戊二酸尿症Ⅰ型患者的临床、影像与病理特点

目的探讨戊二酸尿症Ⅰ型患者的临床表现、影像学与病理特点。方法回顾分析作者医院1例经脑活检及尿气相色谱一质谱联用方法确诊的戊二酸尿症Ⅰ型患者的临床与病理学资料，结合国内文献报道的7例戊二酸尿症Ⅰ型患者的临床与影像学资料，总结其临床表现、影像与病理改变特点。结果8例患者均经尿气相色谱质谱联用方法确诊，于出生后1～8个月发病，主要表现为智力发育减退和运动障碍；影像学显示双侧白质和基底节区病变为主；其中1例患者行脑活检检查显示，病变自质出现明显的海绵状变性，未见脱髓鞘改变。结论戊二酸尿症Ⅰ型患者主要临床表现为智力发育减退和运动障碍；影像学显示主要为基底节区、中央区自质受累，外侧裂、池明显扩大；脑病理检查表现为海绵状变性。

戊二酸尿症Ⅰ型1例临床和基因突变分析

目的 探讨戊二酸尿症Ⅰ型的基因突变特点。方法 回顾分析1例戊二酸尿症Ⅰ型患儿的临床资料及基因检测结果。结果 女性患儿,1岁11个月,主要表现为腹泻及抽搐。血戊二酰肉碱水平(0.78μmol/L)及尿戊二酸显著增高。二代测序发现GCDH基因两处变异,c.271+1G>A(IVS4+1G>A),为父源性剪切变异;c.938G>A为母源性错义变异。两处变异的致病性均已有文献报道,但均是国内首次报道。结论 扩充了国内戊二酸尿症Ⅰ型的基因突变谱。

戊二酸尿症I型患者的临床与脑部MRI特征

目的探讨戊二酸尿症I型患者的临床表现及脑部MRI特征。方法回顾性分析8例经尿气相色谱-质谱联用方法确诊的戊二酸尿症I型患者的临床与影像资料,总结其临床表现与脑部MRI特征。结果 8例中男6例,女2例,所有患者尿液戊二酸、3-羟基戊二酸排泄量均明显超出正常范围。主要临床表现为智力发育减退和运动障碍。脑部MRI显示8例患儿均出现额颞叶脑萎缩、外侧裂池增宽以及双侧基底节区对称性长T1长T2异常信号,5例中央脑白质出现长T1长T2异常信号,4例出现硬膜下积液或积血,1例大脑脚对称性长T1长T2异常信号。结论戊二酸尿症I型患者的临床表现无特异性,其脑部MRI较具特征性表现,主要表现为基底节区、中央白质区对称性受累,额颞叶脑萎缩,外侧裂池增宽,MRI对其诊断具有重要价值。

八例戊二酸尿症Ⅰ型患者的GCDH基因突变分析

目的分析8例戊二酸尿症Ⅰ型（glutaric aciduria typeⅠ，GA-1）患者的GCDH基因突变情况。方法对8例经尿液及血液生化检查诊断为GA-1的患者及其部分家系成员，采集外周静脉血，应用蛋白酶K-盐析法提取DNA，PCR产物直接测序法，进行GCDH基因的所有外显子及侧翼序列的突变筛查。结果8例GA-1患者中，7例为经典的婴幼儿发病，1例为成年晚发型。基因分析证实8例先证者均存在GCDH基因突变，其中5例为复合杂合性突变，符合隐性遗传；另3例只发现1个杂合性突变位点。共发现9种突变类型，其中c．148T〉C、c．371G〉A、909delC和c．263G〉A是4个新的突变位点。结论首次在国内报道8例GA-1患者携带GCDH基因突变，其中1例为罕见的成年晚发型。发现了4个新的突变位点，丰富了GCDH基因的突变谱。

福建地区三例戊二酸血症Ⅰ型患儿GCDH基因的突变分析

目的探讨福建地区3例戊二酸血症Ⅰ型患儿基因突变的类型及其临床特点。方法对3例患儿进行串联质谱及气相质谱检查，同时进行磁共振检查，提取外周血基因组DNA，针对戊二酰辅酶A脱氢酶（glutaric-CoA dehydrogenenaes，GCDH）基因的12个外显子及其侧翼序列进行Sanger测序。结果3例患儿均存在GCDH基因突变，1例为c．1244-2A〉C、c．1147C〉T（p．R383C）复合杂合突变，1例为c．1244-2A〉C纯合突变，1例为c．406G〉T（p．G136C）、c．1169G〉A（p．G390E）复合杂合突变。100名正常对照未见相同的突变。3例患儿中仅1例进行了新生儿疾病筛查并及早得到了干预，至今未发病。其余2例由于发现延迟，对智力造成了不可逆的损伤。结论在发现的3例病例中，其中c．1169G〉A（p．G390E）为中国人群中新发现的GCDH可能致病突变类型。早期进行新生儿遗传代谢病筛查具有重要的意义。

四例戊二酸血症Ⅰ型患儿GCDH基因的突变研究

目的分析4例戊二酸血症Ⅰ型患儿的临床资料特点，并探讨其基因突变类型。方法对4例戊二酸血症Ⅰ型患儿进行磁共振成像检查。提取外周血基因组DNA，针对戊二酰辅酶A脱氢酶（glutaryl-CoA dehydrogenase，GCDH）基因设计特异性PCR引物，PCR扩增产物直接测序，确定GCDH基因的突变类型。行血串联质谱、尿气相色谱-质谱等检查。对患儿均给予特殊奶粉、左旋肉碱及维生索B2治疗，随访2～3年。结果4例患儿均存在GCDH基因突变，1例为c．245G＞C（p．Arg82Pro）、IVS10-2A〉C杂合突变，其中C．245G＞C（p．Arg82Pro）来自父亲为新发现的GCDH基因突变类型；3例为IVS10-2A〉C纯合突变，结论在中国温州地区，IVS10-2A〉C突变可能是GCDH常见的突变。

四例戊二酸血症I型患儿临床资料分析与基因突变研究

目的回顾分析4例戊二酸血症I型患儿临床资料特点，并探讨其基因突变类型。方法对戊二酸血症I型患儿进行头颅计算机断层扫描（computer tomography，CT）、磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）影像学检查。应用串联质谱和气相色谱质谱分析患儿血氨基酸、肉碱和尿有机酸含量的改变。提取外周血基因组DNA，针对戊二酰辅酶A脱氢酶（glutaryl—CoA dehydrogenase，GCDH）基因设计特异性PCR引物，PCR扩增产物直接测序，确定GCDH基因突变类型。结果4例男性患儿表现为大头畸形，头围分别为50cm（14个月），47cm（9个月），46cm（5个月），51cm（14个月），均高于同龄儿的正常值。头颅影像学检查发现这4例患儿表现为大脑外侧裂及侧脑室扩大，额颞萎缩，蛛网膜下腔增宽，小脑蚓部异常等。4例患儿血戊二酰肉碱含量分别为：5．8μmol／L，7．5μmol／L，8．3μmol／L，7．9μmol／L（正常参考值为0～0．2μmol／L），同时发现尿中戊二酸含量大量增高。通过GCDH基因突变分析，证实4例患儿存在基因突变，其中C．146—149del4、IVS6-4一Ex7＋4de18、C．508A〉G（P．K170E）、c．797T〉C（P．M266T）和C．420del10为新发现的GCDH基因突变类型。结论戊二酸血症I型患儿以头围异常增大，神经系统损伤为主要临床表现，血串联质谱和尿气相色谱质谱分析对疾病的诊断起重要的提示作用，但确诊还需行基因突变分析。

戊二酸尿症1型28例的临床与实验室特征

目的 分析戊二酸尿症1型患者的临床、生化和基因突变特点.方法 总结北京大学第一医院儿科2003年7月-2013年10月确诊并随访的28例戊二酸尿症1型患者的临床特点、代谢筛查结果、头颅磁共振成像特点以及GCDH基因分析结果,并结合文献复习.结果 （1）28例患者中3例经新生儿筛查发现,余25例为发病后于2个月～17岁获诊.（2）通过新生儿筛查发现者（3例）无明显临床症状.早发型22例（79％）为婴儿期起病,临床主要表现为智力、运动落后或倒退（21例）、肌张力障碍（20例）、惊厥发作（5例）、手足徐动（2例）、呕吐（2例）、嗜睡（1例）和喂养困难（1例）.20例遗留不同程度的智力、运动落后,仅2例发育正常.晚发型3例（11％）,8 ～16岁发病,临床主要表现为运动倒退（2例）、阵发性头痛（2例）和惊厥发作（1例）,治疗后恢复良好,智力及运动恢复如常.（3）23例接受了头颅核磁共振检查,22例有异常表现：特征性的外侧裂增宽、基底节损害、脑白质异常和脑萎缩.（4）28例共检出了35种不同的GCDH基因突变,c.148T＞ C（p.W50R）最常见,发生率为7.7％.未报道的新突变6种（c.628A＞G、c.700C＞T、c.731G＞T、c.963G＞C、c.1031C＞T和c.l109T＞C）.结论 戊二酸尿症1型常导致智力、运动障碍、肌张力异常等严重神经系统损害,患者临床表型多样,发病年龄越早症状越重,预后大多不良.患者的临床表型、生化表型与基因型无明显相关性.新生儿筛查是早期发现患者的关键.

戊二酸致原代培养纹状体神经元神经毒性的体外研究

目的探讨戊二酸（GA）干预体外培养纹状体神经元致神经元损伤的浓度和时间及其损伤机制。方法体外培养新生大鼠纹状体神经元,于体外培养7 d行神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学染色鉴定神经元纯度。纯度达90%以上,用不同浓度GA（1~50 mmo·lL-1）孵育体外培养10 d的纹状体神经元24~96 h。倒置显微镜及赫斯特荧光染料33342（-/＋）荧光活细胞染色后荧光显微镜观察神经元形态变化;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色（MTT）法检测细胞线粒体功能变化;膜联蛋白-V碘/化丙啶双染流式细胞仪检测判断GA诱导纹状体神经元凋亡率及死亡率;实时定量反转录（RT）-PCR及Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸酶（Caspase）-3、Caspase-9表达。结果 GA处理组细胞线粒体功能受损程度呈浓度及时间依赖性改变：随着GA浓度升高,干预时间延长,神经元损伤加重。与正常对照组比较,10 mmo·lL-1、25 mmo·lL-1、50 mmo·lL-1组GA干预24~72 h纹状体神经元活力均比正常对照组显著增高（P〈0.05）;1 mmo·lL-1组干预72 h、96 h与正常对照组比较均明显升高（Pa〈0.01）。50 mmo·lL-1组孵育72 h较孵育48 h细胞凋亡显著增加[（87.63±9.17）%vs（40.90±4.10）%,P〈0.01];25 mmo·lL-1组孵育72 h凋亡率为（24.73±2.95）%。10 mmo·lL-1、25 mmo·lL-1、50 mmo.lL-1GA作用神经元1 h、6 h,Caspase-9和Caspase-3 mRNA表达明显增加,25 mmo·lL-1、50 mmo·lL-1GA处理24 h后神经元Caspase-9、Caspase-3蛋白活化片段增加。结论 GA致纹状体神经元损伤呈浓度-时间依赖性,通过Caspase-9/Caspase-3途径诱导纹状体神经元凋亡,该机制可能与GA血症Ⅰ型大鼠纹状体退行性变有关。