土壤改良对平地栽参人参茎叶总皂苷含量的影响

以人参(Panax ginseng C.A.Mey)茎叶总皂苷为评价指标,研究平地栽参不同土壤改良的最优方案。试验以二次回归正交旋转设计为基本数学模型,研究玉米秸秆、猪粪、鹿粪、拮抗菌、菌糠5种基质的不同组合对人参茎叶总皂苷含量的影响。模型解析发现,在相同的栽培条件下,5种基质对人参茎叶总皂苷含量的贡献从大到小为猪粪、鹿粪、玉米秸秆、菌糠、拮抗菌。计算机模拟寻优表明,玉米秸秆施用量6.64kg/m2,猪粪施用量3.24 kg/m2,鹿粪施用量3.48 kg/m2,拮抗菌施用量6.87 g/m2,菌糠施用量7.02 kg/m2条件下,人参茎叶总皂苷含量预测值为17.81%。综上这些栽培因素的组合可以作为平地栽培人参的推荐方案。

西洋参茎叶皂苷化学研究——Pseudoginsenoside—RT_5的分离与结构鉴定

本文为国内外首次报道从我国引种的西洋参茎叶中,经提取、大孔树脂吸附,除杂质后得纯度较高的总皂苷。将此总皂苷又以硅胶柱层析,经洗脱、分离,最后分得纯单一化合物。按常规测定物理常数、水解反应;又通过一维~1H、^(13)C 核磁共振谱,二维^(13)C—~1H 远程异核化学位移、^(13)C—~1H 异核化学位移、~1H—~1H 同核化学位移等相关谱,以及质谱的测定,最后确定以奥科提罗醇(0cotillol)为配基的拟人参皂苷—RT_5(pseudoginsenoside—RT_5)的分子结构。

赤雹根总皂苷对AA大鼠脾脏TNF-α、IL-1β、IL-6表达的影响

目的:观察赤雹根总皂苷(TSTDR)对佐剂性关节炎(AA)大鼠脾脏指数和脾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法:雄性SD大鼠60只随机分为正常对照组,模型组,TSTDR低(40mg/kg/d)、中(80mg/kg/d)、高(160mg/kg/d)剂量组和雷公藤多苷组(12mg/kg/d)。大鼠右后足跖部皮下注射弗氏完全佐剂0.1ml建立AA大鼠模型,成模后各用药组大鼠分别灌胃给予相应药物21d。计算大鼠的脾脏指数,免疫组织化学染色法检测各组大鼠脾脏TNF-α、IL-1β、IL-6的表达。结果:TSTDR中、高剂量组大鼠的脾脏指数显著低于模型组(P<0.01,P<0.05)。TSTDR各剂量组大鼠脾脏TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平明显低于模型组(P<0.01,P<0.05);并且,TSTDR中剂量组、TSTDR高剂量组大鼠脾脏TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平明显低于TSTDR低剂量组(P<0.01,P<0.05)。结论:抑制脾脏TNF-α、IL-1β、IL-6的表达可能是TSTDR治疗AA的机制之一。

人参总皂苷亲和"垂钓"脑内蛋白质靶点的研究

目的:预测人参总皂苷在脑内的蛋白质作用靶点。方法:采用直接亲和法亲和"垂钓"出脑内可能与人参总皂苷相互作用的蛋白质;然后采用SDS-PAGE凝胶电泳对"垂钓"出的蛋白质进行分离、染色、挖取蛋白质斑点胶块,并采用MALDI-TOF/TOF串联二级质谱对未知蛋白质进行鉴定;采用生物膜层干涉技术(BLI)测定人参皂苷和疑似蛋白14-3-3之间的相互作用,来进一步确认疑似蛋白14-3-3是否与人参皂苷有直接的分子间相互作用,以及哪种人参皂苷单体与14-3-3蛋白的亲和力最强。结果:亲和"垂钓"和质谱共鉴定获得5个预测蛋白,分别为:14-3-3蛋白、肌动蛋白、肌酸激酶B型、ATP合成酶、未知蛋白质;动力学分析显示14-3-3蛋白与原人参二醇、原人参三醇存在分子间相互作用,并且KD值分别为7.8×10-4和5.62×10-4。结论:14-3-3蛋白是人参总皂苷脑内的作用靶点之一,人参皂苷体内代谢产物原人参二醇、原人参三醇可能是14-3-3蛋白的激活剂。

威灵仙总皂苷对佐剂性关节炎(AA)大鼠IL-6、IL-10及滑膜中p-JAK2、p-STAT3表达的影响

目的:研究威灵仙总皂苷(TSC)对佐剂性关节炎(AA)大鼠细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)及滑膜组织中磷酸化Janus激酶2(phospho-JAK2,p-JAK2)、磷酸化信号转导子和转录激活子3(phospho-STAT3,p-STAT3)蛋白表达的影响。方法:雄性大鼠60只随机分为6组,除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导AA大鼠模型。致炎第12天后灌胃给予相应药物,每天1次,连续16天,观察药物对AA大鼠体重影响;对AA大鼠进行关节指数评分;HE染色固定部位踝关节进行病理学观察;酶联免疫吸附实验(ELISA)法测血清中IL-6、IL-10的含量;免疫组化测滑膜组织中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。结果:与模型组相比,威灵仙总皂苷(50、100、200mg/kg)组均可抑制AA大鼠足肿胀,减轻踝关节病理损伤,其中威灵仙总皂苷(100、200mg/kg)组治疗结果具有统计学意义;威灵仙总皂苷(100、200mg/kg)可有效抑制血清中IL-6及提高IL-10的含量;威灵仙总皂苷(50、100、200mg/kg)给药干预后均可抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白的阳性表达。结论:威灵仙总皂苷对AA大鼠具有较好的治疗效果,其机制可能与抑制IL-6和提高IL-10的含量,抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白的表达,从而调控JAK2/STAT3通路有关。

穿山龙总皂苷对痛风性关节炎大鼠关节炎滑膜IL-1β及其信号转导通路的影响

目的:考察穿山龙总皂苷(total saponins from rhizoma Dioscoreae nipponicae,RDN)对痛风性关节炎大鼠关节炎滑膜IL-1β及其介导的信号转导通路的影响。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为四组,分别为正常组、模型组、穿山龙总皂苷低(40mg/kg)、高剂量组(160mg/kg),连续灌胃穿山龙总皂苷5天。第3d灌胃穿山龙总皂苷1h后,膝关节上方髌上韧带进针,注射0.2ml浓度为25mg/ml的微晶尿酸钠结晶混悬液到关节腔,造成实验性痛风性关节炎模型。采用HE和伊红染色观察关节滑膜组织病理学变化,免疫组化法检测穿山龙总皂苷对大鼠膝关节滑膜组织中IL-1β、SDF-1、CXCR4、PI3K、PKC和NF-κB表达的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠膝关节滑膜组织中IL-1β、SDF-1、CXCR4、PI3K、PKC和NF-κB表达水平显著升高(0.087±0.021,0.064±0.017,0.146±0.042,0.139±0.057,0.088±0.021,0.079±0.018),穿山龙总皂苷低剂量组能显著降低CXCR4表达水平(0.081±0.006)。穿山龙总皂苷高剂量组能显著降低IL-1β、CXCR4、PI3K、PKC和NF-κB表达水平(0.035±0.007,0.104±0.011,0.077±0.017,0.039±0.011,0.030±0.009)。结论:穿山龙总皂苷可抑制IL-1β及其介导的信号转导通路;穿山龙总皂苷具有治疗痛风性关节炎(Gouty Arthritis,GA)的潜在价值。

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠血脂和脂肪因子的影响

目的:观察苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠血脂和血浆脂肪因子含量的影响。方法:取大鼠60只,随机取8只作为正常对照组,其余的大鼠用高脂高糖饮食喂养8周后用小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)尾静脉注射建2型糖尿病大鼠模型,以空腹血糖≥11.1 mmol/L为糖尿病大鼠造模成功的指标。将合格的大鼠40只分为模型组、非诺贝特组和苦瓜总皂苷100、200、400mg剂量组,成模后正常对照组不给予药物灌胃,苦瓜总皂苷组予以苦瓜总皂苷100、200、400mg/kg灌胃8周,非诺贝特组予以非诺贝特100 mg/kg灌胃8周,分别测定大鼠体重、血脂和血浆脂肪因子指标。结果:200、400mg苦瓜总皂苷组使2型糖尿病大鼠的体重减轻,血浆TG、TC、LDL-C含量减低,HDL-C含量增高,血浆瘦素、抵抗素降低;各剂量苦瓜总皂苷均使TNF-α、IL-6含量降低;400mg苦瓜总皂苷组使脂联素含量增高。结论:苦瓜总皂苷可以降体重、降血脂、调节血浆脂肪因子含量,其作用随苦瓜总皂苷剂量的增加而增强。

珠子参总皂苷对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的:研究珠子参总皂苷对对四氯化碳所致大鼠慢性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用40%的CCl4橄榄油剂灌胃制备慢性肝损伤大鼠模型。分别采用不同浓度的珠子参总皂苷进行干预,9周后检测大鼠肝、脾脏器指数,血清ALT、AST浓度和TP、ALP、ALB含量,肝组织中MDA、SOD、T-AOC、GSH-Px、Hyp的含量。结果:珠子参总皂苷(60、120、240 mg/kg)灌胃给药能显著降低CCl4致慢性肝损伤大鼠肝脏、脾脏指数;降低血清中异常升高的ALT、AST;提高血清中降低的TP含量,降低血清中升高的ALP含量,降低肝组织中MDA水平,同时升高其低下的T-AOC、GSH-Px水平;降低Hyp含量。结论:珠子参总皂苷对大鼠实验性肝损伤具有一定程度的保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化反应、减少自由基生成、提高组织抗氧化能力、促进蛋白质合成有关。

赤雹根总皂苷对佐剂关节炎大鼠血清及足TNF-α,IL-1β,IL-6水平的影响

目的:观察赤雹根总皂苷对佐剂型关节炎大鼠血清及足跖中肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6(TNF-α,IL-1β,IL-6)表达水平的影响,探讨赤雹根总皂苷治疗类风湿性关节炎的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、赤雹根总皂苷40、80、160 mg/kg剂量组和雷公藤多苷12mg/kg阳性对照组。除正常对照组外,其余各组大鼠均于右后足跖部皮下注射完全弗氏佐剂0.1ml。造模18天后,各给药组均灌胃给予相应药物,连续21天。计算大鼠关节炎指数,酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,免疫组织化学法测定足跖以上三种因子蛋白表达水平。结果:赤雹根总皂苷剂量40、80、160mg/kg组大鼠关节炎指数分别为6.00±0.40、5.10±0.18、4.20±0.32均显著低于模型对照组7.20±0.32;血清中TNF-α水平分别为0.56±0.05、0.32±0.04、0.18±0.04 ng/ml均显著低于模型对照组0.98±0.08 ng/ml,IL-1β水平分别为0.29±0.02、0.17±0.01、0.13±0.01 ng/ml均显著低于模型对照组0.49±0.01ng/ml,IL-6水平分别为1.13±0.03、0.95±0.01、0.79±0.06 ng/ml均显著低于模型对照组1.58±0.04ng/ml;足跖中TNF-α蛋白表达水平分别为1.09±0.27、0.61±0.13、0.57±0.11 IOD均显著低于模型对照组2.17±0.34,IL-1β蛋白表达水平分别为1.13±0.32、0.65±0.22、0.63±0.24 IOD均显著低于模型对照组2.23±0.46IOD,IL-6蛋白表达水平分别为1.31±0.29、0.59±0.21、0.45±0.17 IOD均显著低于模型对照组2.49±0.38 IOD。结论:抑制TNF-α、IL-1β、IL-6水平及表达是赤雹根总皂苷治疗佐剂型关节炎的机制之一。

赤雹根总皂苷对CIA模型大鼠的治疗作用及对CD4^+、CD8^+ T细胞表达的影响

目的:观察赤雹根总皂苷对II型胶原性关节炎(CIA)模型大鼠的治疗作用及对CD4^+、CD8^+ T细胞表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠80只,随机取10只作为正常对照组,其余大鼠尾根部多点皮内注射牛II型胶原和完全弗氏佐剂的乳化剂,7天后加强免疫一次,建立CIA大鼠模型,以关节炎指数(AI)≧6为建模成功。将模型大鼠按AI值水平随机分为赤雹根总皂苷80、40、20mg/kg组、雷公藤多苷12mg/kg组和模型对照组,每组11只。各给药组连续ig给药35天,模型对照组合正常对照组ig等体积的蒸馏水。分别于给药前及给药后7、14、21、28、35d测定大鼠四肢踝关节肿胀度和计算关节炎指数。末次给药后,取血清、脾脏,计算脾脏指数(SI);ELISA及Western Blot法分别检测CIA大鼠血清及脾脏中T淋巴细胞亚群CD4^+、CD8^+ T细胞的蛋白表达水平。结果:给药第35d,赤雹根总皂苷80、40、20mg/kg组踝关节肿胀度、AI值、SI值均显著低于模型对照组;血清及脾脏中CD4^+T细胞的蛋白表达水平、CD4^+/CD8^+的比值均显著低于模型对照组;CD8^+ T细胞的蛋白表达水平均显著高于模型对照组。结论:赤雹根总皂苷对RA有较好的治疗作用,调节CD4^+、CD8^+ T淋巴细胞的水平是其治疗RA的主要机制之一。

竹节三七总皂苷对胶原诱导型关节炎大鼠抗氧化能力、细胞因子水平的影响

目的:研究竹节三七总皂苷(total saponins of Panax japonicus,TSPJ)对胶原诱导型关节炎大鼠抗炎、抗氧化功能的影响。方法:注射Ⅱ型胶原蛋白与完全费氏佐剂的乳化剂建立大鼠关节炎模型。观察致炎前后大鼠足容积的改变检测竹节三七总皂苷对关节炎模型大鼠的作用效果。检测关节炎大鼠抗氧化指标及血清细胞因子水平,观察竹节三七总皂苷对模型大鼠抗炎作用机理。结果:与模型组比较,25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg竹节三七总皂苷能减轻关节炎大鼠足爪肿胀度,100mg/kg组尤为明显;100mg/kg竹节三七总皂苷增加模型大鼠血中谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性,抑制丙二醛水平;100mg/kg竹节三七总皂苷能降低模型大鼠血中白细胞介素-1、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α水平,50mg/kg竹节三七总皂苷低模型大鼠血中白细胞介素-8水平效果明显。结论:竹节三七总皂苷具有抗炎作用,能增强关节炎大鼠的抗氧化能力,降低关节炎大鼠白细胞介素-1、白细胞介素-8、肿瘤坏死因子-α水平,可能是其治疗类风湿性关节炎的重要机制之一。

三七总皂苷对PDGF-BB所致动脉平滑肌细胞增殖周期的影响

目的:研究三七总皂苷对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞(ASMC)增殖周期的影响及可能作用的机制。方法:将SD大鼠ASMC进行体外培养,采用MTS法检测三七总皂苷对PDGF-BB诱导平滑肌细胞增殖的影响;流式细胞仪分析细胞增殖周期;实时逆转录聚合酶链反应技术检测ASMC中c-fos、cyclin D1和cyclin E1 mRNA表达。结果:PDGF-BB0.02 mg/L能明显升高ASMC光密度值,增加S期细胞比例而降低G0/G1期细胞比例,并上调c-fos、cyclin D1和cyclin E1 mRNA表达。PDGF-BB+三七总皂苷30 mg/L、60 mg/L、180 mg/L组均明显降低PDGF-BB升高的细胞光密度、S期细胞比例而升高G0/G1期细胞比例;明显下调PDGF-BB所致的c-fos、cyclin D1和cyclin E1 mRNA高表达。结论:三七总皂苷可能通过阻止动脉平滑肌细胞由G0/G1期进入S期而抑制PDGF-BB所致的增殖,其作用机制可能与降低c-fos、cyclin D1和cyclin E1 mRNA高表达有关。

南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠胰腺功能保护作用的研究

目的:观察南苜蓿总皂苷对2型糖尿病大鼠胰腺的保护作用。方法:建立2型糖尿病大鼠模型,除对照组外,将成模大鼠分为模型组、二甲双胍组(0.2 g/kg)、南苜蓿总皂苷组(2.8 g/kg、1.4 g/kg),分别治疗4周。末次给药后测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、肝糖原,取全血测定血液流变性。取胰腺组织匀浆测定SOD、MDA、GSH-Px、IL-1β、TNF-α。提取胰腺组织总蛋白,采用蛋白免疫印迹法检测胰岛内质网应激蛋白(CHOP、JNK)和VEGF蛋白的表达。结果:与模型组比较,南苜蓿总皂苷2.8 g/kg、1.4 g/kg能降低大鼠的FBG、FINS、Hb A1c水平;降低糖尿病大鼠胰腺组织MDA、IL-1β、TNF-α的水平,升高SOD、GSH-Px和肝糖原含量。2.8 g/kg组能改善糖尿病大鼠的血液流变性,减少CHOP、JNK蛋白的表达;增加VEGF蛋白的表达。结论:南苜蓿总皂苷保护T2DM大鼠胰腺的保护作用,其机制可能与抑制胰腺的氧化应激和炎症反应,减轻胰岛细胞凋亡发生,改善微循环有关。

威灵仙总皂苷对佐剂性关节炎大鼠踝关节病理的影响

目的:观察威灵仙总皂苷对佐剂性关节炎(AA)大鼠踝关节病理改变的影响。方法:大鼠足趾皮内注射弗氏完全佐剂致佐剂性关节炎,威灵仙总皂苷按25、50、100 mg/kg剂量灌胃给药15天,观察大鼠踝关节滑膜、关节腔、软骨、周围软组织等组织病理情况。结果:威灵仙总皂苷(50、100 mg/kg)明显减轻AA大鼠踝关节病理损伤。结论:威灵仙总皂苷可改善AA大鼠的踝关节组织病理改变。

苦瓜总皂苷对大鼠前列腺增生的保护作用

目的:探讨苦瓜总皂苷对前列腺增生大鼠的保护作用。方法:通过去势操作和注射丙酸睾酮诱导大鼠前列腺增生模型,观察苦瓜总皂苷(100或200 mg/kg/d)灌胃给药对大鼠前列腺组织形态学变化、抗氧化酶活力和炎性细胞因子水平、前列腺生长因子以及microRNA(miR)27a/b表达程度的影响。结果:苦瓜总皂苷100及200 mg/kg给药可显著改善模型动物前列腺增生,明显抑制了组织氧化应激和炎症反应的水平,及前列腺生长因子和miR27a/b高表达。结论:苦瓜总皂苷对前列腺增生具有潜在的治疗作用。

赤雹根总皂苷对类风湿性关节大鼠NF-κB p65和IL-6表达的影响

目的:研究赤雹根总皂苷(TSTR)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和炎性细胞因子白细胞介素6(IL-6)活性的影响,探讨赤雹根总皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机取10只作为正常对照组,其余大鼠用完全弗氏佐剂诱导佐剂性关节炎。将造模成功的大鼠随机分为赤雹根总皂苷40,80,160 mg/kg,雷公藤多苷12 mg/kg,模型对照组,每组10只。各给药组均灌胃给予相应药物,连续21天。计算大鼠足肿胀度和关节炎指数;ELISA法检测各组大鼠血清IL-6的含量;免疫组化法测定大鼠足跖组织NF-κB p65蛋白及足跖组织和脾脏IL-6蛋白表达水平;Western blot法检测大鼠足跖组织中NF-κB p65蛋白表达水平;RT-PCR法测定大鼠足跖部NF-κB p65mRNA、IL-6 mRNA的表达水平。结果:赤雹根总皂苷各剂量组大鼠组肿胀度和关节炎指数均显著低于模型对照组;血清中IL-6含量和IL-6蛋白表达水平及IL-6 mRNA的表达水平均低于模型对照组;足跖组织中NF-κB p65蛋白表达水平和IL-6 mRNA的表达水平均低于模型对照组。结论:抑制NF-κB和IL-6的表达是赤雹根总皂苷治疗类风湿性关节炎的作用机制之一。

瘤果黑种草子总皂苷的长期毒性研究

目的:观察瘤果黑种草子总皂苷连续灌胃给药90天对大鼠产生的毒性反应。方法:给大鼠灌胃不同浓度(分别为35、157和700mg/kg)瘤果黑种草子总皂苷90天,分别于给药45天、90天及停药后17天处死10只大鼠进行血液学、血液生化学及组织病理学检查。结果:瘤果黑种草子总皂苷不同剂量组大鼠在给药及停药恢复期间外观体征、行为活动、体质量、摄食量、血液学、血液生化学及组织病理学检查均未见异常,与正常对照组比较差异均无显著性。结论:瘤果黑种草子总皂苷长期用药对大鼠无明显毒性。