麝香保心丸促进血管新生作用的活性成分筛选

目的对麝香保心丸中单体入血促进血管新生活性成分进行筛选,以确定其中发挥促进血管新生作用的药效物质。方法采用实时细胞分析仪（xCELLigence系统）检测麝香保心丸及其单体入血成分对内皮细胞增殖、迁移活性的影响,并建立细胞体外成管模型和大鼠主动脉环模型评价麝香保心丸及其入血单体成分的体外血管新生活性。结果细胞增殖、迁移及体外成管实验结果显示,不同浓度的麝香保心丸（10^-4-10^-2μg/ml）、人参皂苷Rg3（1-10μmol/L）和人参皂苷Rh2（1-10μmol/L）能够明显促进人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖、迁移及管腔结构形成（P〈0.05）。此外,与对照组相比,高浓度麝香保心丸（10-2μg/ml）、Rg3（10μmol/L）和Rh2（10μmol/L）具有诱导主动脉环内皮细胞出芽的活性（P〈0.05）。结论麝香保心丸及人参皂苷Rg3、Rh2均在体外具有促进血管新生的活性。

人参皂苷Rg3的脂肪酸衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性

以人参皂苷Rg3和棕榈酸酰氯为反应原料,二氯甲烷为溶剂,K2CO3为缚酸剂,在40℃条件下加热搅拌6h合成人参皂苷Rg3衍生物,经硅胶柱柱层析纯化后得到一种新的人参皂苷衍生物,并利用紫外、红外色谱、高效液质联用、核磁共振等方法鉴定其结构。用MTT法检测该衍生物对人乳腺癌细胞株MCF-7的生长抑制作用。结果表明:从10～100μg/mL质量浓度范围内,药物作用时间越长,质量浓度越大抑制率越高。药物作用24、48、72h的IC50值分别为146.68、122.39、101.95μg/mL。提示人参皂苷Rg3衍生物是一种较有潜力的药物原料。

人参皂苷Rg3联合肿瘤抑素19肽对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及机制

目的研究人参皂苷Rg3联合肿瘤抑素19肽对肝癌HepG2细胞凋亡的影响及作用机制。方法实验为两因素两水平2×2析因设计,因素A为人参皂苷Rg3,水平为0 mg/L和40 mg/L,因素B为肿瘤抑素19肽,水平为0 mg/L和200 mg/L。CCK-8试剂盒检测肝癌HepG2细胞增殖情况;Hoechst33342染色检测细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测HepG2细胞凋亡率。荧光探针JC-1检测细胞的膜电位改变。Western blot法检测细胞抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)、磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)和磷酸化的丝氨酸/苏氨酸激酶(p-Akt)蛋白的表达变化。天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)活性测定试剂盒检测细胞Caspase-3和Caspase-9的活性。结果人参皂苷Rg3、肿瘤抑素19肽及联合用药对HepG2细胞的增殖均有抑制作用,且两者具有正协同效应;CCK-8测定人参皂苷Rg3的IC50为45.06 mg/L,肿瘤抑素19肽IC50为214.03 mg/L。Hoechst33342染色可见Rg3和19肽单用或合用时均出现细胞凋亡,并且联合用药细胞凋亡形态变化明显。流式细胞术检测细胞凋亡趋势与Hoechst33342染色结果一致,联合用药凋亡率最高。荧光探针JC-1检测表明单用或合用时细胞膜电位下降,产生绿色荧光,联合用药产生绿色荧光最为明显。联合用药更为显著上调PTEN蛋白表达,下调p-PI3K和p-Akt蛋白表达,显著增高Caspase-3和Caspase-9活性(P<0.001)。结论人参皂苷Rg3和肿瘤抑素19肽具有抑制肝癌HepG2细胞增殖,诱导其凋亡的作用,且两者具有正协同效应。其作用机制可能是通过PTEN/PI3K/Akt信号通路实现的。