人参(Panax ginseng)根系分泌物成分对人参致病菌的化感效应

采用室内培养结合生物学测定的试验方法,研究了不同浓度人参(Panax ginseng)根系分泌物成分苯甲酸、邻苯二甲酸二异丁酯、十六酸和2,2二-(4羟-苯基)丙烷对人参立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、黑斑菌(Alternaria panax)、疫病菌(Phytophthora cactorum)、菌核菌(Sclerotinia schinseng)、锈腐菌(Cylindrocarpon destructans)和绿色木霉菌(Trichoderma viride)菌落生长及孢子萌发的化感效应。结果显示,不同浓度人参根系分泌物成分对人参致病菌及绿色木霉菌的化感效应存在显著差异。苯甲酸浓度与人参立枯丝核菌、菌核菌和锈腐菌菌落生长以及人参黑斑菌、锈腐菌孢子萌发呈负相关,与人参黑斑菌、绿色木霉菌菌落生长呈正相关;对人参疫病菌菌落生长的化感效应表现为低浓度和高浓度抑制,中浓度促进。邻苯二甲酸二异丁酯浓度与人参立枯丝核菌、黑斑菌、菌核菌和绿色木霉菌菌落生长以及人参黑斑菌孢子萌发呈负相关;对人参锈腐菌菌落生长和孢子萌发表现为低浓度和高浓度抑制,中浓度促进;对人参疫病菌菌落生长表现为低浓度和中浓度抑制,高浓度促进。2,2二-(4羟-苯基)丙烷浓度与人参立枯丝核菌、黑斑菌、疫病菌、绿色木霉菌菌落生长以及人参黑斑菌、锈腐菌孢子萌发呈负相关;对人参菌核菌、锈腐菌菌落生长表现中浓度促进,高浓度抑制。十六酸浓度与人参锈腐菌、疫病菌和绿色木霉菌菌落生长呈正相关,与人参锈腐菌孢子萌发呈负相关,对黑斑菌孢子萌发表现为中浓度抑制。4种根系分泌物的等量混合物浓度与人参致病菌及拮抗木霉菌菌落生长速率呈负相关。

陕西省西洋参根结线虫病的发生和病原鉴定

为明确陕西省西洋参根结线虫病病原,采用常规形态鉴定结合分子生物学方法,对在陕西省留坝县严重发生的西洋参根结线虫病进行病原鉴定。结果表明:二龄幼虫蠕虫形,口针基部球小而圆,尾部透明区明显,尾尖钝圆;雌虫虫体梨形或近椭圆形,口针杆部后部稍宽,口针基部球近圆形较小有缢缩。雌虫会阴花纹呈近圆形,线纹平滑呈波浪状,尾端区有刻点,背弓较为低平。结合特异性PCR扩增及根结线虫属rDNA-ITS序列系统发育树构建结果,该病原鉴定为北方根结线虫Meloidogyne hapla。

基于“扶正祛邪”思想探讨人参在新冠肺炎中的应用

新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)目前尚无特效药物,变异毒株的不断出现使得人类抗击新冠肺炎的道路变得更加漫长和困难。新冠肺炎诱发的细胞因子风暴所造成的肺损伤极易导致脆弱人群出现重症/危重症和死亡。新冠肺炎脆弱人群符合中医气虚证,主要病机为正气亏虚,疫毒内陷,治疗上当注重扶正祛邪。人参乃扶正祛邪的要药,人参及其组方在新冠肺炎的治疗中疗效显著,具有潜在的多层次、多靶点抑制细胞因子风暴的可能,能够截断病势,降低脆弱人群重症/危重症发生率和死亡率。

人参根际土壤中拮抗人参病害微生物的筛选

【目的】筛选对人参主要病原菌拮抗率更高、抑菌谱更广的新菌株生防菌种资源.【方法】稀释平板法分离拮抗菌;平板对峙法筛选拮抗菌.【结果和结论】筛选出对人参单一病原菌有高拮抗活性的放线菌7株,对人参疫病、菌核病、灰霉病、黑斑病、锈腐病、立枯病、根腐病拮抗率分别为80.84%、82.46%、66.08%、71.33%、64.63%、85.53%、65.11%,其中对7大人参病害均有高拮抗活性的菌株有5株,包括1株木霉菌、4株放线菌.研究结果表明,可利用人参根际土壤中的有益菌研究其生防潜力,用于人参主要病害的防治.

人参病原菌拮抗放线菌的分离筛选与鉴定

采用平板对峙法、生长速率测定法等对人参根际分离得到的4株放线菌的抑菌活性进行了研究,并通过形态学特征观察、生理生化测定和16S rDNA序列分析进行分类鉴定。结果表明,4株放线菌对人参常见病病原真菌的抑菌效果明显。其中,FX-10对毁灭柱孢菌、灰葡萄孢菌和FX-61对人参核盘菌的抑制率分别达到91.28%、91.8%和90.07%。FX-10、FX-61、FX-137对人参的5种病原菌和FX-139对人参的7种病原菌有抑制作用,并且抑菌效果稳定。通过形态、生理生化和分子生物学鉴定,FX-139为酒红土褐链霉菌(Streptomyces vinaceus-drappus),FX-10为黑浅灰链霉菌(Streptomyces nigrogriseolus),FX-137为酒红链霉菌(Streptomyces vinaceus),FX-61为链霉属的灰褐类群。

林下参内生球毛壳菌FS-01对人参病原真菌的抑制作用

为探究林下参内生真菌球毛壳菌(Chaetomium globosum)FS-01菌株对人参病原菌的抑菌作用,该研究在实验室条件下,测定了FS-01菌株菌丝、发酵液和孢子悬浮液对人参黑斑病菌(Alternaria panax)、人参菌核病菌(Sclerotinia schinseng)、人参灰霉病菌(Botrytis cinerea)、人参立枯病菌(Rhizoctonia solani)、人参根腐病菌(Fusarium solani)5种人参病原菌的抑制作用。结果表明:内生真菌球毛壳菌FS-01对5种病原菌均有抑制作用,其中,对人参黑斑病菌的抑制作用最高,为30.80%,其次是人参立枯病菌、人参菌核病菌、人参根腐病菌和人参灰霉病菌;发酵液抑菌实验结果表明,在加入内生真菌球毛壳菌FS-01菌株发酵液的PDA培养基上,对人参灰霉病菌的抑制作用最高,为82.09%,其次是人参菌核病菌、人参黑斑病菌、人参立枯病菌和人参根腐病菌;孢子抑菌实验结果表明,在加入内生真菌球毛壳菌FS-01菌株孢子悬浮液的PDA培养基上,对人参黑斑病菌的抑制作用最高,为83.72%,其次是人参灰霉病菌、人参立枯病菌、人参菌核病菌和人参根腐病菌。综上结果认为,内生真菌球毛壳菌FS-01菌株对人参病原菌均有很高的抑菌作用,可作为人参病原菌的生防菌株资源。

《神农本草经》与经方应用之人参篇

人参作为经方的常用药材,《神农本草经》载其“主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪气,明目,开心益智”。补五脏常配伍附子、干姜、炙甘草、桂枝,如炙甘草汤、竹叶石膏汤、麦门冬汤、理中汤、吴茱萸汤、四逆加人参汤、附子汤、侯氏黑散等。安精神、定魂魄、止惊悸常配伍龙骨、牡蛎、茯神,如柴胡加龙骨牡蛎汤、茯苓四逆汤。除邪气常配伍生姜、大枣、炙甘草,如柴胡类方、竹叶汤、厚姜半甘参汤、鳖甲煎丸、木防己汤、桂枝新加汤等。目睛的正常功能依赖于五脏六腑之精气的上荣,故明目亦是人参补五脏的体现。主开心常配伍炙甘草、大枣等,如半夏泻心汤、生姜泻心汤、旋覆代赭汤、桂枝人参汤。除《神农本草经》所载功效外,张仲景运用人参还有新的发展,人参救阴津,气化为津以止渴,如玉壶丸中人参、天花粉治疗渴饮无度,白虎加人参汤治疗上消口渴;人参味甘,补益中土脾脏,微苦可补中祛邪以止呕,如吴茱萸汤治疗肝胃虚寒之呕吐、干姜黄芩黄连人参汤治疗寒热格拒之呕吐。

拮抗人参根部病原菌木霉的筛选及其生物学特性初步研究

目的:筛选抗人参根部病原菌的优良木霉菌株。方法:通过不同培养基培养,对10株木霉的生物学特性进行比较;通过平板对峙试验,对木霉抗人参疫病菌、人参锈腐病菌和人参立枯病菌能力进行分析。结果和结论:绿色木霉Tv04-2和哈茨木霉Th3080不仅在土壤浸液培养基和PDA培养基上生长良好,而且对3种病原菌均表现出较高的抑制率。木霉在不同的光照条件及不同的pH下生长速度存在显著性差异。除Tv04-2对菌虫绝霸不敏感外,木霉菌株对人参病害防治中大多数常用杀菌剂敏感。

西洋参和人参病原真菌菌体对放线菌2种水解酶的诱导

【目的】研究特定拮抗放线菌对西洋参人参土传病害病原真菌的接触抗菌机理。【方法】以5株西洋参、人参土传病害病原真菌菌体为惟一碳源,用液体培养及3,5二硝基水杨酸（DNS）法研究5株供试病原真菌对9株拮抗放线菌几丁质酶和纤维素酶合成的诱导作用;采用搭片法,观察9株拮抗放线菌与5株供试病原真菌菌丝间的相互作用。【结果】①以5株病原真菌菌体为惟一碳源时,可诱导9株拮抗放线菌合成几丁质酶和纤维素酶;9株放线菌的几丁质酶和纤维素酶活性分别为7.17~11.58和6.14~21.20 U,其中西洋参恶疫霉菌体对9株放线菌几丁质酶、纤维素酶合成的诱导作用强于其他病原真菌;②拮抗放线菌Act11、Act13、Act24及D141的菌丝与供试病原真菌菌丝接触时,对西洋参锈腐病菌、人参锈腐病菌菌丝有明显的溶解作用。【结论】以5株供试病原真菌菌体为惟一碳源时,可诱导9株拮抗放线菌合成几丁质酶和纤维素酶;供试拮抗放线菌与西洋参病原菌接触时的抗菌作用,是通过放线菌产生几丁质酶和纤维素酶,破坏细胞壁,使病原真菌菌丝溶解的方式完成的。

人参核盘菌菌核分泌液致病性及生物学特性研究

为明确人参核盘菌菌核分泌液致病性及其生物学特性,利用离体接种法比较人参核盘菌菌丝及其分泌液对人参根组织的侵染特性,运用3,5-二硝基水杨酸法测定人参核盘菌菌丝及其分泌液中细胞壁降解酶种类及活性差异,采用平板培养法分析了不同培养基、碳源、氮源和pH值对人参核盘菌菌丝生长、产核及分泌液形成的影响。结果表明:接种病菌分泌液和菌丝均能导致人参根部产生坏死状病斑,且接种分泌液的病斑出现时间早于接种菌丝,但分泌液持续侵染能力比菌丝弱。分泌液和菌丝中均含有PG酶和Cx酶,分泌液中的PG酶活性高于菌丝,Cx酶活性低于菌丝,PMG酶仅在菌丝中检测到,分泌液和菌丝中均不含β-葡萄糖苷酶。病菌在SDA培养基中生长速度最快,在V8培养基中菌核产生数量最多,在MEA培养基中菌核鲜重和干重最重,在PDA培养基中,供试菌株分泌液产生量最大。以蔗糖与葡萄糖为碳源时,供试菌株菌丝生长速率最快,以葡萄糖酸钠为碳源时,菌核产量最多,以果糖为碳源时,菌核鲜重和干重值最大,以葡萄糖为碳源时,菌核分泌液产生量最大。以蛋白胨、牛肉膏和酵母浸粉为氮源时,供试菌株菌丝生长速率最快,以酵母浸粉为氮源时,菌核产量、鲜重、干重和分泌液产生量最大。供试菌株菌丝生长、菌核数量、鲜重、干重和分泌液形成最适pH值均为5。综上所述,人参核盘菌分泌液中存在PG酶和Cx酶,可导致参根出现坏死斑。不同培养条件和营养物质可促进人参核盘菌的不同发育进程。

三七根腐病病原鉴定及药剂防治研究

从云南省文山州三七产地采集的根腐病标本分离出三种致病镰刀菌,即茄病镰孢(Fusarium solani(Mart)Sacc);尖孢镰孢(Fusarium oxysporumSchl);串珠镰孢中间变种(Fusarium moniliform Var.intermeclium Neish＆Keggett).其中后两种为首次报道.选用11种杀菌剂进行室内带药PDA平板抑菌和田间灌根试验,以甲霜灵锰锌和杀毒矾防效最佳.

不同人参灰霉病的灰葡萄孢菌生物学特性及致病性比较

为了探究人参灰霉病新流行成因,对来源不同寄主和地区的16株灰葡萄孢（Botrytis cinerea）菌株的生物学特性及致病力进行比较。结果表明：供试菌株在PDA和PSA培养基上生长较好,PJAR1、PJAL3、PYCL1和PJLL1最适培养基为PSA,FSYL1、PJAL1、PJAL2、PYLL1、PBLL1、PQAL1、PHLL1和LSYF1最适培养基为PDA,其余菌株最适培养基为查氏培养基;菌丝生长温度范围均为5~25℃,FSYL1、PJLL2、PRHL1、PHLL1和LSYF2最适生长温度为25℃,其余菌株在20℃时生长最快;供试菌株在p H值3~11的范围内均能生长,PYCL1和LSYF2菌丝最适生长p H值为6,PJAR1、PJAL2、PJAL3和PYLL1最适生长p H值为4,其余菌株最适生长p H值为5;菌丝生长最适碳源为葡萄糖和麦芽糖;菌丝生长最适氮源为酵母膏、牛肉膏和蛋白胨;光照对菌丝直径影响不显著。接种供试灰葡萄孢菌株后均能引起人参叶片发病,但来自相同寄主的菌株间致病力也存在差异,按病斑大小可将供试菌株划分为强致病力菌株（PJAR1、PJAR2、PJAL2和LSYF1）、中等致病力菌株（PJLL1、FSYL1、PHLL1、PRHL1、PBLL1、PQAL1、PJLL2）和弱致病力菌株（PJAL3、LSYF2、PJAL1、PYCL1和PYLL1）。

2株人参生防真菌发酵液稳定性的研究

采用含毒介质培养法及菌丝生长速率法,研究了2株人参生防真菌FSR-74和FSR-97发酵液的稳定性.结果表明:2株生防真菌发酵液的热稳定性较弱,其发酵液在低温下(≤40℃)抑菌活性稳定,在中高温下(>40℃)抑菌活性逐渐下降乃至失活;2株生防真菌发酵液的酸碱稳定性较差,在pH<5或pH>9的条件下其抑菌活性逐渐减弱;生防真菌FSR-74发酵液具有较强的紫外稳定性,但生防真菌FSR-97发酵液的紫外稳定性较弱;生防真菌FSR-74和FSR-97发酵液具有较好的低温储藏稳定性,室温下随储藏时间的延长对人参病原菌的抑菌率均显著下降;2株生防真菌发酵液抗胰蛋白酶稳定性较差;生防真菌FSR-74和FSR-97均具有良好的传代稳定性.生防真菌FSR-74和FSR-97的代谢产物有较强的低温储藏稳定性,具有一定开发价值,在不同植物病害防治应用中应在合理的温度、光照及pH范围内使用.

人参主要病原菌生防真菌的筛选及鉴定

【目的】筛选对人参主要病原菌具高效、广谱抑菌作用的生防真菌,丰富人参生防菌菌种资源。【方法】采用稀释平板法,从吉林省2处采样地的人参健株根际土壤中分离真菌;采用平板对峙培养法,通过初筛和复筛,筛选对人参链格孢菌(Alternaria panax)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、腐皮镰孢菌(Fusarium solani)、毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destructans)、恶疫霉菌(Phytophthora cactorum)、人参核盘菌(Sclerotinia schinseng)和灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)具有高效广谱抑菌活性的生防真菌;利用传统形态学和rDNA-ITS分子分析技术对分离到的生防真菌进行鉴定。【结果】从人参健株根际土壤中共分离得到400株真菌,其中有15株生防真菌对人参7种主要病原菌具有广谱抑菌作用,特别是对立枯丝核菌有强烈的抑制作用(抑菌率均大于50%),且FSR-106的抑菌作用最强(抑菌率87.41%,下同);FSR-121对人参链格孢菌的抑菌作用最强(60.00%);FSR-74对腐皮镰孢菌的抑菌率高达67.48%;FSR-46对毁灭柱孢菌和灰葡萄孢菌的抑菌率最大(66.67%和68.97%);FSR-97对恶疫霉菌及人参核盘菌的抑制作用最强(73.33%和66.67%)。通过形态学和rDNA-ITS序列分析鉴定发现,15株生防真菌中有8株木霉属(Trichoderma)、3株青霉属(Penicillium)、1株曲霉属(Aspergillus)、1株附球菌属(Epicoccum)、1株毛壳菌属(Chaetomium)和1株轮层炭壳属(Daldinia),其中FSR-38为黑附球菌(Epicoccum nigrum),FSR-10、FSR-43和FSR-106为深绿木霉(T.atroviride),FSR-46为长枝木霉(T.longibrachiatum),FSR-55为钩状木霉(T.hamatum),FSR-72为桔绿木霉(T.citrinoviride),FSR-74为球毛壳菌(Chaetomium globosum),FSR-97为多孢木霉(Trichoderma polysporum),FSR-91为蔡氏轮层炭壳菌(Daldinia childiae),FSR-25、FSR-67和FSR-121为青霉属(Penicilliumsp.)。【结论】从人参健株根际土壤中可快速有效地筛选获得大量广谱性生防真菌;本研究所得的15株生防真菌对7种人参主要病害防治具有较高的潜在应用价值。

人参9种病害的症状和病原物

报道了人参的 5种新病害 :人参褐斑病 (AcremoniellacucurbitaeSchulz etSacc )、人参黑腐病 (Do ratomycesstemonitis (Pers etFr )Morton&Smith)、人参白粉病 (ErysiphepanacisBaietWang)、人参褐腐病(MoniliacinereaBon)、人参线虫病 (MeloidogynehaplaChitwood)和国内新记录的 3种人参病害 :人参灰霉病(BotrytiscinereaPers )、人参黑干腐病 (Phoma panacicolaNakataetTakimoto)、人参粘菌病 (StemonitisherbaticaPeck )。订正了吉林省人参细菌性软腐病的病原物 ,即为胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种 (Er winiacarotovorasubsp carotovoraDye)、胡萝卜欧文氏菌黑胫亚种 (E carotovorasubsp atrosepticaDye)、石竹假单胞菌 (Pseudomonascaryophyll (Burkholder)Starr&Burkholder)。

人参与病原菌互作代谢产物醇溶性主成分分析

采用营养液培养的方法研究了病原菌侵染对生长初期人参根系分泌物收集物组成的影响,分别从对照及菌核菌、疫霉菌、立枯丝核菌、锈腐菌诱导处理的根系分泌物收集物中检测到27、23、17、16和20种主成分,并用标准化合物对其中的11、6、6、3和9种化合物进行了验证。结果表明:病原菌诱导后人参根系分泌物收集物主成分数量明显减少;收集物中化合物类型也发生了明显变化,新增化合物多为有机酸酯、苯及酚酸类衍生物,而减少的化合物无明显规律。

细辛挥发油对人参4种病菌室内抑菌作用

测定了细辛挥发油对人参4种病原菌室内抑菌作用以及离体接种防治效果。结果表明:细辛挥发油对4种病原菌的菌丝生长和孢子萌发表现出较强的抑制作用,均与浓度呈正相关。在供试浓度为1μL/mL时,细辛挥发油对人参立枯病、人参黑斑病、人参锈腐病防治效果明显,分别为65.86%、63.94%、40.80%。

西洋参种子分离真菌的致病性测定及杀菌剂对种传病原真菌的生物测定

目的 :测定西洋参种子分离真菌的致病性 ,并筛选对西洋参种传病原真菌有效的新型杀菌剂。方法 :幼苗期接种测定对西洋参的致病性 ,平皿菌丝生长抑制法进行杀菌剂的生物测定。结果 :镰刀菌Fusariumsp .5号菌株和链格孢菌Alternariasp .13号菌株对西洋参幼苗能致病。 3种杀菌剂中 ,施保克对 2种致病菌的抑制作用最强 ,多菌灵次之 ,适乐时的抑菌作用相对弱一些。结论 :施保克和适乐时可作为有效的候选药剂用于西洋参种子的药剂处理或种子包衣 ,替代生产上已使用多年的多菌灵 ,用来防治西洋参苗期病害。

木霉菌剂对人参根部病害防治效果评价

目的研究木霉菌剂对人参根部病害的田间防治效果,以进一步推广使用。方法调查两种木霉菌剂的3种使用方法及不同使用浓度对人参生长及发病的影响,评价木霉菌剂推广使用的可能性,筛选木霉菌剂的合理使用方法。结果两种木霉菌剂不仅将人参种苗成活率和人参种子出苗率分别提高30%和16%以上,而且能有效控制人参根部病害的发生。结论两种木霉菌剂适宜大面积推广使用。蘸根法使用时,用Tv04-2制剂稀释5000倍,Th3080制剂稀释10000倍。浸种法使用木霉菌剂时,可用Tv04-2制剂和Th3080制剂均稀释5000倍。

东北地区人参锈腐病菌的分子鉴定

人参锈腐病一直是人参生产中的重要病害之一,严重影响人参产业的持续健康发展。为明确东北人参主产区人参锈腐病的病原菌种类,从辽宁、吉林和黑龙江省人参主产区罹病植株上共分离纯化获得菌株45株,采用rDNA-ITS序列分析方法鉴定了东北人参主产区人参锈腐病致病菌,在PDA培养基上观察病原菌菌落及分生孢子形态特征,通过针刺离体接种法测定不同种间的致病力差异。结果表明:在45个菌株中,28个菌株为毁灭柱孢(Cylindrocarpon destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans相似性达99%,菌落呈浅褐色,质地毡状,分生孢子圆柱型,直立,基部稍窄;3个菌株为毁灭柱孢毁灭变种(Cylindrocarpon destructans var.destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans var.destructans相似性达99%,菌落呈深褐色,质地绒毛状,分生孢子棍棒型,稍弯曲,基部钝圆;14个菌株为强壮土赤壳(Ilyonectria robusta),rDNA-ITS序列与GenBank中的I.robusta相似性达99%,菌落呈棕灰色,质地毛絮状,分生孢子长椭圆形,稍弯曲,两端钝圆。生长11d后的菌落直径为(4.21±0.16)^(7.78±0.25)cm,其中生长速度最快的病原菌为强壮土赤壳(I.robusta),其次为毁灭柱孢(C.destructans),毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)生长速度最慢。致病力测定结果表明,不同种间致病力差异显著,毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)致病力最强,其次为毁灭柱孢(C.destructans),强壮土赤壳(I.robusta)相对较弱。