响应面法优化金鲳鱼皮抗氧化肽制备工艺及其组成分析

为促进金鲳鱼皮资源的综合利用,本研究以金鲳鱼皮为原料,探究其抗氧化肽的最佳制备工艺。以水解度和DPPH自由基清除率为考察指标,在单因素实验的基础上,结合响应面试验对金鲳鱼皮的酶解条件包括蛋白酶种类、酶解时间、加酶量、酶解温度以及酶解pH进行优化,得到金鲳鱼皮抗氧化肽的最佳酶解条件,并测定最佳条件下得到的酶解产物的分子量分布及氨基酸组成。结果表明,制备金鲳鱼皮抗氧化肽酶解效果最优的酶为碱性蛋白酶,其最佳酶解工艺为:酶解温度52.3℃、酶解pH10.0、酶解时间8.4 h、加酶量15409 U/g。通过最佳酶解条件制备得到的酶解产物的DPPH自由基清除率为81.59%±2.96%,其分子量主要分布在3000 Da以下,占比高达79.20%,其含有17种氨基酸,甘氨酸为主要氨基酸,疏水性氨基酸占比35.28%。本研究结果为金鲳鱼皮的高值化利用与抗氧化肽的筛选提供了一定的理论依据。

金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白的提取工艺优化及基本特性

为提高金鲳鱼加工副产物——鱼皮的利用率,本研究在前期单因素实验的基础上,以加酶量、液料比和提取时间三个单因素建立模型,采用响应面法Box-Behnken设计实验,优化了胃蛋白酶法提取金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原蛋白(PSC)的提取工艺,并与酸溶性胶原蛋白(ASC)进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、傅里叶变换红外光谱和差示扫描量热仪等基本理化特性的对比研究。结果表明,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白的最佳提取工艺为:加酶量1.5%、液料比23∶1 m L/g、酶解时间27.5 h。此条件下通过实验验证得出,金鲳鱼鱼皮胶原蛋白实际提取率为64.68%,与响应面模型理论预测值65.17%基本一致;此外,本实验提取的PSC有较高热变性温度(30.44℃),与金鲳鱼皮ASC有相似的电泳性质和红外峰型,初步鉴定为I型胶原蛋白。该实验为金鲳鱼鱼皮酶溶性胶原的提取提供了理论参考。

金鲳鱼内脏酸性蛋白酶的提取及应用研究

以金鲳鱼为原料,依次通过p H7.0的磷酸钠缓冲液浸提法和0%~55%硫酸铵分级沉淀法,从内脏中初步纯化出蛋白酶。探讨了温度和p H对酶活力的影响。蛋白粗酶分别应用于罗非鱼鱼皮明胶水解产物的制备、罗非鱼鱼鳞中提取胶原蛋白和虾壳中提取虾青素,同时与猪胃蛋白酶进行了比较。结果表明,金鲳鱼内脏蛋白酶的最适温度为25℃,最适p H为4.0。该酶应用于制备罗非鱼鱼皮明胶水解产物,其酶解能力强于猪胃蛋白酶;应用于提取罗非鱼鱼鳞胶原,胶原的得率为0.65%,不及猪胃蛋白酶;应用于提取虾壳中的虾青素,得到虾青素含量为(65.41±2.51)μg/g,其DPPH自由基清除率为(84.97±2.62)%,活性强于猪胃蛋白酶提取组。因此,研究结果为金鲳鱼内脏蛋白酶进一步利用提供了理论基础。