新生隐球菌GXM的纯化及其对巨噬细胞甘露糖受体表达调节的研究

目的从新生隐球菌B3501培养上清中分离和纯化荚膜多糖葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖(GXM),观察其是否能调节巨噬细胞甘露糖受体MR的表达。方法采用乙醇沉淀荚膜多糖,十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)特异性沉淀方法获得GXM,将GXM与巨噬细胞共孵育24 h,Western blot检测MR的表达变化情况。结果获得了毫克级的GXM,巨噬细胞与GXM孵育后甘露糖受体(mannose receptor,MR)的表达没有明显变化。结论新生隐球菌荚膜多糖GXM不影响巨噬细胞甘露糖受体MR的表达。

小鼠脑微血管内皮细胞与新生隐球菌GXM作用后基因表达谱分析

目的探索新生隐球菌GXM能否影响脑微血管内皮细胞基因的表达,为进一步研究隐球菌嗜中枢性的分子机制提供线索。方法使用Roche Nimble Gen 12×135K小鼠基因表达谱芯片,筛选小鼠脑微血管内皮细胞系b End.3与不同浓度新生隐球菌GXM作用后差异表达的基因;结合基因本体论(Gene Ontology),使用top GO进行差异基因GO分析,结合GO语义挖掘与隐球菌侵袭中枢神经系统能力相关的差异表达基因的信息;采用荧光实时定量PCR对重要基因PIK3C2G和ADAMDEC1的表达水平变化加以验证。结果 b End.3细胞与新生隐球菌GXM作用前后基因表达对比发现,实验组GXM(90μg/m)组总共有402个基因表达上调,296个基因表达下调,GXM(180μg/m)组总共有421个基因表达上调,564个基因表达下调,细胞膜、细胞骨架、磷酸肌醇-3-激酶活化、1-磷酸肌醇-3-激酶活化、细胞紧密连接等生物过程差异表达基因较为富集;对PIK3C2G基因和ADAMDEC1基因表达水平变化进行荧光定量PCR验证,结果与芯片结果一致,基因表达水平不同程度上升,且与GXM浓度正相关。结论新生隐球菌GXM能够影响脑微血管内皮细胞基因表达,PIK3C2G基因、ADAMDEC1基因表达上调可能和隐球菌穿越血脑屏障有关。

真菌GXM生物学活性及影响因素的研究进展

葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖(GXM)是新生隐球菌(C.neoformans)荚膜的主要成分,经研究发现GXM也存在于毛孢子菌中,是阿萨希毛孢子菌(T.asahii)细胞壁的重要组成成分,与真菌的毒力和致病性密切相关。本文介绍了真菌GXM的生物学活性与影响因素,为真菌的检测及临床致病性研究提供理论依据。

隐球菌荚膜多糖GXM纯化方法的改良研究

目的对采用乙醇和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)特异性沉淀和纯化葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖(GXM)的传统方法进行针对性改良,探索一个过程简单、耗时少、效率高的GXM纯化方法。方法250 mL的H99和R265增菌液分别以乙醇和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)特异性沉淀得到GXM-CTAB复合物。采用24∶1氯仿:异戊醇混合液分离GXM-CTAB复合物,再加入3倍体积的异丙醇沉淀析出GXM。结果采用GXM改良纯化法从250 mL增菌液中分别获得了约7.8 mg和18 mg的H99GXM和R265GXM,H99GXM和R265GXM获得率(GXM/GXM和GalXM混合多糖)分别为39%(7.8/20)和45%(18/40)。此外,传统的GXM整个纯化过程需耗时2周,而改良方法耗时8 d。结论本研究采用的GXM改良纯化法不仅与传统方法的提取效率相当,并且纯化耗时减少,提取过程更加简单。

新生隐球菌荚膜GXM对小鼠神经小胶质细胞产ATP能力及其凋亡的影响

目的分析新生隐球菌荚膜多糖GXM对小鼠神经小胶质细胞能量代谢和凋亡的影响。方法①采用紫外分光光度计检测GXM干预后的神经小胶质细胞能量产物ATP含量的改变情况。②采用AnnexinV-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双标记法流式细胞术检测GXM细胞诱导神经小胶质细胞凋亡的情况。结果①GXM体外可诱导神经小胶质细胞产ATP能力下降。②GXM体外可诱导神经小胶质细胞的凋亡。结论新生隐球菌可通过GXM诱导能量代谢紊乱和凋亡来对神经小胶质细胞产生影响。

一株从家蚕体内分离获得的微孢子虫GXM_2的生物学特性

【目的】研究一株从家蚕体内分离获得的新微孢子虫（GXM2）的致病性和生物学特征,为全面防控家蚕微粒子病提供参考依据。【方法】观察GXM2添食感染家蚕的病症,以半数感染浓度（IC50）法测定GXM2对家蚕的食下感染力,镜检调查GXM2的胚种传染率,并利用光学显微镜、透射电子显微镜观察GXM2孢子的形态、血清学反应、生活史及内部结构。【结果】GXM2感染蚕体病症为：发病急,病程短（6～9d）,出现不蜕皮或半蜕皮症状,类似生理性病害。GXM2对家蚕（蚁蚕）的IC50为2.76×105个孢子/mL,是家蚕微孢子虫（N.b）的4.8倍;对家蚕的胚种传染率为1.19%。GXM2呈卵圆形,大小为（2.49±0.10）μm×（4.19±0.15）μm。GXM2孢子在N.b免疫抗体血清中未能发生凝聚反应,其生活史中发现单核和双核并存,均以二分裂方式增殖,最后形成单核、双核两种成熟孢子;GXM2孢子的极丝有9~11圈,与N.b孢子内部结构有明显差异。【结论】GXM2对家蚕具有较强的致病性和危害性,与N.b异属异种,即要求进行蚕种母蛾微粒子病检疫时应采取分类检验处理技术,进一步完善广西家蚕微粒子病防治技术体系。

两种方法纯化临床分离阿萨希毛孢子菌荚膜多糖GXM

目的使用两种方法分离和纯化临床分离阿萨希毛孢子菌的荚膜多糖葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖(GXM)。方法对临床分离的阿萨希毛孢子菌进行增菌,采用无水乙醇沉淀荚膜多糖,通过十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)对GXM特异性沉淀,分别采用透析法和萃取法分离GXM-CTAB复合物从而纯化GXM。使用苯酚硫酸法测定GXM的浓度。结果通过透析法从200 mL培养上清中获得了约6.6 mg的GXM,阿萨希毛孢子菌GXM的获得率(GXM/GXM和GalXM混合多糖)为13.9%(6.6/47.4)。通过萃取法从200 mL培养上清中获得了约8.4 mg的GXM,阿萨希毛孢子菌GXM的获得率为14.2%(8.4/59)。结论两种方法都成功地提取和纯化了阿萨希毛孢子菌荚膜多糖GXM,萃取法较透析法更为高效。

网格化分布式新安江模型并行计算算法

近年来,网格化分布式新安江模型(GXM)在洪水预报中发挥了重大作用,但在进行洪水过程模拟时,模型数据量与计算量巨大,GXM的计算时间随着模型预热期的增加呈指数增长,严重影响GXM的计算效率。因此,提出一种基于网格流向划分与动态优先级有向无环图(DAG)调度的GXM并行算法。首先,对模型参数、模型构件、模型计算过程进行分析;其次,从空间并行性的角度提出了基于网格流向划分的GXM并行算法以提高模型的计算效率;最后,提出一种基于动态优先级的DAG任务调度算法,通过构建网格计算节点的DAG并动态更新计算节点的优先级以实现GXM计算过程中的任务调度,减少模型计算中数据倾斜现象的产生。在陕西省大理河流域与安徽省屯溪流域对提出的算法进行实验,在预热期为30 d、数据分辨率为1 km的情况下,相较于传统的串行算法,所提算法的最大加速比分别达到了4.03和4.11,有效提升了GXM的计算速度与资源利用率。

基于单片机点阵图形液晶显示器应用

针对GXM-12864液晶显示器没有内部字符发生器的特点,介绍建立相应小汉字库和西文字符库的方法,并给出了8031单片机与GXM-12864之间的接口电路。文中提及的硬件电路和软件设计通用性较强,具有更一般的实际意义。

液晶控制器SED1520与单片机μPSD3334D的接口及显示设计

本文采用基于SED1520控制器的GXM12232-1液晶模块与μPSD3334D单片机PA口以外围设备I/O模式连接,介绍了如何在PSDsoftExpress中进行PA口的配置。给出了用C51硬件描述语言读、写控制器和实现液晶模块显示的流程图。