Immunoadjuvant action of liposomes for entrapped Japanese Encephalitis virus E－glucoprotein

ＩｍｍｕｎｏａｄｊｕｖａｎｔａｃｔｉｏｎｏｆｌｉｐｏｓｏｍｅｓｆｏｒｅｎｔｒａｐｐｅｄＪａｐａｎｅｓｅＥｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓｖｉｒｕｓＥ－ｇｌｕｃｏｐｒｏｔｅｉｎ￥ＨｕＪｕｎ（胡军）；ＭａＷｅｎｙｕ（马文煜）；ＨｕａｎｇＱｉｎｇｓｈｅｎｇ（黄庆生）...

复方丹参滴丸联合氯吡格雷治疗门诊冠心病患者的效果

目的探讨复方丹参滴丸联合氯吡格雷用于门诊冠心病患者治疗的效果研究。方法选取济南市第二人民医院2018年1月至2020年11月收治的122例门诊冠心病患者作为研究对象,进行前瞻性研究,根据随机数字表法将其分为联合组和对照组。对照组61例,男30例、女31例,年龄32~81(55.67±7.21)岁,予以氯吡格雷治疗;联合组61例,男31例、女30例,年龄39~76(57.36±8.85)岁,在对照组基础上联合复方丹参滴丸治疗。两组患者均于治疗前、治疗1个月后评估临床疗效、血小板功能[血小板膜糖蛋白GpⅡb/Ⅲa复合物(PAC-1)、血小板最大聚集率]、凝血功能[D-二聚体(D-D)水平,抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)水平]。组间比较采用t检验、χ^(2)检验、秩和检验。结果治疗前,两组PAC-1、血小板最大聚集率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗后,两组PAC-1、血小板最大聚集率较治疗前均降低(均P<0.05),且联合组PAC-1、血小板最大聚集率低于对照组(均P<0.05)。联合组临床疗效(95.08%,58/61)优于对照组(77.05%,47/61),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗1个月,两组D-D水平高于治疗前(P<0.05),联合组高于对照组(P<0.05);AT-Ⅲ水平低于治疗前(P<0.05),且联合组低于对照组(P<0.05)。结论复方丹参滴丸联合氯吡格雷能提高门诊冠心病患者的治疗效果,改善患者血小板功能、凝血功能。

血瘀证患者血小板α—颗粒膜蛋白、内皮素测定

本文以血小板α-颗粒膜蛋白(GMP—140)及内皮素(ET)为血小板活化、内皮细胞功能受损的指标。观察病种为心血管疾病、肾脏病及Ⅱ型糖尿病。结果显示:3种疾病组的血浆GMP—140、ET皆明显高于正常对照组(P<0.01及<0.001)。证实上述3种疾病组中存在着血小板活化及血管内皮细胞受损现象,并发现3种疾病中的血瘀证患者其GMP—140、ET值升高尤为明显,其值均显著高于无血瘀证患者。

消瘀止血片对出血性血小板病患者膜糖蛋白表达的影响

目的:观察消瘀止血片对出血性血小板病患者血小板膜糖蛋白表达的影响,探讨其治疗该病的可能机制。方法:148例出血性血小板病患者随机分为两组,中药组98例用消瘀止血片治疗;西药组50例用安络血及维生素 C、K、P 治疗,两组均治疗6个月。观察比较两组治疗后止血疗效及血小板聚集恢复率,并采用流式细胞术检测两组治疗前后及34例健康人(正常组)的血小板膜糖蛋白 GPⅠb/Ⅸ、GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb、GPⅡb、GPⅢa和 p-选择素的表达。结果:中药组止血总有效率为89.8%,西药组为54.0%(P<0.01);中药组血小板聚集功能恢复率为72.4%,西药组仅为4.0%(P<0.01)。两组患者治疗前GPⅠb/Ⅸ、GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb、GPⅢa及 p-选择素表达荧光强度均低于正常组(P<0.05);经中药治疗后,患者的血小板膜糖蛋白表达显著增加.与正常组比较差异无显著性(P>0.05),且明显优于西药组(P<0.05)。结论:消瘀止血片在受体蛋白水平上调节血小板膜糖蛋白 GPⅠb/Ⅸ、GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb、GPⅢa及 p-选择素的表达可能是其治疗出血性血小板病的疗效机理之一。

稀土对茶叶中稀土结合糖蛋白的组成及活性的影响

应用电感偶合等离子体质谱 (ICP MS)、气相色谱 (GC)、氨基酸自动分析仪及动物模型 ,研究了喷施稀土对茶叶中稀土结合糖蛋白(REE TGP)组成及活性的影响。成品茶中有稀土结合糖蛋白 ;稀土对单糖种类及组成没有明显影响 ,但REE TGP中羟脯氨酸 (Hypro)及丝氨酸 (Ser)含量增加明显 ,而谷氨酸 (Glu)含量则比对照区的低。稀土处理区茶叶制得的REE TGP中La含量增加了 193 % ;REE TGP具有明显的降血糖效果和增强免疫作用等活性。

抗M血型抗原单克隆抗体特性的研究

以OM型人红细胞膜血型糖蛋白A为抗原，通过交瘤技术，获得一株稳定分泌抗M血型抗原的单抗细胞株（4E6）。所分泌抗体类型为IgG2b。4E6能特异性识别M型血型糖蛋白A的双聚体及单体；4E6与M型PanelA红细胞呈持异性反应；临床初步应用表明，4E6可用于对M、N血型系统的分型。

几种表面活性剂对P-gp底物罗丹明123经肠黏膜透过性的影响

目的观察低浓度表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油,Labrasol和聚山梨酯80对肠黏膜P-gp的调控作用。方法使用体外扩散池法评价罗丹明123(R123)经空肠、回肠和结肠黏膜的经时经吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数(Papp),并测定不同浓度表面活性剂对R123和荧光素钠(CF)经肠黏膜透过性的影响。R123和CF在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果R123经肠道黏膜的透过性存在部位差,即以空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少。另一方面,R123经肠道分泌方向的透过性显著地高于其吸收方向的透过性。低浓度的CEL和Labrasol可显著增强R123经吸收方向的透过性,减少经分泌方向的透过性;而低浓度的聚山梨酯80可显著增强R123经吸收方向的透过性,但对经分泌方向的透过性无显著影响。但实验浓度的表面活性剂对CF的肠道转运没有影响。结论低浓度的聚氧乙烯蓖麻油、Labrasol和聚山梨酯80可通过对P-gp功能的抑制而用于改善受P-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。

益气活血解毒法对溃疡性结肠炎复发患者结肠组织P-糖蛋白的影响

[目的]探讨益气活血解毒法对溃疡性结肠炎(UC)复发患者结肠组织P-糖蛋白影响。[方法]90例UC复发患者随机分为2组,中药治疗组45例,西药对照组45例。治疗3个月后对完全缓解及有效病例(其中治疗组39例,对照组32例)进行为期6个月的随访。治疗组给予益气活血解毒立法的中药汤剂,对照组给予柳氮磺胺吡啶治疗,并与20例作正常对照。[结果]治疗前UC组结肠组织P-糖蛋白水平明显高于正常健康人(P<0.01);复发组水平明显高于未复发组(P<0.01);治疗组治疗后及随访时结肠组织P-糖蛋白水平明显低于对照组(P<0.01)。[结论]以益气活血解毒立法的中药溃结复发方,与西药柳氮磺胺吡啶比较,可有效降低结肠组织P-糖蛋白水平,减少耐药性,提高药物的治疗效果从而降低复发率。

天门冬糖蛋白的分离纯化及其糖肽键的研究

冷水浸提中药天门冬，提取物经丙酮分级，得到ＡＧ－ａ，ＡＧ－ｂ和ＡＧ－ｃ三个级份。ＡＧ－ｃ用ＤＥＡＥ—纤维素柱纯化，得到水洗脱级份ＡＧ－ｗ和０．５ＮＮａＣｌ洗脱级份ＡＧ－ｃ。凝胶柱层析和醋酸纤维薄膜电泳，均表明ＡＧ－ｃ为均一性糖蛋白。红外光谱显示，所有的天门冬糖蛋白级份均含有乙酰基团。β—消去反应检测。

天佛参逆转K_(562)/ADM细胞株耐药性的作用及机制探讨

目的 :研究复方天佛参口服液 (TFS)逆转人红白血病耐药细胞株K56 2 /ADM耐药性的作用 ,探讨该药对K56 2 /ADM细胞膜P -糖蛋白 (P -gp)的功能及表达的影响。方法 :体外培养K56 2 /ADM细胞 ,分别用MTT法、流式细胞仪、免疫组化法等方法观察TFS对K56 2 /ADM细胞生长的抑制作用 ,检测K56 2 /ADM细胞膜上P -gp的功能及表达情况。结果 :TFS在非毒性浓度以下能逆转细胞耐药 ,与ADM合用能抑制K56 2 /ADM细胞生长 (P <0 .0 0 5 ) ;K56 2 /ADM细胞内药物浓度升高 ;K56 2 /ADM细胞上P -gp的高表达 ,经TFS作用后其表达下降 ,且 48h后完全消失 ,呈时间依赖性。结论 :TFS能逆转K56 2 /ADM耐药性 ,其机制与抑制K56 2 /ADM细胞膜上P -gp高表达有关。

EMT经p38-MAPK调节乳腺癌MCF-7细胞P-gp介导的多药耐药

目的:探讨乳腺癌细胞中上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与P-糖蛋白(P-glucoprotein,P-gp)介导的多药耐药(multidrug resistance,MDR)的关系及其可能的机制。方法:将携Snail基因的真核表达载体pcDNA-Snail转染人乳腺癌细胞MCF-7,用多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导各组细胞耐药。免疫细胞荧光检测上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间质标志物波形蛋白(vimentin)以及P-gp的表达,MTT检测耐药细胞的增殖,RT-PCR检测Snail、MDR1、p38-MAPK mRNA的表达。结果:细胞免疫荧光显示,转染pcDNA-Snail载体后,MCF-7细胞发生EMT,E-cadherin表达显著降低,vimentin表达显著升高;P-gp在发生EMT的MCF-7细胞中表达显著升高。经DOX诱导,MCF-7/Snail细胞的耐药能力较MCF-7/DOX细胞显著增强(P<0.05)。RT-PCR显示,MCF-7细胞发生EMT后,p38-MAPK表达显著升高(P<0.05),MDR1表达较亲本细胞明显升高(P<0.01)。结论:MCF-7细胞发生EMT后,可能通过p38-MAPK引发P-gp介导的MDR。

胃癌多层CT增强征象与组织分化及p53、P-糖蛋白表达相关性初步探讨

目的初步研究进展期胃癌的多层CT增强征象与肿瘤组织分化及p53、P-糖蛋白(P-gp)表达的关系。资料与方法手术切除且资料完整的胃癌患者66例。所有病例术前均行上腹部多层CT常规及双期增强检查,观察内容包括肿瘤部位、最大直径、胃壁浸润厚度、双期强化率、淋巴结转移等。术后标本经10%甲醛固定、石蜡包埋、组织切片,采用常规HE染色确定组织分化和免疫组织化学检测p53、P-gp在胃癌中表达。比较胃癌的多层CT增强征象与组织分化及p53、P-gp在胃癌表达间的关系。结果73.1%(19/26)均匀强化的胃癌为高/中分化腺癌,75%(30/40)分层强化或不均匀强化的胃癌为低分化腺癌,两者比较差异有统计学意义(P=0.000)。CT双期增强的强化率与胃癌组织分化无关(P>0.05);p53、P-gp在分层强化或不均匀强化的胃癌中阳性表达率显著高于在均匀强化的胃癌中阳性表达(P<0.05)。p53阳性表达还与动脉期强化率、肿瘤大小和淋巴结转移有关(P<0.05),与胃壁浸润厚度、门静脉期强化率无关(P>0.05);而P-gp表达与门静脉期强化率有关(P=0.005),与动脉期强化率、胃壁浸润厚度、肿瘤大小和淋巴结转移无关(P>0.05)。结论胃癌不同的强化方式和双期强化率反映了胃癌的不同组织分化和p53、P-gp阳性表达,提示胃癌的多层CT增强征象与其组织分化及p53、P-gp表达有较密切的相关性。

肠胃清对KB-A-1细胞P-糖蛋白ATP酶活性及MDR1基因转录水平的影响

目的:探讨肠胃清(黄芪、党参、白术等)逆转肿瘤多药耐药的作用机制。方法:制作肠胃清药物血清,观察药物血清对多药耐药细胞KB-A-1P-糖蛋白ATP酶活性及MDR1基因转录水平的影响。结果:肠胃清药物血清对P-gp的ATP酶活性具有抑制作用,并呈剂量依赖性;2.5和5药物血清对MDR1基因转录水平的抑制作用分别达到了58和100。结论:肠胃清逆转肿瘤耐药与其抑制P-gp的酶活性、降低MDR1mRNA表达有关。

Verifynow抗血小板治疗监测系统与血栓弹力图实验对比研究

目的对比研究氛吡格雷抑制血小板聚集的两种方法：Verifynow抗血小板功能检测系统与血栓弹力图实验。方法①随机选取2011年3月～7月在解放军总医院住院及门诊的急性冠状动脉综合征（ACS）患者48例（所有患者对本实验均知情同意），男性35例，女性13例，年龄60-90岁，其用药方案是首先给患者300mg的负荷量，继之以75mg／d维持量治疗。②选择在治疗的第三天服用氯吡格雷75mg／d后2h抽血取样。③采用Verifynow抗血小板监测系统检测氯吡格雷药物抑制率1NHI（％），血栓弹力图实验检测氧吡格雷药物的ADP诱导血小板聚集抑制率（％），两指标进行相关分析、回归分析。结果48例观察对象均进入结果分析，Verifynow的INHI（％）主要集中在0％～20％之间，犬于20％的有10例，占总数的20．8％，其结果的变异系数（CV）为0．74％；血栓弹力图的ADP诱导血小板聚集抑制率结果主要集中在10Voo～60％，小于10％的对象2例，占总数的4．17％，大于60％的对象6例，占总数的12．5％，其结果的变异系数（CV）为：0．54％；两者呈正相关（r相关系数=0．4806，P-0．00054〈0．01）；回归方程：Y=0．267X＋4。577[Verifynow的1NHI（％）为因变量Y；血栓弹力图的ADP诱导血小板聚集抑制率为自变量X]。结论口服氯吡格雷后，Verifynow抗血小板监测系统的INHI（％）与血栓弹力图的ADP诱导血小板聚集抑制率有较好的一致性，其操作更为简便、费用更为低廉，可以作为临床氯吡格雷药物抗血小板功能监测的新方法。

半胱氨酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-色氨酰-青霉胺对血小板聚集和血栓形成的抑制作用

目的探讨自行合成的半胱氨酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-色氨酰-青霉胺(Cys-Arg-Gly-Asp-Trp-Pen,W2003;即Arg-Gly-Mp肽类血小板抑制剂)抗人血小板聚集和动物体内预防血栓形成的活性,并与以前报道的N^a-乙酰-精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰-苯乙胺(AcArg-Gly-Asp- NHCH_2CH_2C_6H_5,W2001)和N^a-乙酰-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-对甲氧基苯乙胺(N^a-Ac-Arg-Gly-Asp-p-methoxyl phenylethylamine,W2002)比较。方法用比浊法和血小板计效的方法测定二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集;用放射性配体分析法测定W2003竞争性抑制[^(125)I]纤维蛋白原(FGN)与血小板糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa的结合;用20%FeCl_3刺激Wistar大鼠的颈总动脉产生动脉血栓动物模型,以被刺激动脉段形成的血栓湿重和干重评价该化合物预防血栓形成的作用。结果W2003有明显的抑制ADP诱导血小板聚集的活性.各浓度点(150,100,50,10,1μmol/L)间与生理盐水对照组比较差异均非常显著(P<0.01);抑制[^(125)I]FGN与血小板结合的IC50值为(31.5±7.0)μmol/L;W2003与以前报道的W2001和W2002比较.预防血栓形成作用的强弱顺序为:W2003>W2001>W2002,与生理盐水比较差异显著(P<0.01)。结论W2003通过抑制FGN与GPⅡb/Ⅲa的结合而发挥抗血小板聚集和预防血栓形成的生物活性。

细菌在胆固醇结石形成中的作用研究

目的 :探讨细菌在胆固醇结石形成中的作用。方法 :用PCR技术扩增 34例胆囊结石病人胆汁细菌培养阴性的黏膜、结石内细菌DNA片段 ,并测定 5 0例胆囊结石病人和 15例对照组胆囊胆汁中 β -葡萄糖醛酸酶(β -G)、内毒素 (LPS)、超氧化物歧化酶 (SOD)和糖蛋白含量及它们之间的相关。结果 :结石扩增阳性为 2 8/34(82 .35 % ) ,大肠杆菌最多 (9/ 2 8) ;黏膜仅有 4例阳性 (11.75 % )。胆囊结石组胆汁中各指标的水平均明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,且与糖蛋白显著相关 (P <0 .0 1)。LPS与 β -G、SOD显著相关 (P <0 .0 1)。多因素分析表明SOD、LPS对糖蛋白的影响最大。结论 :胆囊结石中存在细菌DNA片段 ;细菌可能由代谢产物 (β -G、LPS、SOD等 )影响糖蛋白的分泌 ,参与胆囊结石的形成。

急性白血病患者血清IL-11及可溶性gp130的测定及意义

目的探讨白细胞介素11(IL-11)及可溶性糖蛋白130(sgp130)在初诊急性白血病(AL)诱导缓解过程中的变化及临床意义。方法采用ELISA法分别对36例初诊AL患者治疗前及获完全缓解后的血清IL-11及sgp130含量进行动态观测,同时观察患者外周血白细胞和血小板数量的变化。结果AL患者的血清IL-11水平明显低于正常人(P<0.05),经过诱导化疗获完全缓解后明显升高并接近正常水平,且与外周血血小板数呈正相关;而发病时sgp130水平明显高于正常人(P<0.05),获完全缓解后又明显下降且与外周血白细胞数呈正相关。结论检测患者血清IL-11及sgp130水平可作为AL辅助诊断、治疗估价和判断预后的有意义的指标。

764－3对人血小板功能及血管内皮细胞抗凝作用的影响

研究了丹参的单体７６４-３对血小板α颗粒膜蛋白-１４０、血小板膜糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ复合物的表达和人脐静脉血管内皮细胞抗凝功能的影响。发现７６４-３能抑制血小板膜表面α颗粒膜蛋白-１４０和糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ复合物的分子表达，增加内皮细胞膜表面血栓调节蛋白的分子数和活性，这为阐明７６４-３的抗血栓作用机制提供了新的实验依据。

脑梗死患者血小板活化状态及血小板参数的研究

目的:探讨脑梗死患者血小板膜糖蛋白P选择素(CD62P)、溶酶体蛋白(CD63)以及血小板3项参数即血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)和血小板最大聚集率(MAR)的变化及意义。方法:采用流式细胞术测定168例脑梗死患者血小板活化指标CD62P、CD63的表达,同时对其进行血小板3项参数PLT、MPV和MAR的测定,并与对照组比较。结果:(1)脑梗死患者急性期CD62P、CD63、MPV及MAR较健康对照组以及恢复期患者显著升高,而且恢复期患者上述指标仍高于健康对照组(均为P<0.01),而PLT在脑梗死急性期、恢复期及健康对照组之间均无显著性差异(均为P>0.05)。(2)CD62P、CD63、MPV及MAR与神经功能缺损程度评分呈显著直线正相关(r=0.84、0.817、0.684和0.698,均为P<0.01),而PLT与神经功能缺损程度评分间无相关性(r=0.32,P>0.05)。结论:脑梗死患者血小板大量活化及其体积和最大聚集率的升高参与了脑梗死的病理过程,MPV和MAR较PLT更能反映脑梗死的严重程度。

缺氧缺糖后再给氧给糖对培养心肌细胞膜糖蛋白变化的影响

本实验应用凝集素伴刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ，ＣｏｎＡ）为探针，以能量制剂ＭｇＡＴＰ、氧自由基清除剂ＳＯＤ及钙阻滞剂异搏定作用于体外缺氧缺糖培养后再给氧给糖，观察对大鼠乳鼠培养心肌细胞的影响。发现心肌细胞膜、肌质网膜、线粒体膜等生物膜上存在ＣｏｎＡ受体；缺氧缺糖后再给氧给糖组心肌细胞生物膜上致密阳性产物减少，而用药组不减少，与正常组相近，对照组则无这种阳性产物。提示，尽管这种变化机制尚不大清楚，但与糖蛋白合成、加工、运输和分泌的细胞的结构和功能变化有关。