三七根腐病病原鉴定及药剂防治研究

从云南省文山州三七产地采集的根腐病标本分离出三种致病镰刀菌,即茄病镰孢(Fusarium solani(Mart)Sacc);尖孢镰孢(Fusarium oxysporumSchl);串珠镰孢中间变种(Fusarium moniliform Var.intermeclium Neish＆Keggett).其中后两种为首次报道.选用11种杀菌剂进行室内带药PDA平板抑菌和田间灌根试验,以甲霜灵锰锌和杀毒矾防效最佳.

人参锈腐病拮抗细菌BS015最适发酵条件研究

通过单因子试验和正交试验方法对人参锈腐病拮抗细菌BS015摇床发酵条件和培养基配方进行了研究。结果表明:最适发酵条件为装液量20%,接菌量5%,pH7,温度28～30℃;发酵最适培养基配方为葡萄糖18 g/L、L-谷氨酸钠12 g/L、牛肉浸膏5 g/L、磷酸氢二钾4 g/L、硫酸镁1 mg/L、氯化钠3 g/L、硫酸锰5 mg/L。

柱孢属(Cylindrocarpon)真菌和参类锈腐病的研究历史与现状

柱孢属(Cylindrocarpon)真菌是引致人参和西洋参锈腐病的重要病原菌。根据国内外相关文献和目前生产现状 ,综述了引起参类锈腐病的柱孢属真菌的分布与危害、形态与分类、致病性与寄主范围、病原生物学特性、发病规律及防治等方面的研究历史与现状 。

茉莉酸甲酯诱导人参抗锈腐病的生理机制

人参(Panax ginsengC.A.Meyer)是我国传统名贵药用植物。人参锈腐病(Cylindrocarpon destructans)是人参最为严重的根部病害,也是"老参地"问题的主要原因之一。茉莉酸甲酯(MeJA)是一种重要的抗病诱导剂,目前将其应用于植物诱导抗病性的相关研究已成为热点。文中以2年生人参移栽苗为材料,用200 mg/L的茉莉酸甲酯(MeJA)溶液处理人参,温室人工接种人参锈腐病菌,接种后3,6,9,12,15,20,25,30 d取样,测定人参根内丙二醛(MDA)、脯氨酸、可溶性糖含量和细胞膜电解质外渗率的变化动态。结果表明:经MeJA处理后接种人参锈腐病菌,人参根内MDA含量较未经MeJA处理的参根MDA含量明显降低,细胞膜电解质外渗率也呈降低趋势,脯氨酸与可溶性糖含量升高。这说明以上生理指标在茉莉酸甲酯诱导人参抗人参锈腐病的过程中起重要作用。

东北地区人参锈腐病菌的分子鉴定

人参锈腐病一直是人参生产中的重要病害之一,严重影响人参产业的持续健康发展。为明确东北人参主产区人参锈腐病的病原菌种类,从辽宁、吉林和黑龙江省人参主产区罹病植株上共分离纯化获得菌株45株,采用rDNA-ITS序列分析方法鉴定了东北人参主产区人参锈腐病致病菌,在PDA培养基上观察病原菌菌落及分生孢子形态特征,通过针刺离体接种法测定不同种间的致病力差异。结果表明:在45个菌株中,28个菌株为毁灭柱孢(Cylindrocarpon destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans相似性达99%,菌落呈浅褐色,质地毡状,分生孢子圆柱型,直立,基部稍窄;3个菌株为毁灭柱孢毁灭变种(Cylindrocarpon destructans var.destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans var.destructans相似性达99%,菌落呈深褐色,质地绒毛状,分生孢子棍棒型,稍弯曲,基部钝圆;14个菌株为强壮土赤壳(Ilyonectria robusta),rDNA-ITS序列与GenBank中的I.robusta相似性达99%,菌落呈棕灰色,质地毛絮状,分生孢子长椭圆形,稍弯曲,两端钝圆。生长11d后的菌落直径为(4.21±0.16)^(7.78±0.25)cm,其中生长速度最快的病原菌为强壮土赤壳(I.robusta),其次为毁灭柱孢(C.destructans),毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)生长速度最慢。致病力测定结果表明,不同种间致病力差异显著,毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)致病力最强,其次为毁灭柱孢(C.destructans),强壮土赤壳(I.robusta)相对较弱。

外源水杨酸诱导人参抗锈腐病的生理机制

人参(Panax ginseng C.A.Meyer)锈腐病是由人参锈腐病菌[Cylindrocarpon destructans(Zinns.)Scholten]引起的根部病害之一,在人参生产中造成严重的产量损失。水杨酸(SA)是一种重要的化学诱导物质,目前将其应用于植物诱导抗病性的相关研究已成为热点。在温室可控条件下进行,用浓度为200mg.L-1的SA溶液处理2年生人参移栽苗,然后接种人参锈腐菌,接种后3,6,9,12,15,20,25,30d取样。通过测定参根内丙二醛(MDA)、脯氨酸、可溶性糖含量和细胞膜电解质外渗率,探索其诱导抗性的生理基础。结果表明:经SA处理后,接种人参锈腐菌的参根MDA含量在12d时较接菌未处理的下降了35.5%;脯氨酸含量在15d时达到峰值142.31μg.g-1FW,是清水对照的1.85倍;可溶性糖含量在12d时达到峰值4.91mg.g-1FW,是清水对照的1.6倍;细胞膜电解质外渗率呈明显下降趋势。这说明外源SA能有效降低参根内MDA含量和细胞膜电解质外渗率,提高脯氨酸和可溶性糖的含量,增强人参对锈腐病的系统抗性。

人参锈腐病拮抗细菌HN01发酵条件优化

通过单因素试验和正交试验,对人参锈腐病拮抗细菌HN01进行摇床发酵条件和培养基配方研究。结果表明:该菌最适发酵条件为温度30℃,初始pH值7.0,250mL三角瓶装液50mL,接菌量10%,摇床转速150r.min-1,发酵时间36h。最佳产菌培养基组分为葡萄糖15.0g.L-1,牛肉膏8g.L-1,NaCl 5g.L-1,(NH4)2SO41mg.L-1,K2HPO44g.L-1。抑菌培养基组分为葡萄糖10g.L-1,牛肉膏8g.L-1,NaCl3g.L-1,(NH4)2SO4 2mg.L-1,K2HPO4 4g.

吡虫啉、咯菌腈和辛硫磷对西洋参幼苗的协同保护

目的:探讨防治西洋参病虫害和保护幼苗的有效方法。方法:利用西洋参苗期病虫害疫土盆栽来自留坝县参农的西洋参催芽种,并以不同方式和剂量施用4种农药(吡虫啉可湿性粉剂、咯菌腈悬浮种衣剂、毒死蜱颗粒剂和毒·辛颗粒剂),检测其防治苗期病虫害及其保苗效果。结果:苗期病虫害以球囊线蚓(Enchytraeus bulbosus)、罗宾根螨(Rhizoglyphus robini)和2种根腐病菌(Cylindrocarpon destructans,Phytophthora cactorum)为主,既可土传也可种传。以吡虫啉可湿性粉剂加咯菌腈种衣剂复合液拌种、再与毒·辛颗粒剂拌土相结合的处理,具有显著的防治和保苗效果(P<0.05);上述3种农药单施的效果居中,而毒死蜱颗粒剂的单施几乎无效。结论:上述种子处理与土壤处理相结合,能有效降低西洋参种传与土传病虫害,是防治西洋参苗期病虫害并保护幼苗的优选措施;建议示范、推广。

人参根疫病研究初报

研究表明:人参疫病菌主要侵染人参根,引起根疫病,叶片不显症状。室内抑菌试验结果表明,代森锰锌和瑞毒霉在100ppm有效浓度下,可完全抑制疫病菌的菌丝生长。

抗全蚀病、根腐病的转PgPGIP1基因小麦的获得与鉴定

全蚀病和根腐病是小麦(Triticum aestivum)重要的土传真菌病害。PgPGIP1是人参(Panax ginseng)的一种多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白,可以抑制部分病原真菌分泌的多聚半乳糖醛酸酶的活性。本研究人工合成了PgPGIP1基因,并构建PgPGIP1基因的单子叶植物表达载体pA25-PgPGIP1,通过基因枪介导法将其转入小麦品种扬麦18中。对转PgPGIP1基因的T0至T4代植株进行PCR、RT-PCR和Q-RT-PCR分析,并对其全蚀病和根腐病抗性进行鉴定。结果表明,PgPGIP1基因能够在4个转基因小麦株系中遗传、转录与表达。与未转基因的小麦扬麦18相比,4个转基因小麦株系对全蚀病与根腐病的抗性明显提高,说明PgPGIP1表达增强了转基因小麦对全蚀病与根腐病的抗性。

人参喷施ABT新型生根粉的效应试验

新型植物生长调节剂ＡＢＴ６、７、８号能直接溶解于水，为筛选人参叶面喷施的最佳型号及使用浓度进行了试验。结果表明，以ＡＢＴ６号１５ｍｇ／Ｌ处理的效果最佳，参根增产３１％，人参优质率明显提高，对人参根腐病的相对防效可达６６％。

铁胁迫下感染锈腐菌的人参土壤真菌群落研究

以铁胁迫及锈腐菌感染的人参根际土壤为研究对象,采用Illumina高通量测序法揭示铁胁迫条件下人参锈腐病感染的土壤真菌群落结构多样性。结果表明,同时进行铁及锈腐胁迫对土壤中真菌菌群影响最为明显,Mortierellomycetes纲、Sordariomycetes纲为主要类群;只进行铁胁迫或者锈腐菌感染条件下,真菌菌群距离较近且相互独立,锈腐感染组优势类菌群为Sordariomycetes纲,铁胁迫组根际土壤优势类菌群为Orbiliomycetes纲;铁的施加没有提高锈腐病的感染数量,而是通过改变真菌群落提高了其他病原真菌的发生。本研究为解决铁及锈腐病导致的人参连作障碍提供数据支撑。

防治人参根腐病的生物制剂筛选

通过菌丝生长速率法测定了6种生物制剂对人参根腐病菌的抑制效果。结果显示,抑制作用由强到弱依次为枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、EM菌肥、解磷菌、嗜热性侧孢霉、哈茨木霉菌。其中枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌对人参根腐病菌均具有明显的抑制作用,以枯草芽孢杆菌抑制作用最强,其EC_(50)为0.17mg/L;苏云金杆菌次之,EC_(50)为707 mg/L;EM菌肥、解磷菌、嗜热性侧孢霉、哈茨木霉菌的EC_(50)分别为1 148、3 630、7 943、91 201 mg/L,抑菌效果较差。

辽宁新宾人参根腐病病原真菌的分离与鉴定

分离和鉴定辽宁人参主产区根腐病致病真菌,为人参抗病育种、开展根腐病绿色防治提供理论支撑。本研究采用组织分离法,对辽宁新宾人参根腐病重发生地块2~5年生病株开展植物病原真菌的分离和纯化。采用琼脂培养法,对分离菌株进行致病性测定。结合形态学观察和rDNA-ITS、EF-1α序列分析,对菌株开展形态学和分子生物学鉴定。最终,分离得到2株菌落形态不同的致病真菌,编号为JS64-1和JS64-3,经鉴定,分别为腐皮镰刀菌(Fusarium solani)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。本研究采用琼脂培养法,开展人参根腐病致病性测定,操作简便,省时高效,结果准确,可为其他植物根部病害研究提供参考。

人参根腐病离体抗性筛选方法初探

探讨了人参(Panax ginseng C. A. Meyer)根腐病离体抗性筛选方法的可行性,初步建立了一种快速高效的人参根腐病抗性筛选的方法。采用离体叶片、根块2种方法进行接种,结果表明,2种方法接种的发病情况基本一致,且用离体叶片比用根块筛选操作更简单,观察更方便;采用菌块、菌液2种接种方法分别对人参叶片的正、反面进行接种,结果表明,用菌块正面接种发病效果更好。进一步通过人参须回接试验初步证明了离体叶片抗性筛选方法的可行性。通过对不同品系人参进行接菌,发现FS抗病能力最高,FX2抗病能力最低。

解淀粉芽孢杆菌FS6在人参体内的定殖特性及对人参诱导抗病性

【目的】明确解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6在人参体内的定殖规律及其在病原菌胁迫下对人参防御酶活性的影响,为揭示FS6诱导人参产生抗病性的诱导抗病机制奠定基础,进而为人参根部病害的绿色防控提供依据。【方法】采用抗生素标记法获得FS6菌株抗利福平的突变体菌株,采用灌根和叶面喷雾两种方法接种,研究FS6在人参植株体内及人参根际土壤中的定殖规律;采用灌根法,利用盆栽试验研究不同处理条件下FS6对人参抗病相关防御酶活性的影响。【结果】从含300μg/mL利福平抗性平板上得到标记菌株,该标记菌株能在NA培养基上稳定生长,抗性丢失率为0,且标记菌株与野生菌株的拮抗能力无明显差异。定殖试验结果表明,灌根和叶面喷雾两种接种方式下,FS6Rif菌株均能在人参植株各个部位及根际土壤中定殖,并能在人参体内转移。其中,灌根后FS6Rif在土壤中的定殖量在处理后第1天达到最大值,为4.8×103 CFU/g;叶面喷雾后FS6Rif在叶片中的定殖量在处理后第1天达到最大值,为3.2×103 CFU/g。FS6发酵液处理后再接种人参根腐病菌,与其他3个处理相比,人参防御酶活性显著提高,CAT、POD和PPO分别在FS6发酵液灌根处理后第12,15和18天达到峰值。【结论】FS6菌株能够在人参植株体内稳定定殖并传导,且能在一定程度上诱导人参产生抗病性。

微生物菌剂对重茬地人参根腐病防治效果的研究

根腐病是重茬地人参种植中需要解决的主要问题之一.本实验采用不同微生物菌剂对重茬地人参根腐病防治效果进行研究,结果表明,不同微生物菌剂的不同施肥方法对人参根腐病病情指数、人参外观品质及耐储性存在不同程度的影响,其中施用地养力微生物菌剂(粉剂)350kg/亩和高保康3号微生物菌剂(液体)60kg/亩对重茬地人参根腐病的综合防治效果最佳,防治效果达到80%以上,鲜参的外观品质和耐储性都有明显的提高.

钙对两种病原菌引起西洋参根腐病的抑制作用

由多种病原菌引起的西洋参根腐病是西洋参最主要的地下病害,严重降低西洋参的产量和质量。为了减少农药使用,探究营养元素钙对西洋参根腐病的防治作用及可能的生理生态机制,本研究设置田间盆栽试验,以引起西洋参根腐病的2种病原菌Fusarium solani和Ilyonectria mors-panacis为研究对象,测定不同添加量的氧化钙(0、0.5、1.5和4.5 g·kg^(-1))对西洋参根生长发育的影响和对病害的防治效果,以及对根内营养元素、土壤理化性质、土壤微生物群落的影响。结果表明:添加钙对西洋参根腐病的作用出现“低促高抑”的现象。与对照相比,土壤中添加氧化钙达到4.5 g·kg^(-1)时,接种I.mors-panacis、F.solani引起的根腐病病情指数分别降低87.69%(P<0.05)、66.67%(P>0.05),此时根内钙含量分别提高101.28%和61.50%(P<0.05),根内氮磷含量与接种F.solani组病情指数呈正相关。接种2种病原菌的土壤微生物群落结构及组成存在明显差异。钙主要影响土壤真菌多样性及群落组成,高钙(4.5 g·kg^(-1))情况下亚隔孢壳属(Didymella)、茎点霉属(Pho-ma)的相对丰度均降低;而钙对细菌群落影响较小。综上,高剂量钙可以降低西洋参根腐病65%以上,其潜在的机制与增加根内钙含量、降低氮、磷含量以及减少土壤中潜在病原菌属的相对丰度有关。研究结果将为合理施用钙肥减轻西洋参根腐病提供理论依据。

人参根腐病与根际土壤主要化学性质和酶活性的关联性分析

为了明确不同栽培模式(伐林迹地、农田地和二茬地种参)及不同栽培制式(移栽2-2年生和直播4年生)下根腐病的发生与人参根际土壤化学性质和酶活性的关系。对采集的健康及发生根腐病的人参根际土壤,采用农化分析方法测定主要土壤化学性质和土壤酶活,结合独立样本T检验及相关性分析比较研究了60份人参根际土壤的化学性质和酶活性。结果表明:同一栽培模式和制式下,健康和发病人参根际土壤化学性质和酶活性差异显著(P<0.05),总体表现为有机质、速效钾、碱解氮、pH、过氧化氢酶、蔗糖酶在健康人参根际土壤中的含量显著高于发病人参根际土壤,速效磷、碱性磷酸酶和脲酶没有明显变化规律;相关分析结果表明,根腐病的病情指数与土壤有机质、速效钾、碱解氮、pH、蔗糖酶、过氧化氢酶活性极显著负相关,与速效磷含量极显著正相关,与脲酶和碱性磷酸酶活性不存在显著的相关性。综上,根腐病的发生与人参根际土壤化学性质和酶活性土壤有机质、速效钾、碱解氮、pH、蔗糖酶、过氧化氢酶活性有关,研究结果为人参土壤改良、人参用地选择及人参根部病害的防控提供了理论参考,也为进一步建立宜参土壤诊断模型奠定了基础。

人参锈腐病新型药剂筛选试验

[目的]锈腐病是人参主要病害之一,对人参产量和品质造成极大影响,目前仍没有很好的解决办法。对柱盘孢菌侵染引起的人参锈腐病进行农药防治研究,筛选出防治效果较好的新型农药。[方法]对农业生产中常用的13种新型低残留农药通过抑菌试验、盆栽试验、田间药剂防治试验进行筛选。[结果]筛选出抑菌率和防效都在40%左右的6种药剂:25%戊唑醇WP、25%丙环唑EC、40%菌核净WP、50%烯酰吗啉WP、30%氟菌唑WP和80%代森锰锌WP。[结论]试验对提高人参产量、满足市场需求和提升我国人参产业整体水平具有积极意义。