银杏外种皮提取物干预肿瘤抗原致敏淋巴细胞对Heps的杀伤作用

目的:研究在银杏外种皮提取物(GBEE)干预下,肿瘤抗原致敏淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:用正常小鼠的脾脏制备脾淋巴细胞悬液(Lc);用反复冻融法处理肝癌Heps细胞,取其离心上清液制成肿瘤抗原(Ag);以脾淋巴细胞与肿瘤抗原体积比=2∶1配成的肿瘤抗原致敏淋巴细胞溶液(AgLc)和浓度为480μg/mL的GBEE充分混合置于6孔板中,培养箱中培养后,将其加入接种了Heps细胞的孔板中再培养。此为GBEE+AgLc+Heps细胞组,同时设置Heps组、Lc+Heps组、AgLc+Heps组、GBEE+Heps组、GBEE+Lc+Heps组等组别,用MTT法测定各组淋巴细胞对Heps肝癌细胞的体外杀伤活性。结果:肝癌Heps肿瘤抗原致敏的淋巴细胞对Heps细胞的杀伤作用增强,杀伤率为10.63%,与Lc+Heps对照组比较具有统计学差异(P<0.05),GBEE+AgLc+Heps组杀伤肿瘤细胞作用最为明显,杀伤率为50.59%,显著高于其他组(P<0.05)。结论:GBEE能促进肿瘤抗原致敏淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。

银杏外种皮提取物对苹果链格孢霉的抑制作用

为研究银杏外种皮提取物(Ginkgo biloba exocarp extract,GBEE)对苹果链格孢霉的抑制作用,采用乙醇提取法和水提取法提取银杏外种皮活性成分,并采用菌丝生长速率法,测定银杏外种皮提取物对苹果链格孢霉的抑制效果,研究银杏外种皮乙醇提取物对苹果链格孢霉孢子萌发和芽管伸长的影响。通过测定电导率,蛋白质、核酸的渗漏量,细胞膜损伤程度以及抗性相关酶活性来进一步研究抑制行为。GBEE的抑菌作用呈浓度依赖性,水溶性提取物于1 200 mg/L抑菌率达到16.94%,乙醇提取物于1 200 mg/L抑菌率达到61.39%,约为水溶性提取物的3.6倍。银杏外种皮乙醇提取物使苹果链格孢霉菌体细胞膜通透性增加,膜脂过氧化程度加剧,丙二醛(malondialdehyde,MDA)和H2O2含量升高,胞内核酸、蛋白质外泄,抑制抗性相关酶活性,通过光学显微镜观察到乙醇提取物处理组的链格孢霉菌无细胞壁间隔。乙醇提取物的抑菌效果比水提物好,通过破坏苹果链格孢霉菌的细胞膜完整性和抑制抗性相关酶活性来达到抑菌目的。

HPLC测定银杏外种皮多糖的分子质量及含量

目的:建立银杏外种皮多糖的分子质量及含量的HPLC测定方法.方法:以葡聚糖为标样,采用HPLC法,PL aquagel-OH MIXED(7.5 mm×300mm,8 μm)色谱柱,柱温25℃,示差折光检测器,流动相为超纯水,流速1.0mL·min-1.结果:银杏外种皮多糖的分子质量为11 062.5,RSD 0.78%(n=6);含量为68.7%,RSD 3.4%(n=6),葡聚糖(分子质量为12 000)在1～20 μg呈良好线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为97.9%,RSD 2.5%.结论:本方法灵敏度高,操作简便,重复性好,可用于银杏外种皮多糖的分子质量和含量的测定.

银杏外种皮多糖对胃癌的临床及超微结构研究

目的 :观察银杏外种皮多糖制剂对胃癌的临床疗效及超微结构的影响。方法 :2 8例胃癌患者给予银杏外种皮多糖胶囊 ,po,每次 2粒 ,bid ,30d为 1个疗程 ,连服 1～ 3个疗程。治疗前后用电子胃镜观察并测量瘤体大小 ,用透射电子显微镜观察瘤细胞的超微结构 ,用图像分析仪对瘤细胞进行图像分析 ,计算核质比及异染色质面密度 ,同时观察患者的主要临床表现。结果 :银杏外种皮多糖可使胃癌患者的疼痛减轻、食欲增强 ,可使胃癌瘤体缩小 ,抑制率为 4 8% ,有效率为 78.5 %。超微结构观察提示银杏外种皮多糖有诱导癌细胞凋亡和分化迹象。结论 :银杏外种皮多糖制剂对胃癌有治疗作用。诱导癌细胞凋亡和分化可能是其抗肿瘤作用机制之一。

银杏外种皮提取物对C_(57)BL/6J小鼠Lewis肺癌转移的抑制作用及其机制

目的研究银杏外种皮提取物(GBEE)对小鼠Lewis肺癌转移的抑制作用及其作用机制。方法制备C57BL/6J小鼠Lewis肺癌转移模型,随机分为正常对照、模型对照、替加氟80 mg·kg-1(阳性对照)和GBEE 50,100和200 mg·kg-1治疗组。正常和模型对照组ig给予等体积生理盐水,给药组分别ig给予相应药物,每天1次,连续15 d。给药结束后第2天剥瘤称取瘤质量,计算抑瘤率;摘取肺组织,Bouin's液固定后于解剖显微镜下计数肺表面转移灶,计算肺癌转移率和抗转移率;放射免疫法测定血清Ⅳ型胶原(ColⅣ)和透明质酸(HA)的含量;免疫组织化学法检测移植瘤细胞CD44和nm23-H1蛋白的表达。结果 GBEE 50,100和200 mg·kg-1对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌移植瘤生长具有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01),移植瘤瘤质量分别为2.6±0.4,2.3±0.4和(2.3±0.6)g,抑瘤率分别为21.3%,32.2%和29.6%。模型对照组小鼠Lewis肺癌转移率为70%,GBEE 50,100和200 mg·kg-1治疗组肺癌转移率分别为50%,30%和40%。与模型对照组比较,GBEE 100 mg·kg-1治疗组小鼠肺癌转移灶明显减少(P<0.01),抗转移率为87.5%;50和200 mg·kg-1无明显影响。与模型对照组比较,GBEE 50,100和200 mg·kg-1可明显降低小鼠血清中ColⅣ和HA含量(P<0.01),抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤细胞CD44蛋白表达,并促进nm23-H1蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论 GBEE对Lewis肺癌转移模型小鼠具有抗肿瘤转移作用,其机制可能与增加肿瘤转移抑制基因nm23-H1表达、抑制肿瘤细胞黏附分子CD44表达并降低血清ColⅣ和HA含量有关。

银杏外种皮多糖的成分分析

本文报道银杏外种皮多糖的提取及成分分析。粗多糖得率为6.58％,其中总糖含量为89.7％,还原糖含量为5.1％,多糖为84.6％。粗多糖水解物中含葡萄糖、果糖、半乳糖及鼠李糖。茚三酮反应、UV光谱提示该多糖含氨基酸或蛋白质。IR谱有多糖的特征峰,表明含酰胺键和含呋喃糖构型,且为α-苷键。由此,可认为该多糖为α-苷键肽多糖。

银杏外种皮多糖的提取和纯化工艺研究

考察温度、料液比、时间以及提取次数对多糖提取率的影响,确定最佳提取条件。水提醇沉得到的银杏外种皮中多糖(GBEP)含有一定的蛋白质,以多糖的损失率和蛋白质的去除率为指标,比较三种方法:三氯乙酸法、Sevage法、酶法去除GBEP中蛋白质的效率。结果表明,用酶法除蛋白时,多糖的损失率最低;Sevage法除蛋白最彻底,重复多次操作后可以得到不含蛋白质的多糖,虽然多糖损失较多,但有利于进一步的实验研究。AB-8树脂对多糖脱色率为66.35%。

银杏外种皮挥发性成分分析

采用同时蒸馏萃取和固相微萃取两种萃取技术提取银杏外种皮的挥发性成分,并采用气相色谱-质谱联用对其挥发性物质成分进行分离鉴定。结果共鉴定出29种挥发性化合物,包括酸类9种、酯类9种、酮类3种、醛类1种、醇类4种、烃类1种、杂环类化合物2种,两种萃取物中都鉴定出的挥发性成分有12种。经SDE-GC-MS分析出的相对含量较高(峰面积比>1%)的化合物有己酸(65.88%)、丁酸(21.46%)、棕榈酸(4.53%)、辛酸(1.15%);经固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析出的相对含量较高(峰面积比>1%)的化合物有丁酸(59.96%)、己酸(25.45%)、己酸甲酯(3.90%)、丁酸甲酯(3.59%)、乙酸(1.65%)。根据分析出的挥发性成分的香气特征可知对银杏外种皮挥发性气味贡献较大的物质有丁酸、己酸、丁酸甲酯和己酸甲酯等。

银杏外种皮多酚提取工艺及抗氧化性能研究

以银杏外种皮为原料,用乙醇为溶剂提取其中的酚类化合物,研究银杏外种皮多酚(polyphenol exocarp of ginkgo biloba,PEGB)粗提物的乙醇提取工艺条件及抗氧化性能。选择乙醇体积分数、浸提时间、浸提温度、料液比四个因素进行单因素实验,通过响应面法进一步优化提取条件。结果表明,最佳提取工艺条件为乙醇浓度70%,浸提时间2.6h,浸提温度90℃,料液比1∶30,此条件下多酚的提取率为5.33mg GAE/g。PEGB粗提物对DPPH自由基和羟基自由基的清除能力随浓度升高而增强。当PEGB粗提物浓度为0.5mg/mL时,对DPPH的清除率为84.25%,对羟基自由基的清除率为78.89%,表明高浓度的PEGB粗提物具有较强的抗氧化性能。

银杏外种皮多糖对人宫颈癌细胞系Siha增殖及侵袭的影响

目的研究银杏外种皮多糖(Ginkgo biloba exocarppolysaccharides,GBEP)对宫颈癌细胞生长及增殖的影响。方法通过经典方法提取银杏外种皮多糖,通过MTT方法检测GBEP对处理宫颈癌细胞增殖的影响;Transwell检测GBFP对宫颈癌细胞迁移的作用;通过Real time PCR和ELISA检测细胞迁移相关蛋白MMP-2的表达。结果银杏外种皮多糖处理后的宫颈癌细胞增殖抑制率上升,与对照组比较,差异有统计学意义。银杏外种皮多糖用药后,迁移能力降低,MMP-2基因表达下降。结论银杏外种皮多糖对宫颈癌细胞的增殖和迁移可能会起到抑制作用。

大孔吸附树脂纯化银杏外种皮多糖的研究

目的：探讨大孔吸附树脂AB-8对银杏外种皮多糖的吸附性能及其影响因素。方法：采用单因素实验优选AB-8树脂的纯化条件。结果：以流速为1．0ml／min，原样浓度为10mg／ml，pH值为7．4～7．6之间的组合上柱，银杏外种皮多糖的纯化效果最好。结论：AB-8树脂吸附性较好，多糖洗脱容易，纯化后多糖含量达81．3％。

银杏外种皮提取物对植物种子萌发及幼苗生长的影响

以萝卜和黄瓜种子为试验材料,研究了不同质量浓度的银杏外种皮提取物溶液对2种植物种子萌发及幼苗生长的影响.结果表明：提取物溶液在一定质量浓度范围内对萝卜、黄瓜种子萌发及幼苗生长具有显著抑制作用.当质量浓度20～100 g/L时对萝卜种子萌发具有显著的抑制作用,0.1～100 g/L时对萝卜根、茎生长显著抑制;当质量浓度0.02～25 g/L时对黄瓜种子萌发、根生长具有显著的抑制作用.

银杏外种皮提取物重金属元素与银杏酸测定

目的:本研究旨在检测银杏外种皮提取物(Ginkgo Biloba Exocarp Extracts,GBEE)中,5种重金属元素和银杏酸的含量。方法:实验采用水提醇沉法制备6个不同产地的GBEE;采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定铅、镉、铜、砷4种重金属元素含量,原子荧光光度法(AFS)测定汞元素含量;采用HPLC法检测银杏酸含量。结果:6个产地的GBEE中,铅、镉、铜、砷、汞的含量均在《中国药典》限量水平以下;且均不含任何银杏酸。结论:GBEE中不含银杏酸成分,其重金属元素含量符合《中国药典》限量规定。

刺梨对银杏外种皮中银杏酸含量的影响

目的通过测定刺梨和银杏外种皮混合前后银杏酸含量的变化,探讨银杏外种皮和刺梨混合减毒的机制。方法银杏酸含量测定采用RP-HPLC法,选用依利特E1823707色谱柱,甲醇-水(2∶3)用冰乙酸调pH至3.15为流动相,检测波长为310 nm,流速为0.7 ml/min。结果加入刺梨后银杏酸含量明显降低。结论刺梨和银杏外种皮混合提取,可降低提取物中银杏酸的含量。

银杏外种皮总黄酮的提取及其抗氧化活性研究

以乙醇体积分数、温度、浸提时间、固液比为考察因素,对银杏外种皮黄酮的提取工艺进行单因素及正交实验优化,以比色法测定其含量,确定最佳提取条件,并对银杏外种皮总黄酮的抗氧化性进行了初步研究。结果表明,银杏外种皮总黄酮的较优提取条件为:乙醇体积分数80%,温度70℃、液固比25:1,浸提时间2h,此时提取率为91.01%。银杏外种皮总黄酮具有良好的体外抗氧化能力。当黄酮浓度为0.75mg/mL时,和0.10mg/mL的抗坏血酸的还原能力相当。银杏外种皮总黄酮清除DPPH·、O2-·和·OH的半数抑制浓度各为0.1654、0.8519、0.3843mg/mL。

2种银杏外种皮多糖的成分及药效学比较研究

目的 :比较 2种银杏外种皮多糖的成分及对肿瘤细胞的影响。方法 :从新鲜和晒干的银杏外种皮中提取多糖 ,对二者进行理化测定及纸层析比较 ,并测得多糖粗制品的得率、总糖含量及多糖含量。同时 ,比较 2种多糖对肿瘤细胞的影响。结果 :2种外种皮多糖的提取方法及关键技术基本相同 ;均为肽多糖 ;二者粗制品的得率、总糖含量及多糖含量均较高 ;体外对S180 细胞的抑制作用在 10～ 16 0 μg·mL-1剂量下呈现量效关系 ,抑制率分别为41%～ 82 %和 45 %～ 86 %。结论 :新鲜和晒干的 2种银杏外种皮中皆含有丰富的肽多糖 ,其多糖的理化性质相似 ,多糖的含量及对S180

银杏外种皮多糖抑制J亚群禽白血病病毒在DF-1细胞中的复制

为研究银杏外种皮多糖抑制J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)复制的能力,在不同时间点加入银杏外种皮多糖处理DF-1细胞,利用q RT-PCR、免疫蛋白印迹以及病毒滴度检测等方法,观察银杏外种皮多糖对ALV-J复制的影响,结果表明银杏外种皮多糖就能够显著地抑制病毒基因表达、蛋白合成以及病毒在细胞内的增殖,并且这种抑制作用具有时间和剂量依赖性。同时银杏外种皮多糖处理还明显抑制病毒感染细胞中的IL-1β、TNFα等细胞因子的表达。银杏外种皮多糖在DF-1细胞中具有抑制ALV-J复制的能力,具有作为抗ALV-J药物的潜力。

银杏外种皮对生菜生长及生理特性的影响

为了探讨银杏外种皮对生菜的化感作用,采用盆栽方法,分别设置5个外种皮施用量(0、15、30、60、90 g/盆)处理,研究银杏外种皮对生菜生长、抗氧化酶系统、渗透调节物质含量以及光合参数的影响。结果表明:随着银杏外种皮施用量的增加,生菜的主根长和地上部鲜重呈先上升后下降的趋势,而株高和茎粗则不断下降,在施用量为90 g/盆时生菜的各生长指标均达到最低值;生菜的光合色素含量随银杏外种皮施用量的增加呈下降趋势,各处理不同光合色素含量与对照相比均显著下降;生菜超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性、游离脯氨酸含量及可溶性蛋白含量随银杏外种皮施用量的增加均先上升后下降,但丙二醛(MDA)含量并未显著增加;生菜净光合速率Pn、胞间CO_2浓度Ci和蒸腾速率Tr随银杏外种皮施用量的增加呈先上升后下降的趋势,气孔导度Gs则不断下降。综上所述,银杏外种皮对生菜产生了明显的化感作用,对生菜的生长、生理和光合指标总体呈抑制作用,并且随着施用量的增加,抑制作用不断加强。

银杏外种皮提取液对桑叶生长、生理指标及蚕茧质量的影响

以桑树品种‘强桑1号’为试材,进行叶面喷施5个浓度(A^E处理依次为2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 g/L)的银杏外种皮提取液处理和1个空白对照CK(蒸馏水)处理,分析不同处理对桑叶生理生化指标的影响。使用处理后桑叶喂食家蚕,分析处理后桑叶对蚕茧品质的影响。结果表明:桑树的单株枝条长、叶长、净光合速率、桑叶产量、全碳含量、全磷含量、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量均在处理C时达到最大值,与CK相比分别增加了20.12%、24.71%、18.37%、32.99%、20.69%、21.00%、24.88%和42.82%;桑叶的叶宽、叶面积和全氮含量在处理D时达到最大值,与CK相比分别增加了19.87%、45.06%和19.55%。蚕茧的全茧量、茧层量和茧层率在处理C时达到最大值,分别比CK提高了11.64%、25.64%和11.42%。基于隶属函数综合评价的各处理排序为C>D>E>B>A>CK,其中处理C(10 g/L)对桑树枝条的生长、桑叶的产量和品质、蚕茧质量和品质的促进效果最佳。综上,适当浓度的银杏外种皮提取液处理能够显著促进桑树枝条的生长,提高桑叶产量与质量,喂食处理后的桑叶获得的蚕茧产量和品质也相应提高。

银杏多糖的研究进展

综述银杏叶多糖、银杏外种皮多糖和银杏白果多糖提取方法、结构特性以及生物活性等方面的国内外研究进展,为人们正确认识银杏多糖提供参考和依据。