基于UPLC-Q-TOF/MS技术分析白及中的化学成分

目的通过建立超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析方法,快速鉴定白及中的化学成分。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱,柱温45℃,流速0.4 mL·min^(-1),进样体积1μL;质谱采用电喷雾(ESI)离子源,通过负离子监测模式和全扫描功能,对白及的化学成分进行鉴定。结果通过在线数据库匹配、质谱峰的裂解规律分析并参考相关文献,共鉴定白及中32个化合物,包括2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类化合物19个,菲类化合物8个,有机酸类化合物2个,糖苷类化合物2个,糖类化合物1个。其中10个化学成分为潜在的新化合物,5个化学成分在白及属中首次报道。结论UPLC-Q-TOF/MS方法能快速、准确地鉴定白及药材中的化学成分,为白及的药效物质基础及质量控制研究提供了科学依据。

黄花白及中1个新的苄酯苷类化合物及促凝血活性

目的对黄花白及Bletilla ochracea块茎的化学成分进行研究。方法利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS反相柱色谱及HPLC等色谱方法进行分离和纯化,并通过理化性质和波谱数据分析鉴定其结构。采用体外凝血活性评价高含量化合物2和7对活化部分凝血酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和凝血酶原时间(prothrombin time,PT)的影响。结果从黄花白及干燥块茎的85%乙醇提取物正丁醇萃取部位中共分离得到了8个苄酯苷类化合物,分别鉴定为1-[4′-β-D-(葡萄糖氧)苄基]-4-{4′′-[β-D-葡萄糖氧-(1-2)-β-D-葡萄糖氧]苄基}-2-异丁基苹果酸酯(1)、1,4-二-[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(2)、2-O-葡萄糖基白及苷(3)、手参苷Ⅲ(4)、4-葡萄糖氧基-肉桂酸葡萄糖氧基苄酯(5)、bleformin J(6)、天麻素(7)、4-羟基苄基-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)。化合物2能显著缩短APTT和PT值。结论其中化合物1为新化合物,命名为黄花白及苷A;化合物3~6和8为首次从该植物分离得到。化合物2具有促凝血活性。

2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类对照提取物在白及质量控制中的应用研究

目的 建立以2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类对照提取物为对照的白及质量控制方法。方法 采用ZORBAX Eclipse Plus C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,流动相为0.05%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,柱温35℃,体积流量0.15 mL/min,进样体积为2μL,检测波长为220 nm。分别采用对照品法和对照提取物法测定17批白及饮片中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯-2-葡萄糖苷(2-O-葡萄糖基白及苷)、1-[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(手参苷Ⅰ)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸-2-(6-O-乙酰基)葡萄糖苷(手参苷Ⅲ)、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(白及苷)4个成分的含量,并进行比较。结果 2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类对照提取物中2-O-葡萄糖基白及苷、手参苷Ⅰ、手参苷Ⅲ、白及苷线性关系良好(r≥0.999 9),进样精密度RSD值在0.001%~0.58%,重复性RSD值在0.27%~0.53%,4种成分的加样回收率在98.42%~101.53%,样品溶液在24 h内各成分稳定性良好。两种方法测定结果进行t检验,P>0.05,说明两种方法无显著差异,两种检测方法结果具备一致性。结论 验证了2-异丁基苹果酸葡萄糖氧基苄酯类对照提取物可代替单体对照品的可行性,可应用于白及及其制剂的质量控制研究。

独蒜兰中丁二酸苄酯苷类化学成分的研究

应用反相硅胶ODS、大孔树脂、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20和HPLC等多种色谱分离技术,从中药山慈菇来源之一——独蒜兰Pleione bulbocodioides干燥假鳞茎中分离得到10个丁二酸苄酯苷类化合物和1个苄醇糖苷类化合物,根据理化性质和波谱数据分别鉴定为loroglossin（1）,grammatophylloside A（2）,cronupapine（3）,（-）-（2R,3S）-1-[4-（β-D-吡喃葡萄糖氧）苄基]-4-甲基-2-异丁基酒石酸酯（4）,vandaterosideⅡ（5）,grammatophylloside B（6）,（-）-（S）-1,4-二-[4-（β-D-吡喃葡萄糖氧）苄基]-2-异丙基苹果酸酯（7）,gymnosideⅠ（8）,militarine（9）,dactylorhin A（10）,天麻苷（11）。其中化合物1~7为首次从独蒜兰属植物中分离得到。