含DESs体系中固定化Kurthia gibsonii SC0312细胞催化1-苯基-1,2-乙二醇不对称氧化反应

在含深度共熔溶剂的非水相体系中,利用固定化Kurthia gibsonii SC0312细胞高效催化外消旋1-苯基-1,2-乙二醇(PED)不对称氧化以制备对映体纯的(S)-PED.在所考察的4种离子液体和2种深度共熔溶剂中,氯化胆碱/尿素([ChCl][U])对Kurthia gibsonii SC0312细胞表现出良好的生物相容性,能适当改变细胞膜的完整性,有效提高反应的催化效率.在[ChCl][U]体积分数为4%、缓冲液pH值为7.5、反应温度为35℃、细胞质量浓度为60 mg/mL、底物浓度为100 mmol/L的条件下,反应初速度为8.25 mmol/(L·h),反应仅7 h产率及(S)-PED e.e.值即分别达49.6%和99.9%.

Purification and Characterization of Three Alkaline Endopolygalacturonases from a Newly Isolated Bacillus gibsonii

A newly isolated Bacillus gibsonii,designated as S-2(CGMCC1215),was cultivated for production of alkaline pectinases utilizing sugar beet pulp as growth substrate.Purification of three alkaline endopolygalacturonases(endoPGs)from the crude pectinases extract was carried out by ultra-filtration,ammonium sulphate fractionation and ion-exchange chromatography,and their enzyme activities characterized.The three purified alkaline endoPGs,designated as S-I,S-II,and S-III,had a molecular weight about38kDa as determined by SDS-PAGE.The Km value and optimal temperature for optimal enzyme activities of S-I,S-II and S-III were1.2mg/mL and60℃,0.9mg/mL and55℃,1.1mg/mL and60℃,respectively.Their best performances were given at an optimal pH10.5,and sodium polygalacturonate was found to be the best substrate.The isoelectric points of S-I,S-II and S-III were5.4,7.4,and8.2,respectively.Surfactants of Tween-80and Tween-20and metal ions such as Mg2+and Ca2+stimulated the activity of S-I,S-II and S-III,whereas S-III was inhibited by Ca2+,and Mn2+and Zn2+ions inhibited the activity of the three enzymes.

吉氏芽胞杆菌来源来氟米特分析与检测

目的对吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019来源的来氟米特成分进行分析与检测。方法 采用高效液相四级杆飞行时间质谱分析吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019发酵液中胞外代谢物的成分。运用安捷伦公司的Mass Hunter软件,对数据进行分子特征提取(MFE),并通过Metlin代谢物质谱数据库检索,获得总体代谢物的信息。结果 在吉氏芽胞杆菌Bacillus gibsonii FJAT-10019发酵液中,用液相质谱检测到561种代谢物,通过Metlin谱库搜索得到初步鉴定结果的有15种。其中,来氟米特是相对含量和匹配率最高的成分。来氟米特的匹配得分达到90.89,占其发酵液总代谢物相对含量的1.14%。来氟米特的保留时间为6.522分钟,精确质量数为270.0623。结论 为吉氏芽胞杆菌来源的该免疫调节剂的开发与利用提供理论依据。

1株吉式库特菌噬菌体vb_KgiM_P1的生物学特性及全基因组分析

吉式库特菌在自然界普遍存在,有的作为机会致病菌可引起动物疾病。本研究发现了1株吉式库特菌(Kurthia gibsonii)噬菌体vb_KgiM_P1(简称MP1),并对其生物学特性和全基因组进行研究。透射电镜观察显示MP1具有典型的二十面体结构的头部和可收缩的尾部,属于肌尾病毒科(Myoviridae)。生物学特性研究表明,MP1的最佳感染复数为1,裂解周期在50 min左右,潜伏期约为15 min,暴发期约为50 min,平均暴发量约为83 PFU/cell,表明该噬菌体有高效的杀菌活性。MP1的稳定性良好,在25~50℃之间和pH值3~11之间保持稳定的裂解活性。全基因组测序显示该噬菌体基因组全长为15855 bp,G+C含量为32%,有20个开放阅读。系统发育分析结果表明MP1与葡萄球菌噬菌体和肠球菌噬菌体属于共同起源的不同进化分支,且相似性较低,证明MP1是1株全新的烈性噬菌体。

高产碱性果胶酶吉氏芽孢杆菌的诱变育种与固态培养条件优化

以吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)S-2为出发菌株,经紫外线诱变育种,得到产碱性果胶酶较高的新菌株2249。优化后的固态培养基为甜菜粕5g、酵母膏0.15g、KH2PO40.0075g、Na2CO30.12g、水15mL、液体种子种龄为24h、接种量为2mL、培养温度为35℃、培养时间为72h,酶产率达到6.05kU/g(干甜菜渣),较出发菌株S-2提高68%。该酶的最适pH10.0、最适温度为55℃,NaCl、MgSO4、CaCl2、KCl对酶活有明显激活作用,CuSO4、ZnSO4对酶活有明显抑制作用。

吉氏芽孢杆菌S-2菌株固态发酵制备碱性果胶酶

通过吉氏芽孢杆菌(Bacillusgibsonii)S-2菌株制备碱性果胶酶的固态发酵条件优化以及酶的部分性质分析,结果表明:甜菜粕是最佳碳源和酶的诱导物,酵母膏和麸皮作氮源较适宜。固体培养基的组成为:甜菜粕5g、酵母膏0.15g、KH2PO40.023g、Na2CO30.09g、水15mL;培养温度35℃、发酵时间48h、产酶率可达3600U/g。该酶具有果胶水解酶和果胶裂解酶的活性,在pH=10.5、反应温度60℃时活力最高,Ca2+对该酶有明显的激活作用,Mn2+、Cu2+、Zn2+对该酶有强烈的抑制作用。

碱性果胶酶诱导植物抗病的研究

对碱性果胶酶诱导黄瓜抗病作用进行了研究。结果表明,菌株吉氏芽孢杆菌S-2(B.gibsoniiS-2)和克劳氏芽孢杆菌S-4(B.clausiiS-4)发酵生产的碱性果胶酶对黄瓜黄化苗具有诱导抗病作用。在不同酶活的处理中,S-2(200u/ml)和S-4(20u/ml)碱性果胶酶对黄瓜叶和茎上黑星病的病情指数降低最多,其诱导防病效果分别达到73.7%,80.0%和80.6%,86.6%。pH变化对碱性果胶酶的诱导抗病作用影响显著。碱性果胶酶S-2(200u/ml)和S-4(20u/ml)在pH8.0时诱导防病效果较好,它们对黄瓜叶和茎上黑星病的诱导防病效果分别达到64.8%,78.5%和75.0%,87.8%。