氮素诱导的甜菜gln2的克隆及序列分析

本文探索了在氮素诱导下,甜菜gln2序列变化情况及氮素对gln2的调控表达情况。根据已知甜菜谷氨酰胺合成酶基因(gln2,登录号为AY026353)设计特异引物,利用RT-PCR方法克隆甜菜质体型谷氨酰胺合成酶的cDNA(GS2 cDNA)片段和甜菜质体型谷氨酰胺合成酶基因组DNA(GS2 DNA)序列,并进行生物信息学分析。获得甜菜GS2 cDNA片段序列,并首次得到甜菜GS2 DNA序列,并将GS2DNA登录到了NCBI网站的GenBank(登录号为EU558132)。生物信息学分析结果表明,GS2 DNA长度为6 144bp,含有13个外显子和12个内含子;氮素诱导的GS2 cDNA序列长度为1 296bp,与gln2序列相似性达99.92%,可编码431个氨基酸残基;其氨基酸序列与其它植物的质体型谷氨酰胺合成酶(GS2)有很高的同源性,与菠菜GS2的同源性最高,属于混合型蛋白,具有Gln-synt保守功能域,N端为beta-Grasp domain,C端为catalytic domain。采用半定量PCR分析该基因在氮素处理下的诱导表达情况,结果表明,NO3-N∶NH4+-N=80∶20和NO3-N∶NH4+-N=50∶50的处理对GS2基因表达的促进效果最好,NO3-N∶NH4+-N=0∶100对GS基因诱导作用最差。研究甜菜GS基因的结构功能及表达调控对甜菜实现高同化氨及增产增糖有重要意义。

龙须菜四分孢子体不同发育阶段差异表达基因克隆和启动子区分析与刺激响应研究

龙须菜四分孢子体形成的四分孢子囊数量和四分孢子放散量可以作为育性高低的指标。龙须菜品种"981"在成熟期四分孢子放散量极低,与"鲁龙1号"有显著差异,即"981"具有低育的育性特点。从2个品种不同发育阶段数字表达谱数据中,筛选得到与育性控制相关的差异表达基因——D-乳酸脱氢酶(dld),谷氨酰胺合成酶(gln2)和热激蛋白(hsp15.4)。克隆得到dld完整的ORF与上游序列并进行测序分析,设置诱导条件检测3个基因的表达量,探究基因表达的调控因素。dld基因具有D-乳酸脱氢酶结构域、龙须菜特有的2个跨膜区、1个低复杂性区域。启动子区功能预测发现3个基因均可能受光照、茉莉酸甲酯和一些植物激素的调控。通过半定量PCR技术检测不同诱导条件下3个基因的表达变化趋势,结果显示光照与茉莉酸甲酯均可刺激3个基因的正表达。

超声制纳米TiO_2及光催化降解活性深蓝的研究

介绍了TiCl4超声水解制备纳米TiO2的方法,探讨了超声波的作用机理,并以活性深蓝ST-2GLN为目标降解物,考察超声波及煅烧温度对纳米TiO2光催化性能的影响。结果表明:超声波能大幅度提高纳米TiO2光催化性能;300℃煅烧得到的纳米TiO2在催化剂质量浓度1.0g/L,25℃,8W紫外灯(波长254nm)照射,活性深蓝ST-2GLN水溶液初始质量浓度30mg/L的条件下,80min降解率即可达到99.7%。

Fenton氧化降解活性深蓝B-2GLN的在线分光光度法研究

采用在线分光光度法研究水溶液中活性深蓝染料B-2GLN的Fenton氧化降解过程。考查Fe SO4和H2O2的初始剂量、p H以及活性深蓝染料B-2GLN的初始质量浓度对染料降解过程的影响,并通过离子色谱法对Fenton氧化后的产物进行分析。研究结果表明:在Fenton氧化过程中,在线分光光度法是研究活性深蓝染料色度去除率的一种快速、方便及可行的技术,含活性深蓝染料废水的Fenton氧化过程分为2个阶段;Fenton氧化过程降解活性深蓝染料B-2GLN的最佳条件,即H2O2最佳剂量为2.635 mmol/L,p H为2.7,催化剂Fe2+的投加量为0.069 6 mmol/L;水溶液中活性深蓝染料B-2GLN的分子结构只是被Fenton氧化分解而未被完全矿化(300 s)。

纳米TiO_2薄膜对活性深蓝ST-2GLN染料的光催化降解研究

采用溶胶-凝胶(Sol-Gel)法,以钛酸正丁酯为前驱体,以不锈钢表面为基底,用提拉法镀膜,在400℃下高温煅烧2 h,制备出纳米TiO2薄膜光催化剂。在以波长为254 nm、8 W的紫外灯为光源、光源到溶液的距离为2 cm的条件下,对活性深蓝ST-2GLN模拟染料废水进行光催化降解试验。探讨了光照时间、初始质量浓度、TiO2提拉层数、初始pH值和H2O2的投加量等因素对脱色率的影响。结果表明:初始质量浓度为80 mg/L、TiO2提拉层数为4层、pH值为7.0的条件下,H2O2(30%)的投加量为3.0 mL,经2 h的光照,脱色率达到87%。光催化降解活性深蓝ST-2GLN染料的动力学研究表明,其降解过程是一个一级反应过程,反应速率常数为0.013 2 min-1。

循环伏安法研究活性深蓝B-2GLN的电化学性质

采用循环伏安法探讨了活性深蓝B-2GLN在玻碳电极表面的电化学行为.结果表明：在0.1mol·L-1的Na2SO4底液中,B-2GLN有一个稳定的不可逆氧化峰,峰电位Ep=0.9V（vs SCE）,其电化学氧化反应受扩散控制且氧化产物具有吸附性,电子转移数为2,扩散系数D=1.264×10^-4 cm^2·s^-1;氧化峰电流ip与c（B-2GLN）在1.0×10^-5~8.0×10^-5 mol·L^-1范围内呈现良好的线性关系,相关系数r=0.998 9.

脂联素受体2基因+33371Gln/Arg、细胞色素P4502E1基因RsaⅠ位点多态性和吸烟与非酒精性脂肪性肝病的相关性

目的探讨脂联素受体2（AdipoR2）基因＋33371Gln/Arg、细胞色素P4502E1（CYP2E1）基因RsaⅠ位点多态性和吸烟与非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）发病之间的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以750例NAFLD患者及750例健康对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术分析了＋33371Gln/Arg和CYP2E1-RsaⅠ基因多态性。结果 ＋33371Gln/Arg（A/A）基因型和CYP2E1-RsaⅠ（c2/c2）基因型频率分布分别为39.20%、71.73%（病例组）和21.07%、43.07%（对照组）。＋33371Gln/Arg（A/A）患NAFLD的风险显著增加（OR=2.4156,95%CI=1.8164-4.0725）。CYP2E1-RsaⅠ（c2/c2）基因型者患NAFLD的风险也显著增加（OR=3.3547,95%CI=1.9182-4.5057）。＋33371Gln/Arg（A/A）/CYP2E1-RsaⅠ（c2/c2）基因型者在NAFLD组和对照组中的分布频率分别为32.67%和6.40%。＋33371Gln/Arg（A/A）/CYP2E1-RsaⅠ（c2/c2）基因型者患NAFLD的风险显著增加（OR=9.9264,95%CI=4.2928-12.4241）。病例组的吸烟率显著高于对照组的吸烟率（OR=2.5919,95%CI=1.4194-4.9528）,＋33371Gln/Arg（A/A）/CYP2E1-RsaⅠ（c2/c2）基因型与吸烟有协同作用（OR=34.6764,95%CI=18.9076-61.5825）。结论 ＋33371Gln/Arg（A/A）/CYP2E1-RsaⅠ（c2/c2）基因型和吸烟是NAFLD的易患因素,三者的联合在NAFLD的发生中起着协同的作用。

ERCC2/XPD和XRCC1基因多态性与鼻咽癌放化疗患者临床转归的相关性研究

目的探讨D组着色性干皮病偶联因子(XPD)的核苷酸切除修复交叉互补基因2(ERCC2/XPD) Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp基因多态性与鼻咽癌(NPC)患者放化疗敏感性及预后相关性。方法选择2015年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院首次接受治疗的NPC患者128例,其中男性82例,女性46例;年龄35~77岁,平均年龄56.28岁。根据放化疗是否敏感分为敏感组和不敏感组。记录所有患者临床资料。采用聚合酶链反应(PCR)检测2组患者ERCC2/XPD Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp基因多态性,采用Hardy-Weinberg遗传平衡吻合度检验法计算各基因型的理论值。Logistic回归分析影响NPC放化疗敏感性的因素,Kaplan-Meier分析不同基因型组间总生存期(OS)的差异。结果敏感组72例,不敏感组56例。敏感组与不敏感组性别、年龄、吸烟习惯、Karnofsky(KPS)评分、化疗方式、T分期比较,差异无统计学意义(P> 0.05),两组患者N分期、美国癌症联合委员会(AJCC)分期、分化程度、淋巴结转移比例、放疗前肿瘤靶区体积(GTVnx)及淋巴结靶区体积(GTVnd)差异有统计学意义(P <0.05);两组间ERCC2/XPD Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp的3种基因型均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P> 0.05);两组患者ERCC2/XPD Lys751Gln基因和XRCC1 Arg194Trp基因的不同基因型分布比较,差异有统计学意义(P <0.05);多因素Logistic回归分析显示,N分期N2+N3期、放疗前GTVnx、放疗前GTVnd、淋巴结转移及ERCC2/XPD Lys751Gln的携带Gln基因型和XRCC1Arg194Trp的携带Trp基因型是影响NPC患者放化疗的独立危险因素;携带ERCC2/XPD Lys751Gln基因Gln等位基因患者3年OS为60.00%,不携带Gln等位基因患者3年OS为79.17%,两者差异具有统计学意义(P <0.05);携带XRCC1 Arg194Trp基因Trp等位基因患者3年OS为58.14%,不携带Trp等位基因患者3年OS为73.81%,两者差异具有统计学意义(P <0.05)。结论 ERCC2/XPD Lys751Gln和XRCC1 Arg194Trp基因多态性与NPC患者放化疗敏感性有关,分别携带Gln、Trp等位基因是放化疗敏感性的危险因素,且患者OS明显降低。

Toll样受体2基因Arg753Gln和CD14启动子-159C/T多态性与肺炎链球菌病易感性的Meta分析

目的评价Toll样受体2基因Arg753Gln和CD14启动子-159C/T多态性与肺炎链球菌病易感性的相关性。方法检索PubMed、Cohrance、Embase、CNKI、维普、万方等数据平台,检索文献时间限定为从建库到2017年6月1日。搜寻符合纳入和排除条件的随机对照研究,RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果纳入TLR2有关论文3篇,样本量总计为951例;纳入CD14相关研究2篇,样本量总计为674例。Meta分析未见TLR2基因Arg753Gln多态性和CD14-159C/T多态性与肺炎链球菌病易感性相关(显性等位基因vs.隐性等位基因:OR=0.76,95%CI=0.40～1.46,P=0.41;显性基因型vs.隐性基因型时,OR=0.70,95%CI=0.34～1.44,P=0.33)。结论未见TLR2基因Arg753Gln和CD14-159C/T多态性与肺炎链球菌病易感性相关。

Fenton氧化活性深蓝染料B-2GLN的动力学

为了考查H2O2/Fe2+的摩尔比和H2O2的初始剂量、pH值以及活性深蓝染料B-2GLN(RDB B-2GLN)的初始浓度对活性深蓝染料B-2GLN降解过程的影响,采用在线分光光度法对活性深蓝染料B-2GLN的Fenton氧化过程进行了研究,探讨了其动力学过程,并利用气相色谱-质谱联用分析降解中间产物。结果显示,采用Fenton氧化降解水溶液中活性深蓝染料B-2GLN,在H2O2的剂量为2.635 mmol/L,pH值为2.7,H2O2/Fe2+的摩尔比为37.80和活性深蓝染料B-2GLN的初始浓度16 mg/L的条件下,得到300 s后活性深蓝染料B-2GLN的最大色度去除率为85.04%。水溶液中活性深蓝染料B-2GLN与·OH的反应速率常数为2.62×1011L/(mol·s)。活性深蓝B-2GLN染料的分子结构被Fenton试剂分解而未被完全矿化,同时对活性深蓝染料降解产物进行了分析。在线分光光度法是研究染料色度去除率的一种精确、快速与可行的方法。