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黄瓜枯萎病拮抗菌Burkholderia gladioli L1-3的分离鉴定及防病促生效果 被引量:2
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作者 李亚莉 侯栋 +2 位作者 岳宏忠 张东琴 段艳巧 《中国蔬菜》 北大核心 2022年第12期52-58,共7页
为筛选出拮抗黄瓜枯萎病的生防细菌,从甘肃省22块多年连作黄瓜的枯萎病发生地块采集土样,采用平板对峙法筛选拮抗菌株,基于形态特征、生理生化特性及基因序列分析对拮抗菌株进行鉴定;并且测定拮抗菌株的抑菌谱及其对黄瓜枯萎病的防病促... 为筛选出拮抗黄瓜枯萎病的生防细菌,从甘肃省22块多年连作黄瓜的枯萎病发生地块采集土样,采用平板对峙法筛选拮抗菌株,基于形态特征、生理生化特性及基因序列分析对拮抗菌株进行鉴定;并且测定拮抗菌株的抑菌谱及其对黄瓜枯萎病的防病促生效果。结果表明:分离、筛选出的6株对尖孢镰孢菌黄瓜专化型具有较强拮抗作用的细菌菌株均被鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)。施用L1-3菌剂对黄瓜枯萎病的防治效果达64.71%,黄瓜幼苗的根系活力、叶绿素含量、POD和SOD活性均显著高于对照,并且对尖孢镰孢菌甜瓜专化型、尖孢镰孢菌西瓜专化型、尖孢镰孢菌十字花科专化型、辣椒腐霉菌、辣椒灰葡萄孢菌、辣椒立枯丝核菌、辣椒疫霉菌、茄链格孢均有较强的拮抗效果。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 黄瓜枯萎病 生物防治 防效
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Multiple skin abscesses associated with bacteremia caused by Burkholderia gladioli:A case report
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作者 Yi-Ting Wang Xue-Wen Li +2 位作者 Pan-Yang Xu Chun Yang Jian-Cheng Xu 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2022年第7期2286-2293,共8页
BACKGROUND Burkholderia gladioli(B.gladioli)is regarded as a rare opportunistic pathogen.Only a few patients with abscesses caused by B.gladioli infections have been reported,and these are usually abscesses at the inc... BACKGROUND Burkholderia gladioli(B.gladioli)is regarded as a rare opportunistic pathogen.Only a few patients with abscesses caused by B.gladioli infections have been reported,and these are usually abscesses at the incision caused by traumatic surgery.CASE SUMMARY A 74-year-old male patient with abscesses and pain throughout his body for 1 mo was admitted to our hospital.Some of the abscesses had ruptured with purulent secretions on admission.Color Doppler ultrasound examination of the body surface masses showed mixed masses 75 mm×19 mm,58 mm×17 mm,17 mm×7 mm,and 33 mm×17 mm in size in the muscle tissues of both the right and left forearms,the posterior area of the right knee and the left leg,respectively.Abscess secretions and blood cultures grew B.gladioli.The following 3 methods were used to jointly identify the bacterium:an automatic microbial identification system,matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,and full-length 16 S rDNA sequencing.After 27 d of treatment with meropenem,etimicin,trimethoprim-sulfamethoxazole and other antibiotics,most of his skin abscesses were flat and he was discharged without any symptoms.CONCLUSION This is the first reported case of multiple skin abscesses associated with bacteremia caused by B.gladioli.Our study provides important reference values for the clinical diagnosis and treatment of B.gladioli infections. 展开更多
关键词 Burkholderia gladioli Multiple skin abscesses BACTEREMIA Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry Case report
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基于体温扩增的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种3种可视化快速检测方法的建立
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作者 林志伟 王帅 +5 位作者 蔡杰 聂丹丹 李涛 李红娜 杨艳歌 袁飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期219-225,共7页
为实现食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种(Burkholderia gladioli pv. cocovenenans)的快速检测,基于体温扩增技术——酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA),并根据唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种bonM... 为实现食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种(Burkholderia gladioli pv. cocovenenans)的快速检测,基于体温扩增技术——酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA),并根据唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种bonM基因序列设计和筛选了ERA检测引物和探针,分别建立ERA显色法、荧光法、试纸条法3种可视化快速检测方法,并评估其特异性和灵敏度,以及在市售样品检测适用性和准确性。结果显示,建立的方法对3株唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病型菌株均有扩增,其他常见的食源性致病菌以及其他唐菖蒲伯克霍尔德氏菌均无扩增,说明检测方法的特异性良好。3种方法的检出限均为10^(-2)ng/μL,灵敏度较好。采用建立的3种可视化快速检测方法对15份市售样品进行检测,检出阳性2份,检出率为13.3%。该结果与国标方法的检测结果一致,说明方法具有较好的适用性和准确性。本研究建立的基于体温扩增技术的显色法、荧光法和试纸条法具有较高的特异性及灵敏度,37℃体温扩增15 min左右即可获取检测结果,且裸眼可视,可为食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种的现场可视化快速筛查提供新型简便的策略。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种 酶促等温扩增技术 可视化 快速检测
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食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌实时荧光PCR检测的研究
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作者 蔡彦秋 查杰 +1 位作者 沐阳 陈辉 《食品安全导刊》 2024年第20期44-47,共4页
目的:建立唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的核酸检测方法。方法:根据16S~23S rRNA基因片段序列,利用Oligo7设计TaqMan探针及引物,并验证实时荧光PCR检测方法的特异性和灵敏性。结果:用实时荧光PCR检测方法检测15株标准菌株,只有唐菖蒲伯克霍尔德... 目的:建立唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的核酸检测方法。方法:根据16S~23S rRNA基因片段序列,利用Oligo7设计TaqMan探针及引物,并验证实时荧光PCR检测方法的特异性和灵敏性。结果:用实时荧光PCR检测方法检测15株标准菌株,只有唐菖蒲伯克霍尔德氏菌呈阳性,验证了此方法具有良好的特异性。灵敏度实验中得出菌液灵敏度为5.8×10~2 CFU·mL^(-1),DNA灵敏度为7.2×10^(-4) ng·μL^(-1)。结论:建立的实时荧光PCR检测方法有良好的特异性和灵敏度,该方法可用于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的快速检测,具有较好的应用价值。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 实时荧光PCR 特异性 灵敏性
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一株溶磷抑病细菌的筛选及其溶磷特性 被引量:27
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作者 胡晓峰 郭晋云 +3 位作者 张楠 沈标 徐阳春 沈其荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期2253-2260,共8页
【目的】筛选一株兼具高效利用Ca3(PO4)2、磷矿粉和卵磷脂等难溶性磷源和抑制土传病害功能的菌株。【方法】液体培养条件下测定所筛菌株对Ca3(PO4)2、磷矿粉和卵磷脂的溶磷效果,平板对峙试验研究对土传病害的拮抗作用。【结果】通过室... 【目的】筛选一株兼具高效利用Ca3(PO4)2、磷矿粉和卵磷脂等难溶性磷源和抑制土传病害功能的菌株。【方法】液体培养条件下测定所筛菌株对Ca3(PO4)2、磷矿粉和卵磷脂的溶磷效果,平板对峙试验研究对土传病害的拮抗作用。【结果】通过室内平板和摇瓶试验,从江苏和安徽的5种石灰性土壤中分离、筛选获得的6株溶磷菌,均能溶解Ca3(PO4)2、磷矿粉和卵磷脂。其中,菌株P1溶解Ca3(PO4)2和卵磷脂的效果最好,培养7d后水溶性磷浓度分别达到674.5和33.0μg·mL-1,其对磷矿粉的溶磷量也达132.3μg·mL-1。经过16SrDNA基因序列分析和生理生化鉴定,菌株P1为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌。对峙试验结果表明,其对辣椒疫霉、大丽轮枝菌、烟草疫霉烟草变种和立枯丝核菌都有一定的拮抗作用。【结论】菌株P1不仅对Ca3(PO4)2、磷矿粉和卵磷脂有较好的溶解效果,对一些土传病害病原菌也有抑制作用。 展开更多
关键词 溶磷 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 拮抗作用 溶磷特性
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椰酵假单胞菌与唐菖蒲伯克霍尔德菌16S~23S rRNA基因间区序列的比较研究 被引量:22
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作者 焦振泉 曹玮 +2 位作者 余东敏 刘秀梅 王晓英 《中国食品卫生杂志》 2008年第3期197-203,共7页
目的研究比较我国分离的椰酵假单胞菌与唐菖蒲伯克霍尔德菌不同致病型菌株的16S~23S rRNA基因间区序列,分析不同菌株基因水平的差别,并阐述其系统发育关系。方法设计2对伯克霍尔德菌属特异引物,扩增16S~23SrRNA基因间区序列。应用分... 目的研究比较我国分离的椰酵假单胞菌与唐菖蒲伯克霍尔德菌不同致病型菌株的16S~23S rRNA基因间区序列,分析不同菌株基因水平的差别,并阐述其系统发育关系。方法设计2对伯克霍尔德菌属特异引物,扩增16S~23SrRNA基因间区序列。应用分子生物学软件,对3株分别代表唐菖蒲伯克霍尔德菌3种不同致病型的国际参考菌株(ATCC10248、NCPPB947、NCPPB3580)、1株伯克霍尔德菌属B.phenazinium种代表株(LMG2247)及8株从我国不同地域、不同食物样品中分离的椰酵假单胞菌(HN2y、Co14、Co8、Co36、Sx8801、90-3、56(2)、56(2))的16S~23SrRNA基因序列进行测定,并与核酸数据库(GenBank)中相关菌株序列进行比较分析。结果通过不同菌株16S~23SrRNA间区序列的分析比较,发现分离的椰酵假单胞菌米酵菌酸产毒株存在2个序列高可变区及特异基因序列,阐述了我国椰酵假单胞菌与唐菖蒲伯克霍尔德菌的系统发育关系,将DNA测序结果在核酸数据库中注册,并绘制了系统发育进化树。结论该研究结果为进一步鉴定椰酵假单胞菌米酵菌酸产毒株,从分子水平探讨其产毒机制及系统发育关系提供了新的、可靠的理论依据和技术支撑。 展开更多
关键词 假单胞菌属 伯克霍尔德杆菌 唐菖蒲 基因 RRNA 研究 配对分析
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超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法测定血浆和尿液中米酵菌酸和异米酵菌酸 被引量:26
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作者 张秀尧 蔡欣欣 +1 位作者 张晓艺 李瑞芬 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第3期268-277,I0003,共11页
建立了超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定生物样品中米酵菌酸和异米酵菌酸的方法。将米酵菌酸在2 mol/L KOH溶液中100℃加热反应2 h制备异米酵菌酸标准品,并通过与对照品的质谱、色谱、紫外光谱比较而确认。血浆样... 建立了超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定生物样品中米酵菌酸和异米酵菌酸的方法。将米酵菌酸在2 mol/L KOH溶液中100℃加热反应2 h制备异米酵菌酸标准品,并通过与对照品的质谱、色谱、紫外光谱比较而确认。血浆样品用含0.5%氨水的乙腈溶液-甲醇(9∶1,V/V)沉淀除去血浆蛋白,在酸性条件下用正己烷萃取净化;尿液样品使用正己烷在酸性条件下萃取净化。选择Acquity BEH C18色谱柱,以0.05%甲酸-乙腈溶液(V/V)-0.05%甲酸水溶液(V/V)为流动相进行洗脱,电喷雾负离子多离子监测模式(MRM)检测,基质加标标准曲线外标法定量。结果表明:血浆和尿液中米酵菌酸和异米酵菌酸的线性范围均为0.05~10.0μg/L,相关系数大于0.998,平均加标回收率在92%~106%之间,相对标准偏差均为2.4%~13%(n=6),方法的检出限(S/N=3)均为0.02μg/L。该方法简单、灵敏、准确,可用于鉴定椰毒假单胞菌引起的中毒。 展开更多
关键词 米酵菌酸 异米酵菌酸 椰毒假单胞菌 血浆 尿液 生物样品 超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS/MS)
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唐菖蒲伯克霍尔德菌菌体脂肪酸成分测定与分析 被引量:8
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作者 杜春明 焦振泉 +1 位作者 郭云昌 刘秀梅 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期613-616,共4页
目的对唐菖蒲伯克霍尔德菌不同致病型菌株的菌体脂肪酸成分进行测定和分析。方法利用气相色谱法测定唐菖蒲伯克霍尔德菌不同致病型菌株的菌体脂肪酸成分,并利用MIDI-FAME方法进行分析。结果研究发现椰毒假单胞菌的菌株与唐菖蒲伯克霍尔... 目的对唐菖蒲伯克霍尔德菌不同致病型菌株的菌体脂肪酸成分进行测定和分析。方法利用气相色谱法测定唐菖蒲伯克霍尔德菌不同致病型菌株的菌体脂肪酸成分,并利用MIDI-FAME方法进行分析。结果研究发现椰毒假单胞菌的菌株与唐菖蒲伯克霍尔德菌中其他致病型菌株的脂肪酸成分非常相似,从而进一步确定了它的分类地位。另外还发现C16∶0.2OH、C18∶1.2OH和C16∶1.2OH与椰毒假单胞菌酵米面亚种的米酵菌酸的产生具有一定的联系。结论由脂肪酸成分分析确认了椰毒假单胞菌的分类地位,为进一步研究它的产毒机制和致病机理积累资料。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德菌 脂肪酸
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双重PCR方法检测检疫性细菌洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌 被引量:4
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作者 杨万风 刘艳 +3 位作者 陆辰晨 邵沛泽 谌运清 赵文军 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期426-431,共6页
为建立同步检测检疫性细菌洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌的双重PCR方法,根据Gen Bank上公布的洋葱腐烂病菌ITS序列设计1对特异性引物B3/B6,将设计的引物与已发表的检测菊基腐病菌特异性引物ADE1/ADE2结合,经过条件优化,建立了双重PCR反应体... 为建立同步检测检疫性细菌洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌的双重PCR方法,根据Gen Bank上公布的洋葱腐烂病菌ITS序列设计1对特异性引物B3/B6,将设计的引物与已发表的检测菊基腐病菌特异性引物ADE1/ADE2结合,经过条件优化,建立了双重PCR反应体系,并进行特异性和灵敏度验证。应用双重PCR体系能从洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌基因组DNA以及人工带菌样品中扩增到特异性条带。结果表明,建立的双重PCR检测方法能同时检测出洋葱腐烂病菌和菊基腐病菌,可应用于口岸进口郁金香种球2种检疫性细菌的检测。 展开更多
关键词 洋葱腐烂病菌 菊基腐病菌 双重PCR 检测方法
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剑兰叶斑病菌鉴定及其生物学特性研究 被引量:4
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作者 沈会芳 张景欣 +3 位作者 杨祁云 蒲小明 孙大元 林壁润 《广东农业科学》 CAS 2021年第11期88-95,共8页
【目的】叶斑病是制约广东省台山市剑兰产业的重要因素,对病原菌进行分类鉴定、生物学特性和杀菌剂敏感性研究,旨在为病害防控提供参考。【方法】基于病菌致病性、形态特征和rDNA-ITS序列分析确定病菌分类地位,采用菌丝生长速率法和镜... 【目的】叶斑病是制约广东省台山市剑兰产业的重要因素,对病原菌进行分类鉴定、生物学特性和杀菌剂敏感性研究,旨在为病害防控提供参考。【方法】基于病菌致病性、形态特征和rDNA-ITS序列分析确定病菌分类地位,采用菌丝生长速率法和镜检孢子量测定温度、pH、光照、碳源、氮源和杀菌剂对病菌生长的影响。【结果】分离纯化获得性状一致的4株菌株,致病性测定表明人工接种发病症状与田间症状表现一致。病菌分生孢子梗褐色,多单生,具隔膜,顶端屈膝状,大小为51.0~80.0 m×4.0~7.6 m。分生孢子褐色、弓形、中间宽两端窄,向一侧弯曲,4个细胞,大小为23.5~32.0 m×11.5~16.0 m。基于病菌r DNA-ITS序列进行系统进化分析,病菌与唐菖蒲弯孢霉(Curvularia gladioli)聚类到一起,形成明显分支。给合病菌形态特征和r DNAITS序列分析确定病原菌为唐菖蒲弯孢霉(Curvularia gladioli Boerema&Hamers)。适宜病菌菌丝生长和产孢的温度范围为26~30℃,pH范围为5.0~7.0;光照促进菌丝生长,黑暗利于产孢;碳源木糖、葡萄糖和有机氮源牛肉膏适宜菌丝生长和孢子产生。咪鲜胺和代森锰锌对菌丝生长抑制作用最强,EC50分别为1.23、2.81 g/mL。【结论】广东省台山市剑兰叶斑病病原菌为菌唐菖蒲弯孢霉,适宜生长温度为26~30℃,pH为5.0~7.0,对咪鲜胺和代森锰锌敏感。 展开更多
关键词 剑兰 叶斑病 唐菖蒲弯孢霉 生物学特性 药剂敏感性
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弯孢属3个中国新记录种 被引量:1
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作者 张猛 武海燕 +1 位作者 田志强 张天宇 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期524-526,共3页
报道了弯孢属3个中国新记录种:松岛弯孢Curvularia matsushimae(Matsushima)Tsuda,卵形弯孢Curvulariaovoidea(Hiroe&Watan.)Muntanola和车轴草弯孢唐菖蒲变种Curvularia trifolii.sp.gladioli(Kauffm.)Boedijn.研究标本保藏于山东... 报道了弯孢属3个中国新记录种:松岛弯孢Curvularia matsushimae(Matsushima)Tsuda,卵形弯孢Curvulariaovoidea(Hiroe&Watan.)Muntanola和车轴草弯孢唐菖蒲变种Curvularia trifolii.sp.gladioli(Kauffm.)Boedijn.研究标本保藏于山东农业大学植物病理标本室. 展开更多
关键词 弯孢属 松岛弯孢 卵形弯孢 车轴草弯孢唐菖蒲变种 新记录
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云南省一例唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)食物中毒事件调查分析 被引量:19
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作者 范璐 栾杰 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第23期8098-8101,共4页
目的调查分析云南省一例唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)食物中毒事件。方法参照GB/T4789.29-2003《食品卫生微生物学检验椰毒假单胞菌酵米面亚种检验》对样品进行唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检测。按照GB 5009.189-2016《食品... 目的调查分析云南省一例唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)食物中毒事件。方法参照GB/T4789.29-2003《食品卫生微生物学检验椰毒假单胞菌酵米面亚种检验》对样品进行唐菖蒲伯克霍尔德氏菌检测。按照GB 5009.189-2016《食品安全国家标准食品中米酵菌酸的测定》检测样品中的米酵菌酸,采用液相色谱法对样品进行检测。用VITEK 2COMPACT全自动微生物生化鉴定仪和飞行时间质谱进行微生物鉴定。结果2份样品鉴定结果为唐菖蒲伯克霍尔德菌。2份样品均检测出米酵菌酸,含量分别为18.0和24.2 mg/kg。结论本次食物中毒源于食源性唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)污染。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种) 食物中毒 米酵菌酸
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唐菖蒲枯萎病田间消长规律及防治技术
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作者 王健 陶树春 +1 位作者 李锦龙 魏周玉 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期155-158,共4页
通过田间观察,唐菖蒲出苗后15 d出现枯萎病病株,花苞形成至初花期为发病高峰期。大棚种植和露地种植、茬口、母籽大小与发病有关。播种时用药剂浸泡母籽或处理播种沟,可减轻枯萎病的发生。
关键词 唐菖蒲 枯萎病 消长规律 防治技术
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番茄灰霉病拮抗细菌18BS-12发酵条件的优化及防治效果 被引量:11
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作者 赵新贝 上官妮妮 +3 位作者 李月飞 常东伟 王阳 马青 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第6期116-124,共9页
【目的】对采自陕西、甘肃和河南省的51个土壤样品中的细菌进行分离纯化,筛选番茄灰霉菌的拮抗生防菌株,并研究其防治效果和最优发酵条件。【方法】分别以平板对峙法和牛津杯法测定所分离菌株及其发酵滤液对番茄灰霉菌的抑菌作用,筛选... 【目的】对采自陕西、甘肃和河南省的51个土壤样品中的细菌进行分离纯化,筛选番茄灰霉菌的拮抗生防菌株,并研究其防治效果和最优发酵条件。【方法】分别以平板对峙法和牛津杯法测定所分离菌株及其发酵滤液对番茄灰霉菌的抑菌作用,筛选出抑菌作用显著的菌株,测定其离体和温室防治效果,并通过正交试验对防治效果明显且稳定的生防菌株的发酵条件进行优化,最后进行16SrDNA序列分析,对筛选菌株进行初步鉴定。【结果】经分离纯化得到533株细菌菌株,其中18BS-12的抑菌活性最好,离体和温室防治效果分别为82.37%和75.61%。对菌株18BS-12发酵培养基(NA培养基)进行正交试验优化,得到最佳发酵培养基配方(质量分数)为玉米粉2.0%,牛肉膏1.5%,FeSO40.015%。发酵滤液抑菌活性最强的发酵条件为:在250mL三角瓶中,将种子液按3%的体积比接种到50mL培养基中,初始pH 7.0,温度32℃,转速180r/min,发酵时间5d。菌株18BS-12的发酵滤液活性物质在高温、碱性条件和紫外光照射下较稳定。通过对其16SrDNA序列的分析比对,初步将其鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德菌(Burkholderia gladioli)。【结论】菌株18BS-12是1株对番茄灰霉病具有防治潜力的生防菌株。 展开更多
关键词 生物防治 番茄灰霉菌 发酵条件优化 唐菖蒲伯克霍尔德菌
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唐菖蒲伯克霍尔德氏菌三种鉴定方法的比较 被引量:10
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作者 赵梦馨 周帼萍 +4 位作者 黄庭轩 王安琪 杨祖顺 国译丹 范璐 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第11期56-61,共6页
以食品及环境样品中初步分离的13株疑似唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)为研究对象,通过比较生理生化检测法、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法和rec A序列分析法,得到快速准确鉴定唐菖蒲伯克霍尔德氏菌... 以食品及环境样品中初步分离的13株疑似唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)为研究对象,通过比较生理生化检测法、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法和rec A序列分析法,得到快速准确鉴定唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的方法。结果表明,13株疑似菌株经MALDI-TOF-MS法和rec A序列分析法鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌,而VITEK 2 COMPACT生理生化法鉴定8株(62%)为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌,其他5株为栖稻假单胞菌(Pseudomonas oryzihabitans)。在唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的鉴定方法中,MALDI-TOF-MS法和rec A序列分析法鉴定结果一致且准确,而VITEK 2 COMPACT生化检测法存在缺陷。相比传统生理生化鉴定方法,MALDI-TOF-MS法和rec A序列分析法在唐菖蒲伯克霍尔德氏菌鉴定中更为快速、准确。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 VITEK 2 COMPACT生化检测 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 recA序列分析
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米酵菌酸的相关检测方法研究进展 被引量:6
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作者 卢宇剑 刘华良 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第8期3273-3280,共8页
米酵菌酸是一种由唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰酵亚种产生的生物毒素,该毒素结构稳定,一般烹调方法不会破坏其毒性,摄入后通常引起人体器官损害甚至死亡。谷类发酵食品(河粉、发酵米粉、玉米面等)、薯类食品(马铃薯粉条、甘薯面)、变质银耳... 米酵菌酸是一种由唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰酵亚种产生的生物毒素,该毒素结构稳定,一般烹调方法不会破坏其毒性,摄入后通常引起人体器官损害甚至死亡。谷类发酵食品(河粉、发酵米粉、玉米面等)、薯类食品(马铃薯粉条、甘薯面)、变质银耳和黑木耳、椰子制品等均易受唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰酵亚种污染。米酵菌酸中毒事件常见于东南亚地区和印度尼西亚,我国近几年常发生相关食物中毒事件,并有死亡案例。本文综述了米酵菌酸的有关检测方法,以期为预防及处置米酵菌酸相关中毒事件提供参考。 展开更多
关键词 米酵菌酸 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰酵亚种 食物中毒 检测方法
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儿童血流感染唐菖蒲伯克霍尔德菌的临床特点及其药敏分析 被引量:1
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作者 游娟 杨虎 +1 位作者 鲍连生 向赟 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期687-690,共4页
目的探讨儿童血流感染唐菖蒲伯克霍尔德菌(B.gladioli)的临床特点及其药敏分析。方法回顾性分析2015年1月至2016年1月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院收治的63例血流感染B.gladioli和81例同期非细菌感染性疾病患儿的临床资料,... 目的探讨儿童血流感染唐菖蒲伯克霍尔德菌(B.gladioli)的临床特点及其药敏分析。方法回顾性分析2015年1月至2016年1月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院收治的63例血流感染B.gladioli和81例同期非细菌感染性疾病患儿的临床资料,比较两组患儿的C-反应蛋白(CRP)水平、降钙素原(PCT)水平和白细胞(WBC)计数。分离培养B.gladioli,使用Phoenixtm100型全自动微生物鉴定仪进行细菌初步鉴定,并用MALDI-TOP/MS质谱仪进行验证。采用纸片扩散法(Kirby-Bauer法)进行B.gladioli的体外药敏试验。结果感染B.gladioli的患儿主要集中在婴幼儿时期,年龄≤3岁者占82.54%(52/63)。所有患儿均患有严重的基础疾病,主要为支气管炎、肺炎和白血病等。与非细菌感染组比较,感染B.gladioli组患儿的PCT水平、CRP水平和WBC计数均升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。依据铜绿假单胞菌药敏标准,分离的B.gladioli对阿米卡星、庆大霉素、四环素、米诺环素、复方新诺明、环丙沙星、左氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦高度敏感,对氯霉素低度耐药,对头孢他啶、氨曲南高度耐药。结论感染B.gladioli的患者常为年龄≤3岁、免疫力低下、抵抗力差的患儿。血培养及CRP水平、PCT水平和WBC计数可作为疾病转归的判断指标。哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦是儿童感染B.gladioli的首选治疗药物。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德菌 细菌抗药性 纸片扩散抗菌试验 儿童 血流感染
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环境因素对吊浆粑中米酵菌酸含量的影响
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作者 卢宇剑 乔昕 +2 位作者 陈玉婕 刘华良 周永林 《粮油食品科技》 CAS CSCD 2023年第3期79-84,共6页
探究唐菖蒲伯克霍尔德菌椰酵亚种(Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans,BGC)在吊浆粑中的产米酵菌酸(bongkrekic acid,BA)特征及环境温度、湿度对其产BA的影响。在吊浆粑样品中接种BGC,调整接种浓度(103、105、107 CFU/mL)、... 探究唐菖蒲伯克霍尔德菌椰酵亚种(Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans,BGC)在吊浆粑中的产米酵菌酸(bongkrekic acid,BA)特征及环境温度、湿度对其产BA的影响。在吊浆粑样品中接种BGC,调整接种浓度(103、105、107 CFU/mL)、培养环境的温度(10±1、15±1、20±1、25±1、30±1和36±1℃)和湿度(20%、40%和60%),以高效液相色谱–串联质谱法测定不同条件下BA的含量。结果表明,各实验组的吊浆粑样品在培养1天后即可检出BA。当接种浓度为103 CFU/mL时,BGC在吊浆粑中产生并积累的BA含量高于接种浓度为105和107 CFU/mL的组别,组间差异为1~3μg/kg。较低温度(10±1、15±1和20±1℃)和较低湿度(20%)的环境可减少BGC在吊浆粑中产生BA。提示居民应食用新制作的吊浆粑,避免长时间贮存于高温、潮湿环境,以降低食物米酵菌酸中毒风险。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德菌 米酵菌酸 吊浆粑 HPLC-MS/MS
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唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病变种污染调查及其生长与产毒特性分析 被引量:3
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作者 李兵 叶青华 +4 位作者 赵美平 陈维 黄乙卿 吴清平 张菊梅 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2022年第10期283-289,共7页
唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病种(Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans,BGC)是迄今我国发现的发病率和死亡率最高的食源性致病菌。为调查广州市市售湿米面制品、银耳及木耳中BGC的污染状况,同时掌握在不同培养条件下BGC的生长与... 唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病种(Burkholderia gladioli pathovar cocovenenans,BGC)是迄今我国发现的发病率和死亡率最高的食源性致病菌。为调查广州市市售湿米面制品、银耳及木耳中BGC的污染状况,同时掌握在不同培养条件下BGC的生长与产毒规律,依据GB 4789.29-2020对100份食品样品进行定性分析;通过测定BGC菌株在各培养条件下菌液的OD600值和毒素含量,分析了不同的温度、时间、pH及NaCl浓度下BGC的生长状况与产毒能力。结果表明,100份食品样品中共检出1份(湿木耳)BGC阳性样品,污染率为1%(1/100);BGC的生长与产毒受培养基的影响较大,碱性(pH值为9.5~10.5)与一定渗透压(NaCl质量浓度为0.02~0.04 g/mL)环境下,BGC在马铃薯葡萄糖水中能生长,而在脑心浸液肉汤中几乎不生长,BGC在马铃薯半固体琼脂中的产毒量(231.24μg/mL)远大于BHI半固体琼脂和LB半固体琼脂;BGC适宜生长和产毒的温度为20~37℃、适宜pH值为4~8.5,其中最适生长温度与pH值分别为37℃、6.0,最佳产毒温度与pH值为30℃、7.0;BGC在低温(4~15℃)下仍能存活,且有少量的毒素产生(2.11μg/mL);当NaCl质量浓度为0.005 g/mL时,产毒量从未添加前的139.80降至52.27μg/mL,达到0.04 g/mL时,产毒为0。结果提示,广州市市售木耳中存在BGC污染的风险,在食品加工或贮存过程中添加一定浓度的NaCl可减少由BGC引起的食物中毒。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德菌椰毒致病变种 污染调查 生长特性 产毒能力
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啮齿类实验动物唐菖蒲伯克霍尔德菌荧光定量PCR方法的建立及应用
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作者 申屠芬琴 刘敏 +7 位作者 王雪妹 王吉星 彭刚 吴石爱 李艳楠 周倩 张巧稚 韩雪 《实验动物科学》 2023年第4期69-72,共4页
目的建立用于检测实验动物小鼠中唐菖蒲伯克霍尔德菌的荧光定量PCR方法。方法参考团标公布的序列合成唐菖蒲伯克霍尔德氏菌引物、探针和质粒,建立荧光PCR方法,并对方法的线性、灵敏度、重复性和特异性等性能进行验证。同时应用建立的荧... 目的建立用于检测实验动物小鼠中唐菖蒲伯克霍尔德菌的荧光定量PCR方法。方法参考团标公布的序列合成唐菖蒲伯克霍尔德氏菌引物、探针和质粒,建立荧光PCR方法,并对方法的线性、灵敏度、重复性和特异性等性能进行验证。同时应用建立的荧光PCR方法和细菌培养法对110份小鼠送检样品进行比对检测。结果建立的唐菖蒲伯克霍尔德菌荧光PCR方法,相关系数R2可达0.998,线性良好;方法最低可检测至1×10^(2) copies/5μL,灵敏度高;方法检测培养的唐菖蒲伯克霍尔德菌为阳性,检测金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、产酸克雷伯杆菌、绿脓杆菌和嗜肺巴斯德杆菌均为阴性,特异性良好。采集110只安乐死小鼠样品,分别进行细菌培养和荧光PCR检测,结果均为阴性,2种方法结果完全符合。结论建立的荧光PCR方法性能良好,可用于实验动物小鼠唐菖蒲伯克霍尔德菌的检测。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德菌 荧光PCR 检测 培养
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