的遗传毒性。结果：给昆明种小鼠经口灌胃赤霉素GA3，LD50〉15000mg／kg；赤霉素GA，在质量浓度为0．1～2．0mg／L范围内时，蚕豆根尖细胞微核率呈上升趋势，与阴性对照组相比均存在极显著差异，且微核指数均〉1．5；7．5g／kg赤霉素GA，对雌、雄小鼠的骨髓细胞微核率分别为7．47‰、7．07‰，小鼠精子畸形率为5．47％，与阴性对照组相比均存在极显著差异（P〈0．01）。结论：赤霉素GA3的急性毒性虽然比较低，属于无毒级，但是在较高剂量条件下对植物细胞、动物的体细胞与生殖细胞均具有遗传毒性，应尽快制定赤霉素GA3使用限量标准。

不同预处理对‘香瑞白’梅种子萌发的影响

以‘香瑞白’梅为试验材料,研究了黑暗处理、变温层积、单独使用赤霉素(GA3)或低温层积,以及赤霉素和低温层积、去内果皮相结合的方法对‘香瑞白’梅种子萌芽率的影响,结果表明:以质量浓度为150、300 mg·L-1GA3对‘香瑞白’种子进行浸泡处理,并结合90 d低温层积,种子发芽率最高,可达30%;与不去内果皮处理相比,去内果皮处理能显著提高种子发芽率;全黑暗处理能显著提前‘香瑞白’梅种子的初萌期,且发芽率比光暗交替处理提高了1倍;变温层积处理对种子萌芽率的影响并不显著,萌芽率为0。

棉花中筛选的草甘膦安全剂

为寻找效果快速明显的棉花草甘膦药害安全剂,用0.1%氯吡脲SL、0.004%芸苔素内酯AS、20%赤霉素SP、2%苄·赤SL、0.2%噻苯隆SL、0.136%赤霉素·吲哚乙酸·芸苔素内酯WP组配成16个处理,各加2730mga.i./L的41%草甘膦异丙胺盐AS混合后喷施棉花,以单施草甘膦和空白为对照,结果只有2%苄氨基嘌呤·赤霉素SL13.33mga.i./L+0.004%芸苔素内酯AS0.133mga.i./L处理药后1～7d草甘膦药害低于对照41%草甘膦异丙胺盐AS,在5%、1%水平上显著和极显著;株高恢复率73.84%,产量恢复率44.78%,株高和蕾铃数在1%水平上极显著而筛选到理想的棉花草甘膦安全剂。20%赤霉素A3SP13.33mga.i./L+0.1%氯吡脲SL1.25mga.i./L+0.004%芸苔素内酯AS0.133mga.i./L处理,仅株高恢复率59.66%,在5%水平上显著而对草甘膦有耐毒效果。

高效液相色谱法测定菌肥中赤霉素和吲哚乙酸含量方法研究

建立了一种高效液相色谱法分离测定赤霉素(GA3)和吲哚乙酸(IAA)的方法. 采用Agilent ZORBA×300SB-C18(4.6 mm×250 mm)色谱柱,以甲醇:水=35:65,(V/V,含2%冰醋酸)为流动相,柱温为 25 ℃,流速为0.5 mL/min. 系统讨论了流动相组成及pH对分离的影响. 本法测定GA3和IAA的线性范围分别为25.0～1 000 μg/mL、2.5～50.0 μg/mL. 方法回收率分别为85.63%、90.21%. 并将该方法成功应用于菌肥中GA3和IAA的含量测定,为该类产品的质量控制提供了快速有效的方法.

植物生长调节剂2,4-D和GA_3对微茫藻18A8(Micractinium sp.)生长和油脂积累的影响

实验室分离到1株含油量高并且生长迅速的微茫藻18A8(Micractinium sp.)藻株,将其培养在高碳培养基TAP上,研究了不同浓度的植物激素2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和赤霉素(GA3)对其生物量和油脂积累的影响。结果表明:分别添加2,4-D(2μmol/L)和GA3(1μmol/L)对藻株的生长有明显的促进作用,其最大生物量比对照组分别增加75.26%和47.41%,但其油脂含量与对照组相比却有所降低,分别降低了23.49%和29.89%;而当增加2,4-D和GA3浓度为10和5μmol/L时,对藻株的生长表现出明显的抑制作用,其最大生物量比对照组减少了72.83%和60.70%,但其油脂含量与对照组相比显著增加,分别增加149.45%和95.75%。同时,分别添加2,4-D(10μmol/L)和GA3(5μmol/L)的实验藻种的蛋白质和总糖含量较对照组有所降低,此外叶绿素含量和光合效率也降低。

赤霉素A_3与羟丙基-β-环糊精包合物的制备及其稳定性研究

赤霉素A3(gibberellin A3,GA3)在水溶液中极易异构化为iso-GA3而失去生物活性。本研究利用羟丙基-β-环糊精(hydroxypropyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)对GA3进行包合,采用正交试验设计,确定最优包合条件,以增强GA3在溶液中的稳定性。在此条件下,进一步以溶液中的活性GA3含量为指标,利用豌豆茎伸长生物测试法和超高效液相色谱分析法,对制备的GA3-HP-β-CD进行稳定性检测。结果表明:最优包合条件为n(HP-β-CD)∶n(GA3)=1∶1,在二乙醇胺溶剂(含体积分数20%的吐温-80)中加热至35℃,搅拌2 h,包合率为81.7%;在此条件下,利用紫外可见分光光度法验证了包合物的生成;在(54±2)℃条件下贮藏14 d后,GA3水溶液中的活性GA3几乎全部降解,而GA3-HP-β-CD包合物溶液中GA3的降解率仅为34%。本研究揭示,利用羟丙基-β-环糊精对GA3进行包合,是提高GA3水溶液稳定性的一种有效途径。

3种植物生长调节剂的HPLC分离分析方法

在系统优化了流动相组成、流速及柱温等色谱条件后,采用Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为固定相,体积比为40∶60的甲醇-水(含0.2%冰醋酸和0.1%四氢呋喃)二元溶剂体系为流动相,在流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10.0μL,检测波长为210 nm的条件下,建立了1个同时分离测定赤霉素(GA)、6-糠氨基嘌呤(6-KT)和吲哚乙酸(IAA)的高效液相色谱方法.该方法可以在12 min内实现微生物菌体及其发酵液中这3种组分的同时分离测定,相对标准偏差在5.0%以内,回收率在106.5%～91.9%之间.

高效液相色谱串联四极杆质谱法同时测定豆芽中7种药物残留

为加强对豆芽类产品的监管,研究豆芽中7种药物(6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、2,4-D、赤霉素、多菌灵、腐霉利和恩诺沙星)同时检测的方法。该方法使用乙腈对豆芽中7种药物进行同时提取,使用高效液相串联四极杆质谱仪对上述7种药物进行检测。7种药物在0.01~10μg/mL(多菌灵和恩诺沙星在0.01~1μg/mL)内线性良好(R2≥0.987)。两种豆芽中7种药物的3个添加量(分别为0.002、0.2、0.5 mg/kg)回收实验结果表明:7种药物的回收率为60.31%~108.51%,相对标准偏差为1.03%~13.10%。方法检出限为0.010 5~0.125μg/kg。

植物根际促生菌发酵液中植物激素含量的液液萃取-高效液相色谱测定法

植物根际促生菌分泌的植物激素在植物生长过程中发挥着重要作用,能够调节植物生长、发育及抗逆的各个过程。了解植物根际促生菌分泌的植物激素含量,对优良促生菌资源的筛选至关重要。本研究建立了高效液相色谱法以快速准确测定植物根际促生菌发酵液中植物激素含量。样品用超纯水-乙酸乙酯(体积比1:2)提取,以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C色谱柱分离,采用体积比45:55的甲醇-水(含0.2%冰乙酸)作为流动相,流速为0.8mL·min^(-1),柱温为30℃,进样体积为10μL,在254 nm检测波长下进行检测。结果表明:3种植物激素在测定的浓度范围内线性关系良好,相关系数(R~2)均大于0.997,样品的平均加标回收率为88.02%~108.40%,相对标准偏差(n=3)为0.02%~6.51%。该方法简单、快速,适用于植物根际促生菌中3种植物激素同时测定,研究结果为今后微生物肥料的研制应用提供了菌种资源与参考。

2,4-表油菜素内酯和赤霉素对微拟球藻产油率及脂肪酸组成的影响

分别研究了2,4-表油菜素内酯(EBR)、赤霉素(GA_3)对微拟球藻大洋种生长、产油率及脂肪酸组成的影响。结果表明,5、15 mg/L EBR能显著促进微拟球藻生长和提高其产油率,产油率较对照组分别增加了7.85%和13.97%,但对单位质量藻细胞总脂含量影响不大。50 mg/L EBR则显著抑制该藻生长。5、15和50 mg/L GA_3均显著促进微拟球藻生物量积累。50 mg/L GA_3处理组生物量最高(0.337 g/L),但总脂积累受到一定抑制。总体来看,15 mg/L GA_3对微拟球藻产油率提升效果最显著,达8.184 mg/(L·d)。添加EBR(5、15 mg/L)和GA_3(5、15、50 mg/L)浓度后,饱和及单不饱和脂肪酸(16∶0、16∶1、18∶1)占比下降,多不饱和脂肪酸(18∶2、20∶4和20∶5)占比显著提高。

高效液相色谱法测定水稻穗部的GA_3含量

以水稻穗部为材料,探索内源赤霉酸(Gibberellin A3,GA3)的提取和纯化方法,利用高效液相色谱法建立分析测定方法。针对水稻样品富含色素和多酚类等杂质的特点,用氯仿去除色素,然后采用三步萃取法纯化GA3。在以往用高效液相色谱法分析植物内源激素的研究基础上,试验对色谱条件进行了改进。研究发现,最优色谱条件包括紫外检测器在254 nm波长下进行检测,以乙腈—水—乙酸(体积比为20∶79∶1)溶液为流动相,流速为1.0 mL.min-1等条件下峰形良好且保留时间稳定。结果表明,按照本试验流程,样品的添标回收率在80%以上,且相对标准偏差小于3%,较高的回收率和精密度表明本试验流程可以准确地分析测定水稻穗部GA3。

IAA和GA3对弱光胁迫下甜瓜幼苗生长及光合的影响

研究弱光胁迫下生长素(indole-3-acetic acid,IAA)和赤霉素(gibberellins A3,GA_3)对甜瓜生长和光合的影响。结果表明:(1)50%自然光处理7 d抑制甜瓜植株生长和叶绿素的合成,Pn和Gs明显下降,而Ci显著升高,说明弱光条件下非气孔限制因素是引起甜瓜Pn下降的主要原因。(2)IAA和GA_3能缓解弱光生长抑制,显著提高叶面积和株高,IAA还能显著增加植株粗度。(3)IAA和GA_3处理能提高甜瓜生物量,尤其是弱光条件下促进植株生物量积累的效果更明显。(4)外施IAA促进甜瓜叶绿素的合成,GA_3对叶绿素的合成起抑制作用,弱光下这种促进或抑制效果大于自然光下的。(5)正常光下IAA和GA_3处理对甜瓜植株光合能力有一定的抑制作用,而弱光条件下两种激素处理会促进光合,Pn显著升高,分别提高了39.49%、200.43%;GA_3能提高Gs,而IAA对Gs影响非常小;只有自然光下的GA_3处理能显著提高Tr;自然光下外施IAA和GA_3降低植株的WUE,而在弱光条件下能提高WUE,其中GA_3提高程度达显著水平,为174.60%。由此可见,外源IAA和GA_3能保护弱光胁迫下甜瓜植株的光合机构,维持较高的光合能力,促进物质的积累,使植株能健壮生长,对甜瓜植株的弱光耐受性具有正调控作用。